PREPARATION ET CONSERVATION
Les auteurs ukrainiens ont décrit les techniques employées pour préparer le sérum de BOGOMOLETZ.
Sur un animal de l’espèce à laquelle ce sérum est destiné, on prélève la rate et la moelle osseuse. Il importe que, au moment de la sacrification, le sujet soit en excellente santé, afin que le S.R.E. soit parfaitement indemne de toute lésion. Lorsque le S.A.R.E.C. est destiné à l’homme, on peut utiliser les rate et moelle osseuse de fœtus âgés d’au moins six mois, non porteurs d’affections médicales et expulsés à la suite de traumatismes obstétricaux. La pulpe splénique est morcelée aux ciseaux et lavée avec du sérum physiologique stérile. On prend neuf parties de rate que l’on broie au mortier avec une partie de moelle osseuse. Du sable stérile est ajouté, qui permet d'obtenir une pulpe très fine d’une homogénéité parfaite. On ajoute alors trois à cinq fois son volume de sérum physiologique, on centrifuge à la vitesse de 1.000 toursminute pendant une minute. On peut aussi laisser sédimenter pendant une heure à la température ordinaire. On obtient alors une colonne divisée en trois parties : la partie la plus dense constitue le culot de centrifugation; elle est séparée de la partie supérieure graisseuse par une zone plus claire. C’est cette dernière qui,
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prélevée, servira à sensibiliser les animaux producteurs
de sérum. Le liquide antigénique est conservé aseptiquement à la température de + 4° C.
Les espèces les plus souvent utilisées et qui semblent fournir le sérum de meilleure qualité, sont le cheval, le mouton et le lapin. La voie intra-veineuse est obligatoirement utilisée. Les injections, au nombre de quatre ou cinq, sont pratiquées de trois en trois jours à doses croissantes de 30 à 40 % chaque fois. Mais la dose totale de broyat ne doit pas dépasser 20 gr. pour un animal de poids égal ou supérieur à 100 kg. Cependant, un lapin de 2 kg. 500 recoit proportionnellement une dose plus forte : 0 gr. 2 à 1 gr.
Une semaine après la dernière injection, on recueille aseptiquement le sang de l’animal ainsi préparé et on recherche jusqu’à quelle dilution le sérum dévie complètement le complément en présence de l’antigène qui a servi à sa préparation. Le taux oscille en général entre le 1/100° et le 1/250°, une approximation de 1/25° est largement suffisante pour en déduire les doses à utiliser en thérapeutique.
Voici maintenant un exemple de préparation et de titrage du S.A.R.E.C., que nous empruntons à CONZE, ILINE, COLAS et TOUPLAIN
« Le cadavre du conducteur X..., vingt-trois ans, crâne écrasé par un camion le 3 septembre 1948 à 18 heures, est amené à 20 heures à l'hôpital. :
L'enquête judiciaire nécessite une nécropsie dans les heures suivant la mort.
À 21 h. 30, c'est-à-dire trois heures et demie après la mort, l'autopsie est pratiquée; le sternum et la rate sont prélevés d'une manière aseptique et déposés dans un récipient contenant du sérum physiologique stérile additionné de 500.000 unités de pénicilline et mis au frigidaire à + 4°.
Le sujet ne présente pas de lésions viscérales, en particulier de tuberculose pulmonaire; B.W. et M.KR. se montrent négatifs.