CR CON EE NI

À l’aide de cette courbe il est donc possible de déterminer facilement, en mesurant la déviation correspondant à la variation de la densité optique, la conceñtration en albumine d’une urine à examiner.

Le mode opératoire est le suivant:

On mesure exactement dans un tube à essai en verre

Pyrex:

Urmertritréel(De= 7 40e ere 5,0 cc.

Solution d’Acide sulfosalicylique à 20% .... 1,0 cc. Solution émulsive (si nécessaire) .......... 0,5: cc:

Mélanger et chauffer au B.M. à + 80° pendant 5 minutes. Introduire la solution albumineuse trouble et refroidie dans la cuve de l’appareil préalablement ajusté et effectuer les mesures aussi rapidement que possible.

On voit que la courbe d’étalonnage n’est pas sensiblement une droite et que le maximum de sensibilité se trouve compris entre 0 gr. 1 et 0 gr. 25 d’albumine par litre, étant donné d’un côté l’allure de la courbe et de l’autre côté la sensibilité de la cellule photoélectrique, limitant ainsi les mesures aux deux extrémités de la courbe.

Nous insistons sur le fait que cette courbe peut servir au dosage de l’albumine pour toutes les solutions albumineuses ayant une densité optique vide de D — 75 à 80 et en ajustant au préalable la cellule photoélectrique à l’aide de l’eau distillée comme solution standard limite à 100° M.V.

Si on procède à cet ajustement préalable de l’appareil au moyen d’eau distillée avant chaque mesure, la courbe d'étalonnage établie à l’aide des solutions témoins dans des conditions déterminées restera toujours valable pour n’importe quel diaphragme, n’importe quelle épaisseur de couche et n'importe quelle intensité de courant.

Distinction de la Sérine et de la Globuline.

L’albumine urinaire vraie est, comme l’albumine du sérum sanguin, un mélange aux proportions variables de sérine et

de globuline. Il est possible de séparer complètement ces deux fractions albuminoïdes par le procédé suivant:

L’urine étant exactement neutralisée par la soude diluée, vis-à-vis de la phénolphtaléine, on en sature à froid un volume donné par du sulfate de magnésie pulvérisé, à raison de 8 gr. par 10 cc. d’urine. La globuline se sépare en gros flocons, qu’on peut recueillir par filtration. Le liquide clair filtré contient la sérine.

Pour le dosage néphélométrique à la cellule photo-électrique on procède donc tout d’abord à la mesure de l’albumine totale sur une fraction d'urine, Puis on précipite la globuline et sur le filtrat on effectue la précipitation de la sérine au moyen de l’Acide Sulfosalicylique à chaud, comme ci-devant. On mesure le degré d’opacité de cette seconde fraction de l’urine à la cellule photo-électrique et on obtient le taux de la sérine urinaire. Par soustraction de cette valeur du taux en albumine globale on reçoit la teneur en globuline de l’urine.

Recherche et dosage des Albumoses:

Les albumoses se recherchent dans l’urine préalablement désalbuminée. A cet effet on emploie l’acide sulfosalicylique à 20% à la dose de 5% environ. Après coagulation de l’albumine, laisser refroidir, compléter avec de l’eau le volume primitif de l’urine. Agiter et filtrer limpide.

Sur le filtrat on cherche les albumoses, qui précipitent à l’ébullition et complètement, par le Sulfate d’Ammonium à saturation (environ 7 gr. pour 10 cc. d’urine) en milieu

neutre ou acide.

On détermine donc d’un côté lé taux global de l’albumine urinaire. Puis on mesure le degré d’opacité du filtrat limpide. On ramène avec le colorant neutre à D — 75 M.V. On précipite, par l’addition de Sulfate d’Ammonium, les albumoses et on mesure le degré d’opacité de la solution trouble, le nombre des M.V. lu correspond aux albumoses,

Recherches et dosage de l’Albumine acéto-soluble de Patein.

Cette fraction protidique ne se rencontre que rarement dans les urines.

Pour séparer l'albumine acéto-soluble de lalbumine vraie, lorsqu'elles existent ensemble, on chauffe l'urine jusqu'à l'ébullition, après l'avoir additionnée d'un peu de NaCl et de quelques gouttes d'acide acétique au 1/10. On ramène au volume initial. S'il se forme un précipité, c'est de l’albumine vraie, que l'on peut doser à la cellule photo-électrique en tenant compte de la dilution.

Une deuxième fraction d'urine est traitée de la même façon, puis on filtre bouillant. On laisse tiédir le filtrat et on y ajoute de l'Acide nitrique dans les proportions de 1 cc. NOSH sur 10 ce. d'urine. L’albumine acéto-soluble précipite dans ces conditions. On effectuera le dosage à la cellule photo-électrique au moyen du liquide chaud pour éviter des erreurs dues à la présence éventuelle d'albumoses, celles-ci restent en solution à chaud, tandis que l'albumine acétosoluble, précipitée, est insoluble à la chaleur.

Toutes ces fractions d'albumines donnent d'après nos expériences des floculations à degré opacimétrique sensiblement stable et peuvent être déterminées par simple lecture de la courbe néphélométrique établie pour les urines albumineuses.