TABLEAU IV

| XFe Différences maxima Sang étudié (rapportées à 100 mg de fer) (51,8 — Sang de bœuf .. ... 450,1 3,3 (50,6 2,3 (56,6 os Sang oïNnore Mine 455,2 2,5 (54,6 3,9 (36,1 se Sang humain d’anémique 437,4 3,6 (36,8 2,0 Sang humain normal .. .. 0 3 6

Nous avons alors cherché, afin d’y remédier, quelle pouvait être la cause des différences anormales constatées; voici ce que nous avons alors observé:

Comme dans la technique de WonG, nous nous étions jusque là contenté, pour libérer le fer de l’hémoglobine, d’additionner 0 cm°, 5 du sang étudié de 2 cm* d’acide sulfurique concentré et de secouer le ballon en tournant pendant une à deux minutes. Or, l’action de l’acide sulfurique sur le sang en entraîne immédiatement la coagulation; aussi, la simple agitation pendant une à deux minutes à la température de 40 à 45 degrés âtteinte par suite du mélange ne suffit généralement pas pour provoquer la désagrégation complète du magma formé et donner un liquide homogène; il en résulte que lorsque, aussitôt après, on dilue, plusieurs fragments du magma peuvent persister et retenir une certaine proportion de fer. tr

C’est à cette mauvaise liquéfaction qu’il fallait attribuer

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les différences anormales ci-dessus constatées; en effet, dès que nous avons évité cette cause d'erreur, nous sommes parvenus avec le sang à la précision même que nous avions atteint avec les solutions d’alun de fer et d’ammonium.

Pour cela, nous avons apporté au mode opératoire de Won la nouvelle modification suivante: « Mettre la prise de 0 cm° 5 du sang étudié (sang défibriné) puis les 2 cm° d'acide sulfurique concentré dans un large tube en Pyrex; chauffer légèrement sur une petite flamme de façon à ne pas dépasser 80-85 degrés, température très inférieure à la température d’ébullition de l'acide; en même temps, bien mélanger avec un agitateur. On obtient ainsi rapidement (en trois minutes au maximum) un liquide toujours homogène qu’on additionne de 2 cm de la solution de persulfate de potassium saturée; après avoir agité et refroidi, transvaser quantitativement le tout dans un ballon jaugé de 50 cm* bouchant à l’émeri, en s’aidant de lavages de l’agitateur et du tube à l’eau distillée, lavages qu’on poursuit jusqu’à dilution à environ 25 cm° du contenu du ballon; puis, terminer le dosage de la façon habituelle compte tenu des modifications déjà indiquées ».

La température atteinte par suite du chauffage ci-dessus restant relativement basse, nous n’avons à craindre pas plus la moindre évaporation de l’acide sulfurique que la moindre coloration jaune ou brune pour le liquide clair ultérieurement séparé du précipité tungstique, évaporation et surtout coloration qui pourraient fausser le dosage colorimétrique (59).

(59) L’évaporation serait d’ailleurs sans grande influence grâce à notre augmentation de la concentration en sulfocyanure de por tassium (voir page 69),

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Dans ces conditions, la précision minimum de 2 % s'étend aux sangs, comme le montre bien le tableau V où sont résumés les résultats obtenus pour plusieurs prises d’essai de mêmes sangs (non hémolysés) après adoption de la nouvelle modification.