FRACTIONNEMENT DU SERUM ANTIDIPHTÉRIQUE PAR L'ALCOOL

Nous avons utilisé du sérum antidiphtérique de l’Institut Pasteur titrant 300 unités antitoxiques par centimètre cube inactivé, par chauffage peu après sa sortie de l'organisme.

Pour extraire la substance huileuse, nous avons utilisé la technique exposée dans le chapitre précédent. Chaque expérience a été effectuée sur deux centimètres cubes de sérum. é |

Dans la première série de nos expériences nous avons effectué nos msures avec la solution obtenue par diffusion directe de la substance huileuse dans l’eau physiologique. De façon à pouvoir comparer cette solution au. sérum complet, le volume d’eau physiologique ajouté à chaque précipité a été de deux centimètres cubes.

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Titrage du pouvoir antitoxique

Nous avons utilisé la méthode dite du « L + » en employant de la toxine diphtérique étalon préparé à l’Institut Pasteur de titre « L + » — Occ,22.

Nous rappelons le principe de ce titrage.

Une toxine étalon de titre 0,22 par exemple, est une toxine qui, dans Occ,22 contient 101 fois la dose toxique pour un Cobaye pesant 250 grammes.

Une dose toxique, tue en quatre jours un Cobaye de ce poids.

Supposons qu’on veuille déterminer le titre en unités antitoxiques d’un sérum antidiphtérique.

On ajoute 2cc,2 de la toxine éalon dilueé dix fois dans l’eau physiologique (c’est-à-dire 0 ce, 22 de toxine pure) à un volume v de sérum et on injecte le mélange ainsi constitué, à un cobaye, par voie sous cutanée.

Si le sérum n’a pas neutralisé les 100 doses mortel-

les, le Cobaye succombera avant le quatrième jour. Si le -

sérum neutralise 100 doses mortelles, le Cobaye succombera le 4° jour, ou sera très malade.

Si le sérum neutralise les 101 doses mortelles, l’animal ne sera pas affecté par l’injection. En effectuant plu. sieurs mélanges avec des doses croissantes de sérum on pourra donc déterminer le titre approximatif.

On trouvera toujours deux volumes v, et v, dont l’un v, neutralisera incomplètement la toxine, et l’autre V2 la neutralisera complètement.

On recommencera l'expérience en ‘utilisant des doses

de sérum comprises entre les volumes v, et v, jusqu’à ce qu’on détermine le volume v, compris entre v, et Va qui neutralisera exactement 100 doses mortelles. Ce volume v, contiendra (,par définition de l’ unité antitoxique) une une unité antitoxique.

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