CHAPITRE IV
ESSAIS D'IMMUNISATION CONTRE UN PROTEUS PROVENANT D'UN CAS DE DIARRHÉE INFANTILE
M. Cantü, ayant annoncé qu'il allait entreprendre des recherches d'ensemble sur la vaccination et la sérothérapie contre le Proteus, je me suis borné à rechercher s'il était facile d’immuniser les animaux avec une race isolée d’un cas grave de diarrhée infantile.
L’échantillon que j'ai utilisé pour toutes mes expériences avait été isolé par M. Metchnikoft des matières fécales d’un nourrisson mortellement atteint d’une gastro-entérite aiguë. Sa virulence et sa toxicité étaient assez grandes, ainsi que le montrent les chiffres Suivants :
1° Culture de 7 jours en bouillon Martin, vivante : 1/2 ce. en injection intra-péritonéale tuait en 24 heures un cobaye de 500 grammes (avec une culture de 24 heures il fallait 2 ce.).
2 Culture de 7 jours en bouillon Martin, stérilisée. par l’éther : la mort du cobaye de 500 grammes survenait en 24 à 30 heures à la suite d’une injection de 2 cc. dans le péritoine. L’injection intraveineuse de 1 cc. tuait les animaux en moins de 18 heures.
3° Corps microbiens vivants âgés de 24 heures : 3 milligrammes de bacilles humides injectés dans le péritoine, déterminaient en 24 heures la mort de cobayes d'environ 500 grammes.
Pour tuer en 24 heures des lapins d'environ 2.000 grammes, il suffisait de leur injecter, dans le péritoine, 2 cc. d’une culture en bouillon Martin, vieille de 7 jours, ou 10 milligrammes de corps microbiens jeunes.
J'ai d'abord essayé d’immuniser des lapins en leur injectant dans les veines des microbes vivants bien lavés et mis en suspen-
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sion dans un très grand volume d’eau, comme le recommande M. Ch. Nicolle (1).
1'e expérience. — Proteus M, culture de 24 heures sur gélose ordinaire (tube de 170 mm. >< 17 mm.), totalité de la culture délayée dans l’eau physiologique, centrifugée, lavée trois fois et amenée au volume de 10 cc.
Lapin de 2.700 grammes. Injecté très lentement dans les veines :
1% jour : 1/4 goutte d'émulsion au 1/10 (dilué dans 10 ce. eau physiologique)
6° jour: 1 goutte — —— ——
11° jour: 2 gouttes — — = 2
16° jour: 4 gouttes — — — =
21° jour: 6 gouttes — — — —
26° jour: 8 gouttes —— — — — 31° jour: 10 gouttes — — — —
Le 36° jour l'animal fut éprouvé par injection intra-péritonéale de 2 cc. d'une culture de 7 jours en bouillon Martin du même Proteus M ; il succomba au troisième jour. Un témoin du poids de 2.620 grammes était mort en 24 heures.
2° expérience. — Proteus M, culture de 24 heures sur gélose ordinaire (tube de 170 mm. >< 17 mm.). Totalité de la culture délayée dans l’eau physiologique, centrifugée, lavée trois fois et amenée au volume de 10 ce.
Deux lapins : 2.680 et 2.450 grammes. À chacun d’eux injecté très lentement dans les veines :
1% jour : 1 goutte d’émulsion au 1/10 (diluée dans 10 ce. eau physiologique) 6° jour : 2 gouttes — — — —
11° jour : 4 gouttes — = Ke le 16° jour : 6 gouttes — — Le 1 21° jour : 8 gouttes — se LE
26° jour : 10 gouttes PR L AR Pie se 31° jour : 15 gouttes us ml in
1. Cu Nicoue, À. Coxor el E. Conseiz, « Sur l'injection intraveineuse du vibrion cholérique vivant », C. R. de l'Acad. des Sciences. 24 juin 19142, p. 1823,
Le 36° jour les deux animaux furent éprouvés par injection intra-péritonéale de 2 ce. d'une culture de 7 jours en bouillon Martin ; tous les deux résistèrent. [ls étaient encore vivants et bien portants, 15 jours après l'inoculation d'épreuve, alors qu'un témoin de 2.530 grammes était mort en 24 heures.
Ayant ainsi immunisé des lapins par voie intraveineuse, j'ai essayé, en collaboration avec mon collègue et ami M. D. M. Bertrand, de vacciner des cobayes par voie sous-cutanée. Nous avons employé le même Proteus M; nos vaccins, préparés avec des corps microbiens jeunes correspondaient tous à la dilution d’une culture de 24 heures sur gélose ordinaire (tube de 170 mm >< 17 mm.) dans 10 ce. d’eau physiologique.
Dans une même expérience nous avons essayé les sept émulsions suivantes :
l. Bacilles vivants sensthilisés suivant la technique de Besredka avec le sérum des deux lapins immunisés par les injections intraveineuses. Nous avons vérifié par l'épreuve du péritoine, faite d'après les indications de Dopter (1), que ce sérum très agglutinant était aussi antimicrobien.
Il. Bacilles stérilisés par l'éther suivant la technique de Vincent.
IT. Bacilles stérilisés par le chlorure d'éthyle (2).
