CHAPITRE PREMIER
Avant d'exposer nos recherches personnelles, il convient de résumer les travaux antérieurs qui ont porté sur des sujets analogues.
Recherches antérieures
La composition chimique des Tinospora à été l'objet d'un certain nombre de recherches dont les plus anciennes remon-, tent vraisemblablement au milieu du x1x° siècle.
L'examen de tous ces travaux montre une composition analogue pour les différentes espèces étudiées ; il révèle, de plus, une divergence de nature et surtout de proportions entre les substances isolées, selon qu'elles proviennent de tiges ou de racines.
Les tiges renferment un principe amer encore mal connu et parfois une trace d'alcaloïde.
Dans les racines, c'est l’alcaloïde qui domine. On trouve en outre une quantité importante de colombine, autre produit amer isolé du Colombo depuis plus d'un siècle.
A. — Racines
À notre connaissance, la première élude chimique des racines de Tinospora est celle que publièrent en 1895 HEcKkEL et SCHLAGDENHAURFEN sur le Bakis africain [63].
Ces auteurs épuisent successivement la drogue, à chaud, par divers solvants : éther de pétrole, chloroforme, alcool, eau, acide chlorhydrique étendu.
Les deux premiers extraits sont riches en cristaux qui,
so
après plusieurs recristallisations dans l'alcool, offrent T'aspect de fines aiguilles incolores.
Ils fondent à 197°. L'acide sulfurique les colore en jaune safran, Ils sont très solubles dans l’acétone, facilement dans l'alcool et le chloroforme, peu solubles dans l’éther et dans l'eau. Leurs propriétés se rapportent en tous points à celles de Ta colombinet retirée par Wrrrsrock de la racine de Colombo [146], Le Bakis en renferme environ 3 p. 100.
L'extrait alcoolique en contient aussi quelques traces qu'on enlève par l’éther à sa solution aqueuse. Celle-ci est ensuite acidifiée puis agitée avec du chloroforme en présence d'un excès d'ammoniaque. L'évaporation du solvant fournit un résidu azoté qu'on traite, à chaud, par le sulfure de carbone.
Une partie se dissout et abandonne par refroidissement des cristaux incolores en aiguilles soyeuses fondant à 1rS8K°. Ils sont formés de sangoline, alcaloïde déjà trouvé par les auteurs dans les racines du Sangol (Cocculus Leaeba DC.) et du faux « Pareira brava » (Cissampelos Pareira L.).
Le résidu amorphe, brunâtre, insoluble dans le sulfure de carbone, serait un alcaloïde également signalé dans le Sangol. Il peut être identifié avec la pélosine isolée jadis par Wiccers [145] des racines du Cissampelos Pareira L.
Le Bakis renferme à peine 1 p. 100 de ces deux alcaloïdes qui donnent les réactions colorées suivantes
RÉACTIFS SANGOLINE PÉLOSINE
Acide sulfurique concen-
DRESSÉ TO OU MES Jaune paille Jaune + foncé ou safran NCITeMIrIMUe Nr re : Jaune Jaune
Acide sulfurique (20 p.) | —+ acide nitrique (1 p). Brun Vert
Acide sulfurique + acide SÉlÉDIEUX TR Te Brun, palissant Vert après 1/4 d’h.
Acide sulfurique + acide MOI OI EE EE PEETN Rose violacé Indigo, puis vert ct. morphine
Après quelques recherches sur la matière colorante jaune du Bakis, HECKEL et SCHLAGDENHAUFFEN concluent à l'absence de berbérine.
Ils signalent, en plus des substances précédentes, un certain nombre d’autres constituants de moindre intérêt : corps gras, résine, sucres, sels fixes, matières gommeuses, amyla-
cées et cellulosiques.
L'étude des racines de Tinospora asiatiques est loin d'être aussi complète et aussi détaillée.
En 1897, Harrwicx [69] essaie de retrouver dans la racine du Tinospora cordifolia Miers la sangoline et la pélosine du Bakis. Il met en évidence une substance alcaloïdique donnant une coloration jaune avec les acides sulfurique et nitrique, bleue avec le réactif sulfomolvbdique. La drogue renferme en outre 2,22 p. 100 de colombine.
L'année suivante, dans un travail sur la même racine, GResHorr [56] traite par de l’éther un extrait alcoolique sirupeux et obtient un principe amer qui forme à la longue dans l'alcool de beaux cristaux incolores. Ce n’est ni un alcaloïde ni un glucoside. Repris par de l’eau et agité avec du chloroforme, l’extrait alcoolique cède encore à ce solvant une grande partie du principe amer. Le rendement est environ I P. 100.
L'auteur obtient aussi un alcaloïde par épuisement du même extrait au moyen d'éther en présence de carbonate de sodium ; il ne paraît pas identique à celui de la tige.
En 1902, Boorsma [191 procède ainsi avec les racines de différents Tinospora (T. Rumphü, cordifolia, Teysmannii, CriSpa) :
Un épuisement éthéré de l'extrait alcoolique repris par l’eau élimine d’abord la colombine. La solution aqueuse est ensuite agitée avec du chloroforme qui, évaporé, fournit un résidu jaune très amer. On traite le résidu par de l’eau chaude qui le dissout à l'exception d'une petite quantité de picrorétine, substance amère sur laquelle nous reviendrons. On défèque la solution, ajoute au filtrat de l'acide sulfurique et du carbonate de baryum en excès. On évapore et porte à l'ébullition avec de l'alcool, Après distillation du solvant, on reprend par de l’eau acidulée, alcalinise où non et agite
Pres
successivement avec de l'éther, du benzène et du chloroforme qui abandonnent, surtout ce dernier, une substance jaune foncé, amère, soluble dans l’eau chaude et donnant les réactions générales des alcaloïdes.
L'acide sulfurique la colore en vert olive avec des stries violettes par addition de nitrate de potassium ; le réactif sulfovanadique produit une coloration pourpre, l'acide nitrique une coloration rouge brun. L'eau de chlore communique à la solution chlorhydrique une teinte rouge (réaction de KzuNGE [77]) et le réactif iodo-ioduré provoque dans la solution alcoolique la formation d’aiguilles sombres. Se basant sur ces caractères, qu'il juge spécifiques, l’auteur conclut à l'identité de l'alcaloïde avec la berbérine.
En résumé, Boorsma a décelé, dans les racines de plusieurs Tinospora asiatiques, de la colombine, de la berbérine et parfois un peu de picrorétine. Ces deux dernières substances font défaut dans les organes jeunes.
Enfin en 1928, Ke et Barroscn [76], procédant à la caractérisation microchimique de la berbérine au moyen de divers réactifs : iodure de potassium, bromure de potassium, acide nitrique, n’ont trouvé aucune trace de cet alcaloïde dans la racine du Tinospora cordifolia Miers.
Parallèlement au Bakis, HECKEL et SCHLAGDENHAUFFEN ont étudié les racines du Cocculus Leaeba DC.
Ces auteurs avaient déjà fait, quatre ans plus tôt, une communication relative à la composition de cette drogue [621]. C'était d’ailleurs le premier travail chimique dont la plante faisait l'objet. Ils l’appelèrent provisoirement Cissampelos Chatini mais ne tardèrent pas à reconnaître sa véritable identité.
\vant employé la même méthode d’épuisement que pour le Tinospora Bakis Miers, ils arrivèrent à des résultats absolument comparables, puisque les teneurs en principes isolés étaient seules différentes.
Le Sangol serait notablement plus riche que le Bakis en substances actives.
Il contiendrait en effet 4 p. roo de colombine, 3 p. 100 de sangoline (ancienne chatinine des deux auteurs) et 2 p. 100 de pélosine.
ASDE
B. Tiges
Le principe amer des tiges de Tinospora a été obtenu jusqu'ici par deux procédés : l’un consiste à extraire la substance au moyen de solvants organiques, l’autre à l’adsorber par du noir animal pour la récupérer ensuite.
C’est au premier groupe de techniques que s'adresse FLückicer [46] dans son travail sur les tiges du Tinospora cordifolia Miers.
L'auteur épuise la drogue par de l'alcool à l'ébullition en présence d’un peu de chaux. Après évaporation du solvant, il reprend l'extrait par du chloroforme qui enlève, ditil, une trace de berbérine, puis dissout le résidu dans de l’eau bouillante.
L'addition d’ « acide tannique » produit dans la solution un précipité qui, mêlé à du carbonate de plomb et épuisé par de l’alcool, abandonne une substance amère.
BoorsMA arrive à un résultat semblable en étudiant les tiges des Tinospora Rumphü, cordifolia, Teysmannü et Crispa :
Diverses impuretés sont éliminées par de l’éther et surtout, après transformation de la drogue en extrait chloroformique, par du benzène bouillant. L'extrait ainsi purifié est traité par de l'alcool à l’ébullition qui laisse déposer en refroidissant une substance amorphe, incolore et insipide, déjà rencontrée dans la phase précédente. Ces opérations ne séparent qu'une faible quantité du principe amer ; il se concentre dans le filtrat qu'on évapore. Après un contact assez long avec une solution de carbonate de sodium, on acidifie et épuise successivement par de l’éther et du chloroforme.
L'évaporation respective de ces solvants fournit un résidu brun, collant, et une substance jaunâtre pulvérulente, tous deux d’une amertume remarquable.
BoorsmA décrit aussi une méthode plus courte : elle comprend trois purifications par du benzène, la première sur la drogue elle-même, les deux autres, en milieu alcalin puis acide, sur Pextrait chloroformique qui en provient.
Le second procédé d'extraction : adsorption du principe amer par le noir animal, à 6té employé avec succès par
moe
ALrueer dont le travail sur la chimie des Tinospora date de 1809 et paraît être le plus ancien [31.
Un extrait aqueux de liane est déféqué par le sous-acétate de plomb, Après élimination du plomb, on agite le filtrat avec du noir animal et le noir, séché, est mis à digérer avec de l’alcool-éther, Par concentration, le principe amer se rassemble peu à peu sous forme de gouttes que l’addition d'eau de chaux semble favoriser. On le purifie en le dissolvant plusieurs fois dans l'alcool absolu d’où on le précipite par de l’eau : 2,5 livres néerlandaises de tige fraiche (1.250 ge.) donnent environ 2 g. de substance amère que l'auteur désigne sous le nom de picrorétine pour traduire son soût et son aspect résineux.
BoorsMa à également utilisé un procédé du même genre à partir d'un décocté de liane, mais il épuise le noir animal avec du chloroforme et purifie l'extrait par du benzène, comme il a été dit plus haut.
En 1927, MaRAKoN [93] essaie d'appliquer aux tiges du Finospora Rumphii Boerl. une méthode inspirée de FLüexi- GER : précipitation du principe amer au moyen d’ « acide tannique » qu'il fait précéder d'une purification par dialvse ; mais il juge cette technique défectueuse et adopte alors le procédé suivant :
Un extrait aqueux de la drogue est repris par de l'alcool qu'on distille ensuite ; le résidu traité par de l’eau chaude fournit une solution qui, après défécation, est portée à l'ébullition avec du noir animal. On sèche le noir et l’épuise par de l'alcool absolu. L'évaporation du solvant laisse un résidu visqueux blanc jaunâtre qui constitue le principe amer. Imbibé de chloroforme et chauffé vers 60°, il se transforme en écailles blanches facilement pulvérisables. Le rendement atteint 0,17 p. 100 de tiges fraîches, soit 0,95 p. 100 de tiges sèches.
Le principe amer extrait par ces procédés est toujours amorphe. On obtient, selon le degré de pureté, un produit résineux ou pulvérulent plus ou moins jaune et hygroscopique, voire même, d'après MaArAKoN, une poudre blanche déliquescente d'aspect cristallin, Nous l’appellerons picrorétine, pour conserver la désignation d'ALTHEER, le nom de tinosporine cité par Tres et Wenmer [128] paraissant être sans origine précise.
Les auteurs s'accordent pour lui reconnaître les mêmes caractères.
La picrorétine se dissout difficilement dans l’eau, surtout à froid, en donnant une solution opalescente. Elle est soluble dans les solutions de carbonate de sodium et la lessive de soude, peu soluble dans l’eau de chaux, propriétés parfois appliquées à son extraction, L'alcool la dissout très facilement ; elle est également soluble dans le chloroforme — difficilement pour MaArAKoN — l’acétone, l’éther acétique, l'acide acétique. L’éther la dissout très peu, le benzène seulement à l’ébullition.
Sa solution alcoolique est lévogyre.
Elle fond à 154-155°.
Elle ne contient pas d'azote. L'analyse élémentaire donne la composition suivante :
CDD AAAIE bo = Er O p. 100 (par différence) — 47,18
(MARANON).
Par ébullition avec un acide dilué, elle libère une substance insipide et réduit la liqueur de Fehling. Suivant BoorsmaA, la réduction plüs ou moins nette ne permet pas de conclure à une nature glucosidique. Pour MarRAKoON, au contraire, la picrorétine serait un glucoside ; bien plus, l'obtention de glucosazone à partir des produits d'hydrolyse et leur odeur lui font envisager l'association possible de molécules de glucose et de groupements aromatiques.
L'acide sulfurique donne au principe amer une teinte vert foncé devenant brun puis pourpre. La réaction est plus nette avec un demi-volume d’eau.
Si l’on ajoute à une solution acétique de picrorétine de l'acide sulfurique concentré, il se fait un anneau vert foncé ; par agitation, le liquide devient pourpre, Le brome produit, dans la même solution, une teinte orangée virant au rouge carmin,
L'acide nitrique dissout la picrorétine et la colore en jaune clair.
ALTHEER signale la coloration violette que donne le mélange sulfochromique avec la picrorétine, même sur une
Le
section de tige. Boorsma conteste ce caractère qui serait dû, d'après lui, à l’impureté de la substance.
La toxicité de la picrorétine paraît négligeable : 5 mg. injectés sous la peau d'une grenouille n’occasionnent qu'une augmentation temporaire des réflexes ; 25 mg. sont sans action sur un cobaye. Bacon confirme l'inactivité de la substance, même à doses énormes.
Comme nous l'avons vu, certains auteurs mentionnent aussi, dans les tiges de Tinospora, la présence d’une trace d’alcaloïde,
FLÜCkIGER l'extrait par ébullition avec de l'alcool et de la chaux, évaporation du solvant et dissolution dans du chloroforme ; il obtient un résidu qu'il identifie à la berbérine.
En 1906, BAGoN, étudiant les tiges de T. crispa, n’y trouve pas d'alcaloïdes, sauf, dans certains cas, une quantité infime qui donne, en solution chlorhydrique, une coloration rose sous l'influence de l’eau de chlore ; maïs, comme l’obtention de berbérine-acétone proposée par Gornin [54] en 1902 demeure infructueuse, on doit, d’après l’auteur, réserver toute conclusion sur la nature de la substance.
Boorsua signale d'autre part, dans les tiges de T. Rumphi, une trace d'alcaloïde incolore dont il a négligé l'étude.
Nous regrettons de n'avoir pu nous procurer le mémoire de FELrGrANo [44] sur la composition chimique du T. reticulata, suivant lequel la drogue contiendrait à la fois de la berbérine, un glucoside et un autre principe amer.
Notons enfin que Boorsma a recherché en vain des saponines et qu'il a trouvé dans les feuilles des T. Rumphit, cordifolia et Teysmannii, une substance sucrée analogue à la elyeyrrhizine, mais non réductrice après hydrolyse acide.
En résumé, on a extrait :
1° des racines
du Tinospora Bakis (HECKEL et SCHLAGDENHAUFFEN) :
de la colombine deux alcaloïdes : sangoline et pélosine pas de berbérine
de divers Tinospora asiatiques T. cordifolia :
un principe amer cristallisé }
un alcaloïde pas de berbérine (KLEIN et BArToscH)
(GRESHOFF)
T. Rumphiü, cordifolia, Teysmannii, crispa (BoorsMA) :
de la colombine des traces de picrorétine de la berbérine
du Cocculus Leaeba (HECKEL et SCHLAGDENHAUFFEN)
de la colombine deux alcaloïdes : sangoline et pélosine pas de berbérine
2° des tiges de divers Tinospora asiatiques pas de colombine (?) un principe amer non cristallisé (picrorétine (?) — glucoside (MARAKON) ù (BoorsuA) des traces d’alcaloïde
— berbérine (FLÜüCkIGER, BoorRsMA) A (Bacon)
