ACTION DE L'EAU DE MER DILUÉE HYPERTONIQUE DU MILIEU PARASITAIRE

Dans une autre série d’expériences j'ai étudié l’action de l’eau de mer à différentes tonicités depuis celle du liquide physiologique jusqu’à celle de l’eau de mer pure sur ces mêmes parasites.

J’ai pu constater ainsi une série de transformations analogues à celles que javais observées dans la dessiccation des animaux-

(1) MASSART (1891), ATUSHI YASUDA (1897), ROSSBACH (1872), BÜTSOBLI (1888-1889).

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hôtes et dans la dessiccation sur lame des parasites étudiés. L’analogie très grande entre les deux phénomènes me permet de relier les actions de ces deux facteurs : dessiccation et hypertonicité, par la loi d'action suivante :

L’hypertonicité d’une solution par rapport à la tension osmotique du milieu parasitaire normal des Infusoires agit sur ces derniers comme une déshydratation progressive et l’importance des transformations cytologiques du corps infusorial est en relation directe avec le degré hypertonique.

ACCOMMODATION, APRÈS UNE FAIBLE DESSICCATION, A UN MILIEU DE TONICITÉ NORMALE

On sait, et les expériences dont les résultats sont consignés antérieurement en sont une nouvelle preuve, que les organismes subissent de la part du milieu transformé une série d’influences qui, dans certains cas seulement, peuvent être morbides. Si l’agent modificateur (hypertonicité dans notre cas) n’exerce pas sur les organismes une action trop énergique, ces organismes sont susceptibles de s’adapter à ces changements de milieu. Cette adaptation est d'autant plus sûre et rapide que la modification du milieu s’effectue avec plus de lenteur.

Cette accommodation est régie, d’une part, par l’intensité de la variation produite et dépend en cela du milieu, et, d'autre part, par les différences individuelles et les influences passées et dépend en cela des divers organismes observés. Si l’étude du phénomène est assez facile à déterminer en fonction de la variation du milieu sur un même individu, elle est presque indéfinissable en fonction des différences individuelles.

Lorsque je plonge les Protophrya plasmorrhysées dans du liquide physiologique sans intermédiaire, je ne tarde pas à voir les Infusoires se gonfler brusquement, les vacuoles s’arrêtent en diastole tandis que le protoplasma devient vacuolaire. En même temps, ils perdent rapidement leur forme et deviennent ellipsoïdaux.

464 CASIMIR CÉPÈDE

Si, au contraire, je place les parasites dans un mélange d’eau de mer et de liquide physiologique et que, progressivement, j'augmente la quantité de ce dernier liquide, j’observe, lorsque la plasmorrhyse n’est pas très grande au début de l’expérience, une accommodation lente et graduelle des Protophrya avec retour à l’état normal après un temps plus ou moins long.

Le parasite absorbe, par osmose, du liquide ambiant. Peu

Ad'51 ANo AN* 39 M 50

Ag° 30 4245 A" A9 F1G. XIII. Accommodation, après une faible dessiccation, à un milieu de tonicité normale ; #, Vacuole et cytopharynx dilatés. Le protoplasma est en pointillé. x 500.

à peu, son corps prend l’aspect normal. La réfringence et l’opacité particulière qu’il avait pris en se plasmorrhysant, les plis du corps qui s'étaient formés par perte d’eau s’effacent. Les espaces vacuolaires qui se montraient dans l’endoplasme (fig. xIr1) disparaissent assez vite ainsi que le montrent les figures schématiques ci-dessus. Lorsque la vacuole contractile, V, et le cytopharÿnx ont été très dilatés (fig. x), ils diminuent assez vite de volume au début de l’expérience, mais dès qu’ils ont atteint le stade (1h. 12) qui correspond aux stades trifoliés de‘ Koroïn, il leur faut un temps très long pins heures) pour revenir à leur état normal. |

INFUSOIRES ASTOMES : 465

Si l’imbibition succède à une plasmorrhyse trop intense, lendosmose s'effectue d’une façon assez brusque, mais l’Infusoire ne peut s’accommoder. Comme tout à l’heure, les rides s’effacent, le parasite reprend sa turgescence ; mais, bientôt son corps est plus gonflé qu’à l’état normal ; la forme du Cilié devient plus régulière. Son macronucléus lui-même devient elliptique et même subsphérique ; le plasma se scinde en deux régions qui rappellent les zones ectoplasmique et endoplasmique de Koroïp, cette dernière renfermant de nombreuses gouttelettes liquides et enfin le corps infusorial distendu par cette endosmose excessive va diffluer.

De ces observations, nous devons retenir un fait très important aux points de vue cytologique et morphologique qui nous intéressent plus spécialement dans ce mémoire :

Protophrya ovicola n’a pas une forme ovoïde régulière ; son macronucléus n’est pas subsphérique ; son protoplasma n’a pas la structure que Koroïp a décrite.

Nous montrerons dans le paragraphe suivant que Koroïp a mal interprété le micronucléus. De tous ces faits, contrôlés par l’expérience, nous essaierons de tirer des renseignements sur la place de cet Infusoire dans la systématique.

ANATOMIE DE Protophrya ovicola.

MorPHOLOGIE. — Koroïp a indiqué pour Protophrya ovicola une forme trop régulière. Vu par la face dorsale, l’Infusoire est d’après lui grossièrement elliptique ; ses côtés sont symétriques et parfois les deux extrémités sont semblables. Sa figure 1 montre cette étonnante régularité.

Comme je n’ai jamais observé une forme si géométrique chez les Infusoires très vivants et étudiés dans les conditions normales, j'ai, après les observations dont j'ai indiqué les résultats au paragraphe précédent, acquis la certitude que cette régularité morphologique devait être due à des accidents de technique. | |

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Grâce aux longues indications données par Koroïp sur les manipulations qu’il fait subir aux Infusoires, j’ai pu répéter point par point sa propre technique. J’ai confirmé ainsi mon assertion. é

J’ai observé la même forme régulière en laissant s’altérer quelque temps les Infusoires avant de les fixer. Dans ces cas, on voit le corps augmenter de volume et prendre une forme ovoïde ou grossièrement elliptique très régulière. La seule irrégularité observable dans le corps infusorial vient de l’assymétrie de la vacuole unique postérieure. Légèrement déjetée de côté, elle rompt la symétrie en faveur du côté où elle est placée.

Au cours des processus d’imbibition auxquels sont dus les phénomènes que je viens de décrire, le macronucléus de forme irrégulière chez les Infusoires normaux devient de plus en plus régulier en arrondissant ses contours. De la sorte, il apparaît ovale ou elliptique. Parfois, même, il prend une forme régulièrement sphérique. |

Après ces transformations morphologiques, le macronucléus rappelle très exactement les figures demischématiques données par Ko- FoiD dans sa planche.

Le protoplas-

me de l’Infusoire

Fi. XIV. Protophrya ovicola altérées et ayant subi l’imbibition. se scinde très net- Contours, macronucléus, vacuole, micronucléus à la

chambre claire. x 500, tement en deux régions, l’une

plus compacte que KoroïD à décrite comme l’ectoplasme, l’autre plus claire entourant le macronucléus très réfringent, qui à un aspect finement granuleux et montre de nombreuses gouttelettes sphériques de tailles variées. Ces globules endo-

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plasmiques constituent des éléments de réserve. Certains, les plus gros, sont constitués par du glycogène ainsi que le montre la réaction iodique et le procédé de Dappr.

La vacuole postérieure, de taille et de forme très variées est très largement dilatée en diastole. Son état de réplétion est l’indice de mauvaises conditions physiologiques.

MORPHOLOGIE NORMALE DE Protophrya ovicola. — Lorsqu’on fixe par des réactifs très pénétrants l’utérus gravide de Littorina rudis (sublimé acétique, alcool acétique, sublimé alcool ou liquide de Bouin) on obtient des Infusoires qui ont conservé leur forme normale. La méthode des coupes permet alors une étude attentive de l’anatomie de Protophrya. Les frottis effectués selon l'excellente méthode de SIEDLECKI et SCHAUDINN inaugurée par ces auteurs dans leurs recherches sur les Coccidies et préconisée par SIEDLECKI (1902) dans son étude sur Herpetophrya permettent de contrôler la fixation. Mais, sans la première méthode, je n’aurais pas pu définir certains détails cytologiques d’une grande importance systématique comme la présence d’un cytopharynx, et le trajet des stries d’insertion ciliaire.

Protophrya partage avec les Ancistrum une forme irrégulière, le cytostome de l’Infusoire, pris pour l’orifice de la vacuole pulsatile par Koroïp, étant placé postérieurement et un peu déjeté latéralement (fig. xIV et xv texte). À cette forme générale ovalaire s’ajoute chez :Protophrya la concavité du corps, laquelle donne à l’Infusoire,comme l’a déjà observé Koroïp, une surface ventrale par laquelle il s’applique sur l’enveloppe de l’œuf.

EcrorLasme. — L’ectoplasme de l’Infusoire est peu développé. Il présente sur l’une de ses faces une dépression en sillon qui, partant du voisinage de l’extrémité antérieure du corps arrive jusqu’au cytostome. Les bords de ce sillon forment deux lèvres au cytostome. Sur le côté droit, de cette dépression, les stries d'insertion ciliaire sont beaucoup plus distantes les unes des autres que sur le reste de la paroi du corps. Chez les Ancistrum, d’après IsseL (1908), la région située

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à droite du sillon ne montre pas de cils. À gauche de la dépression, les stries d'insertion ciliaire sont rapprochées comme sur le reste du corps.

Ces détails ont totalement échappé à Koroïp (1908).

Crzs. — Les cils n’ont pas partout la même longueur. Ceux qui recouvrent la majeure partie du corps mesurent 6 y de long. À la partie antérieure, leur longueur est un peu supérieure et ils simulent un petit toupet qui est le reste du toupet beaucoup plus développé chez les Ancistrum où il constitue le faisceau fixateur (Maupas 1882-1883, FAURÉ-FRÉMIET 1905) et qui chez les Vorticellidés donne le pédoncule fixateur, selon la théorie ingénieuse de FAURÉ-FRÉMIET (1905).

A la partie postérieure du corps et sur les lèvres du cytostome, se définissent deux faisceaux de cils plus longs qui bor-

dent la dépression signalée précédemment. Ces faisceaux, par

leurs mouvements synchrones, fonctionnent comme des membranelles. Ils rappellent étonnamment les membranelles externe et interne, supérieure et inférieure, décrites par ISSEL (1903) chez les Ancistrum.

L’ENDOPLASME est granuleux et montre, parfois, des substances de réserve sous la forme de globules dont la taille est variable. Certains sont de nature glycogénique, d’autres, de nature graisseuse.

MACRONUCLÉUS. — Le macronucléus à généralement une forme ovoïde, mais toujours irrégulière. Ce n’est que dans de mauvaises conditions d'ambiance, lorsque l’Infusoire se gonfle par une endosmose exagérée que la forme du macronucléus devient plus géométrique. D’autre part, la forme générale, comme les dimensions de cet élément, varient selon le stade de division du Cilié. Alors qu’un Infusoire sortant de la division à un macronucléus de 23 u X8 u, un individu sur le point de se diviser en possède un de 24 u X 15 pu.

Le macronucléus est constitué par une masse homogène dans laquelle s’observent de nombreux grains chromatiques de taille variée (fig. 74). à

INFUSOIRES ASTOMES 469

MicroNUCLÉUS. — Le micronucléus occupe une place peu définie dans l’endoplasme. En général, il est situé à quelque distance du macronucléus et en avant. C’est par erreur d’interprétation que Koroïp l’a figuré en avant et au contact immédiat du macronucléus. Il a interprété le vrai micronucléus comme un corps particulier.

Par l’action du carmin acétique de Schneider, on colore immédiatement en rose le macronucléus et le micronucléus. De plus, par l’Hématoxyline ferrique ou par l’Hémalun, j'ai obtenu de cet élément des colorations très fines qui m’ont permis d'étudier ses détails structuraux. Cette observation du micronucléus aux divers stades de la division transversale et l’analogie de position, de forme et de structure qui existe entre cet élément chez Protophrya et chez les Ancistrum lèvent absolument tous les doutes sur son identification.

A l’état de repos, le micronucléus de Protophrya ovicola est sphérique et mesure 2 & environ de diamètre. Sa chromatine est sous la forme de très fins filaments. Elle rappelle ce que CÉéPÈDE et POYARKOFF(1909)ont observé chez Cepedella hepatica.

DIVISION TRANSVERSALE. — Le micronucléus de Protophrya ovicola subit de nombreuses transformations avant qu’aucun autre phénomène ne fasse prévoir une division transversale prochaine. Il passe par une série de stades qui rappellent les transformations bien étudiées par AWERINZEW (1908) chez Bütschliella opheliae et observées par POYARKOFF et moi chez Cepedella.

La chromatine se porte tout d’abord d’un seul côté du micronucléus puis elle s’ordonnance en un court spirème dont la division donne des chromosomes orientés dans le sens de l'allongement micronucléaire. Bientôt les deux renflements du bissac se séparent. Chacun d’eux emporte la moitié de la chromatine.

Tandis que les deux micronuclei-fils s’énigent,a lol chromatine s’ordonne peu à peu et finalement les micronuclei se trouvent revenus à l’état de repos.

ARCH, DE ZOOL. EXP, ET GÉÊN, — 59 SÉRIE, — T, Il, = (IV), 32

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L’écartement des deux micronuclei-fils peut se faire de manière plus ou moins précoce. Tandis que chez certains individus, le micronucléus est complètement divisé et que les produits de sa division sont situés presque côte à côte, chez d’autres le micronucléus en division apparaît comme un très long fuseau dont chacune des extrémités est placée dans l’un des Infusoires-fils.

A un stade variable de la division du micronucléus, on voit apparaître un sillon transversal qui va s’approfondir progressivement. En même temps se différencie postérieurement une aire hyaline qui va constituer la bouche et le cytopharynx de l’Infusoire antérieur.

Puis, le macronucléus, très allongé, subit un étranglement médian. Bientôt le sillon arqué transversal s’approfondit et finalement les deux Infusoires se séparent.

ENKYSTEMENT SOLITAIRE. — J’ai assez souvent rencontré des Protophrya enfoncées dans la pellicule de l’œuf de manière que leur face ventrale soit tournée vers l’œuf comme dans les cas où l’Infusoire se promène librement à la surface de cette pellicule. L’Infusoire enkysté est visible même aux plus faibles grossissements. La figure 66 montre un de ces individus enkystés. Sous cet état, le parasite continue à vivre d’une façon parfaite ainsi qu’en témoigne le battement des cils. L’Infusoire enkysté sur un œuf de 425 u de diamètre mesure 85 y de long et soulève un peu la paroi (fig. 66).

ENKYSTEMENT DE DIVISION. — Tandis que cet enkystement ne semble représenter qu’un stade transitoire se produisant dans de mauvaises conditions biologiques et n’ayant aucune importance au point de vue du cycle évolutif, j’ai observé des enkystements au cours desquels l’Infusoire enkysté se divisait transversalement à la façon des Infusoires libres et donnait deux individus enkystés côte à côte (fig. 67 et 68). Jamais je n’ai observé le désenkystement de ces individus-fils.

PROCESSUS SEXUÉ. — J’ai observé (fig. 71) des individus accouplés sans étudier les phénomènes karyogamiques qui

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s’effectuent au cours de la conjugaison. J’ai rencontré très rarement des stades de la copulation ; mais l'aspect des couples vient encore plaider en faveur de la parenté de Protophrya et des Ancistrides.

BOUCHE ET CYTOPHARYNX. — L’étude des frottis ne m'a pas donné sur l’anatomie de P. ovicola tous les documents nécessaires à l’établissement certain de ses affinités. L’examen de coupes m’a permis de recueillir d’intéressantes observations à ce sujet. L’épaisseur et la petitesse de l’Infusoire, l’opacité de son endoplasme, la compacité de son appareil ciliaire rendent impossibles des observations cytologiques minutieuses.

D'autre part, l'essai au carmin pulvérisé pour mettre en évidence la présence d’un système digestif, ne m’a jamais donné de faits probants.

L'existence chez Zsselina intermedia de corps verts et de vacuoles alimentaires et l’étroite parenté de cet organisme et de P. ovicola me laissaient supposer, étant donné le mode d'infection des Littorines et le parasitisme palléal de l’Infusoire chez les jeunes Gastropodes, que de plus minutieuses recherches me feraient découvrir un rudiment de bouche chez le parasite décrit par Koroïp.

La méthode des coupes m’a permis cette étude. Par une série de coupes à 5u, j'ai obtenu la succession indiquée ci-dessous.

La première coupe, tangentielle, montre nettement l’existence d’une ciliation inégale. Dans la partie droite d de la surface, les stries d'insertion ciliaire sont beaucoup plus distantes que sur la partie gauche, laquelle n’est représentée que dans la région inférieure. Tandis qu’une distance pouvant atteindre 2 y les sépare dans le premier cas, un espace de 1 seulement existe dans le deuxième. Entre ces deux surfaces inégalement ciliées, se voit nettement un sillon longitudinal s. L. dont l’amorce antérieure est très près de la région antérieure de l’Infusoire. Ce sillon rappelle celui décrit et figuré

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par Issez (1908) chez les Ancistrum. Postérieurement, ce sillon vient aboutir à la région péribuccale de l’organisme. Là, une coupe suivante, plus profonde, montre la différenciation très nette de cils plus longs formant toupet de chaque côté de la bouche. A la partie supérieure, droite sur la troisième coupe, le toupet de cils se montre divisé en deux régions rap-

Fi, XV (4.B.C.D.E.F.6G.). Série de coupes longitudinales de Protophrya ovicola Kofoïd montrant, en 4, D, E, l'ouverture b de la bouche; en À, le sillon ectoplasmique longitudinal s. 4.; en F, l’œsophage æ., terminé en G par la ventouse à flamme (?). x 1.500.

pelant ce que l’on voit chez les Ancistrum. A la partie inférieure, le toupet montre la même disposition et se voit très nettement dans la coupe 4. Entre ces deux amas de cils plus longs, s’ouvre la bouche b. Non loin d’elle se voit nettement la vacuole pulsatile, V, de l’Infusoire. La bouche se continue par le cytopharynx assez long, visible dans les coupes D, Æ, F et G. Celui-ci débouche dans une partie évasée terminale qui paraît munie d’une flamme vibratile : mais mon observation, basée sur des coupes me laisse quelques doutes sur ce sujet.

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