LA FLUORESCENCE OBSERVÉE À LA LUMIÈRE ARTIFICIELLE

aperçûmes, entre autres obstacles, que le même dosage variait en apparence d’une heure à l’autre et cela du fait seul des variations de la lumière solaire : la fluorescence apparaissant d'autant mieux que la lumière est plus intense et inversement. Il était donc de toute nécessité d’observer cette fluorescence avec un éclairage d'une intensité fixe, invariable, toujours égale à elle-même.

Il est bien évident qu'un tel éclairage ne pouvait être fourni par la lumière solaire et que nous devions demander la solution du problème à un éclairage artificiel.

D'autant que dès 1903, W. Schlesinger avait remarqué que pour rendre évidente, une fluorescence à peine marquée, il suffit d'éclairer le liquide avec une lentille, transmettant les rayons lumineux fournis en l'espèce par une petite lampe électrique de poche : « On voit alors se former dit-il, dans la solution une boule lumineuse verte. »

Cette constatation nous sembla intéressante et c’est en nous inspirant de cette idée que nous avons imaginé, tout d’abord un dispositif spécial dans lequel la source éclairante était représenté par un manchon incandescent, alimenté soit par le gaz, soit par l'alcool. Mais nous nous sommes convaincu bientôt que ni le gaz, ni les vapeurs d'alcool ne pouvaient remplir les conditions exigées, c’est-à-dire fournir d’abord une intensité lumineuse invariable et cela malgré les régulateurs les plus perfectionnés. Et nous avons dû abandonner ces deux modes d'éclairage.

C’est l'électricité qui devait résoudre le problème à notre entière satisfaction. C’est en effet l’arc électrique ordinaire qui, en pratique, nous a donné les meilleurs résultats; en particulier autrement satisfaisants, que ceux fournis par la lampe Nernst, d’une intensité lumineuse insuffisante. Nous utilisons donc comme source éclairante, un petit are

électrique que nous placons au foyer d’une lentille biconvexe de facon à obtenir au-delà de la lentille, des rayons lumineux parallèles. En interposant sur le trajet de ceS rayons, la solution à examiner et en se plaçant dans l’obscurité, on réalise le principe général de lappareil que nous décrivons plus loin qui permet de déceler des fluorescences indiscutables que la lumière du jour n'eut même pas permis de soupconner.

Les avantages d’un tel dispositif peuvent, au total, se grouper sous deux chefs principaux :

1° Il fournit une intensité lumineuse fixe invariable et met ainsi à l'abri d'une des causes d’erreur les plus importantes, à savoir les variations du moment d'apparition de la fluorescence avec les variations mêmes de l'intensité lumineuse de la source éclairante.

20 Il est d’une sensibilité très délicate. Nous avons pu calculer que la sensibilité de ce dispositif était, au minimum, cinq fois plus grande que celle de la lumière du jour et trois fois plus grande que celle du spectroscope. Ce qui revient à dire qu'il faut cinq fois plus d'hydrobilirubine pour faire apparaître la fluorescence à la lumière du jour et que le spectroscope ne laisse apparaître la bande caractéristique de ce pigment, qu'avec une quantité d'hydrobilirubine trois fois plus considérable.

Telles sont, brièvement exposées, les raisons pour lesquelles nous avons cru pouvoir baser notre procédé de dosage de l’hydrobilirubine, d’une part, sur le phénomène de la fluorescence et, d'autre part, sur la constatation de cette fluorescence, non plus à la lumière solaire, mais à la lumière artificielle d’un are électrique, donnant une intensité lumineuse fixe, cette fluorescence étant révélée par uu réactif à base de valérianate de zine.