IL -- SUBSTANCE GENANTE SEMBLANT REAGIR SUR LES ORTHOPHOSPHATES
FLUORURE DE SODIUM.
GoEBLER (32), en 1932, a signalé l’atténuation du bleu phospho-molybdique, par le fluorure de sodium. Nos recherches nous ont permis, au cours de 1933, d’établir le degré et les modalités de cette atténuation. L’action du fluorure de sodium sur la formation du bleu phosphomolybdique est triple.
1° Il retarde la formation du bleu ; 2e L’atténue ou l'inhibe suivant la concentration ; 3° Stabilise le bleu qui se fornie en sa présence. -1° Retard dans la formation du bleu. È Z En présence de FNa, le bleu se forme plus lentement et arrive plus lentement à son maximum d’intensité. Le retard est d'autant plus marqué que la concentration du Fluorure est plus forte.
Conc. de F Na dans Atténuation %
milieu de réaction en 0/00 ARE . 2 minutes 5 minutes 0,04 Pat + 34m 0,08 LE 32 Ses
HG. , == 20 % 216%
ADS ES
Aux concentrations voisines de la zone d’inhibiüon dans un milieu contenant 300 mg. de P205 0/00, le bleu apparaît d'autant plus tard que la concentration de F Na est plus forte.
Conc. de FNa Temps d'apparition du Bleu Conc. de FNa Temps d'apparition du Bleu 2 gr. à 3 gr. 0/00 30 secondes 3,2 à 3,4 0/00 60 secondes 3,6 -90 secondes 3,8 160 secondes 4 | après 15 minutes 2) Atténuation et Inhibition. —— Nous avons
déterminé quel était le taux d’atiénuation qui correspondait aux. diverses teneurs des humeurs eï: Fluorure de Sodium.
Concentration du F Na en Intensité colorante G grammes par litre dans :
les humeurs le milieu de la réaction 0: 0 100 % L'éDS 0,04 97 % D ee 0,08 90 % 4 gr. 0,16 84 % 5 gr. 0,20 80 % 7 gr. 0,28 AO RE 10 gr. 0,40 60 14 gr. Ù 0,56 47 D 17"0r: 0,70 38 %
20 gr. 0,80
Ce tableau est vrai pour une concentration en or- ‘tho-phosphate de 32 mg. 70 (exprimé en P par litre) dans les humeurs, ce qui est la concentration moyenne du Phosphore inorganique du sang. L’humeur prélevée étant diluée au un vingt-cinquième, cetle tenéur correspondant à une concentration de 1 mg. 34 en P et de 3 mg. en P205 par litre dans ie milieu de la réaction.
Mais si la concentration en ortho-phosphate est plus forte, il faudra une plus grande concentration de Fluorure de Sodium pour obtenir la même atténuation relative.
C’est ainsi qu’un milieu de réaction contenant 348 mg. de phosphore par litre doit contenir 2 gr. de F'Na par litre pour que le bleu formé soit atténué de 53 % alors que suffisent 0 gr. 59 de F Na dans un milieu contenant 1 mg. 34 de P 0/00 pour obtenir la même atténuation. De même pour obtenir une atténuation de 70 % il faut respectivement dans ces deux milieux 2 gr. 50 et 0 gr. 80 de Florure de Sodium par litre.
Il est done nécessaire d’avoir des concentrations de Fluorure de Sodium trois à quatre fois plus fortes pour obtenir dans ce milieu une même atténuation relative du Bleu formé.
Afin de pouvoir étudier d’une façon aussi exacte que possible la manière dont se conduit le Phosphore inorganique en présence de Fluorure de Sodium, nous avons-été amenés à calculer l’atténuation relative que produisait une même concentration de Fluorure de Sodium pour les divers taux de Phosphore inorganique que nous avons rencontrés au cours de nos dosages.
La concentration de.F Na que nous avons étudiée
est 2 gr. pour mille. Cette concentration est la concentration nécessaire et suffisante pour empêcher la coagulation et arrêter la glycolyse.
La plus grande concentration en *Phosphore inorganique que nous ayons rencontrée dans les milieux biologiques étudiés, a été aux environs de 600 milligrammes par litre.
Posons X’, la valeur corrigée de X (X étant le numéro d'ordre entier ou fractionnel que prend le tube à doser dans la gamme étalon)
NX = nn
n étant l’atténuation pour cent pour une concen- {ration de Fluorure (qui est de 2 gr. 0/00 dans tous nos Cas) et pour une concentration en orthophosphate donnée ; +
C varie avec la teneur en orthophosphate du milieu.
Ainsi 1 — c — 0,900 pour une concentration en P de 34 milligrammes par litre.
1 — © — 0,915 pour une concentration en P de 60% milligrammes par litre.
1 — © — 0,908 pour une concentration en P de 300 Milligrammes par litre.
nes ‘0 # a"
Se
La courbe est sensiblement du premier degré. En se rapportant à cette courbe, on aura les diverses va-
leurs de c pour les diverses concentrations en ortho-
phosphates.
Pratiquement Quand X est au voisinage de 55 prendre comme va- leur de c : 0,0850. ne Quand X est au voisinage de 45 prendre comme va-
leur de c : 0,0875. | Quand X est au voisinage de 35 prendre comme valeur de ce : 0,0900.
On aura exceptionnellement à faire à de telles
ul
concentrations D DS D D ce 0,0950-et 1. c — 0,905 ss dt .c — 0,0975 et 1 — © — 0,902 EX 3 e — 0,1000 et 1 — ec — 0,900
I suffira de multiplier X’ par 10,9, par 25, ou par
34,5, pour exprimer les résultats en milligrammes de
P. P205 où PO“H® par litre.
GŒBLER (32), signale un autre procédé : il suffi. rait d'ajouter AI CI au milieu en quantité suffisante
pour transformer tout F Na en Al F$ et, ainsi, le
dosage pourra normalement s'effectuer.
En terminant ce chapitre, il nous faut noter :
1°) Qu'en un milieu où il y a plus de Phosphate, il faut plus de Fluorure pour empêcher l'apparition du bleu.
2e) Une addition d’un excès de Réactif molybdi
que ne permet pas de faire apparaître le bleu dans
un milieu où sa formation est empêchée par le
Fluorure. me È \