CALCULS
Or nous savons que ces N centièmes de centimètres cubes, variables avec chaque urine examinée, contiennent invariablement 0,000010 gramme d’urobiline, taux nécessaire et suffisant pour produire la fluorescence- limite.
0,000010 | in 1 centième de cent. cube — TR Bt d'urobiline { centimètre cube = 0,0010 : N ram. d'urobiline.
À. centimètres cubes contenant donc :
0,0 010 + Hi ENT Cd A gr. d’urobiline
Mais nous savons que ces À centimètres cubes contiennent toute l’urobiline des U centimètres cubes d’urine examinée.
Par conséquent 1 centimètre cube d'urine contient :
0,0010 A . De . x na gramme d'urobiliné
Si bien que si nous appelons V le volumetotal desurines des 24 heures la formule générale :
0,0010 sh adesilor VE N Te 6e
Donne la quantité en grammes ou fraction de gramme
de l’urobiline éliminée dans les 24 heures.
2° Calculs pour le dosage dé la Stercobiliné.
Soit L gramme de matières fécales desséchées.
A le nombre de centimètres cubes d’alcool amylique en ayant repris toute la stercobiline.
N le nombre de centième de centimètre cube de cette solution nécessaire pour produire la fluorescence-limite.
More 0,0010 A a IiOTMmuUlIe : N I
donnera en grammes ou fraction de gramme la quantité de stercobiline contenue dans un gramme de fèces examinées.
Si bien que si nous appelons P le nombre de grammes de matières fécales deshydratéeséliminées dans les 24 heures, la formule générale :
0,0010 A Ne Hon
donne en grammes ou fraction de gramme la quantité to-
tale de stercobiline éliminée en 24 heures.
3° Etablissement d’une constante K.
Il suit de ces calculs que si l’on se place toujours dans les mêmes conditions, il est possible d'établir une constante qui simplifiera les calculs.
1° Constante pour l’urobiline.
Si À — 50 centimètres cubes d’alcool amylique. Si U — 100 centimètres cubes d'urine.
On peut écrire :
0,0010 50 Ne 10 V (volume des 24 heures)
Ce qui revient à dire que pour avoir la quantité d’urobiline, contenue dans {centimètre cube d’urine il n’y a qu'à diviser 0,0010 par 2 fois le nombre trouvé de centième de centimètre cube.
Soit 0,0010
JDN:
soit en définitive 0,0005 N et pour les V. centimètres cubes des 24 heures. 0,0005 , grammes ou fraction
LA K. mecs Q N de gramme d’urobiline,
CALCULS ÿhé:
2° Constante pour la Slercobiline.
SiA — 50 centimètres cubes d’alcool amylique. Si IL — 1 gramme de fèces, Si P est la quantité totale en grammes des fécès desséchées des 2% heures.
Nous pourrons écrire :
0,0010 50 N PSI Ce qui donne pour les P grammes de fèces en 24 heu-
res :
0,05 , grammes ou fraction de
N ‘© gramme de stercobiline.
J. Hydrobilirubine, urobiline, stercobiline, sont les noms différents d’une seule et même substance: le pigment découvert par Jaffé en 1868.
IT. Les nombreux procédés de dosage de l'hydrobilirubine qui ont été décrits sont, à des titres divers, tous 1nsuffisants et aucun d'eux n’est capable de conduire à des résultats exacts,
III. Devant l'insuflisance des méthodes existantes, nous avons imaginé un procédé clinique de dosage de l’urobiline et de la stercobiline, fondé sur une propriété caractéristique de l’hydrobilirubine : la fluorescence verte, révélée par un réactif spécial à base de valérianate de zinc en dissolution dans de l'alcool à 60° et observée, non pas à la lumière du jour, mais à la lumière artificielle, à l’aide d’un dispositif spécial d'éclairage latéral à intensité lumineuse, électrique, fixe, d’une sensibilité très délicate.
IV. L'appareil proprement dit de dosage ou hydrobilirubinomètre se compose essentiellement d’une burette graduée en centièmes de centimètre cube, d'une chambre noire munie d’un viseur et de deux cuves à glaces, cette chambre noire venant s'adapter directement sur le disposilif d'éclairage artificiel.
V. La base de notre dosage repose sur une solution titrée d’'hydrobilirubine que nous dénommons solution-étalon. Notre désir eut été d'employer pour sa confection un substance chimiquement pure, une hydrobilirubine cristallisée. Malheureusement un tel produit n'existe pas et n’a pu jamais être obtenu pratiquement.
Nous avons dû nous résoudre à utiliser une hydrobilirubine relativement pure, mais rachetant son imperfection d’une part par sa méthode de fabrication bien déterminée et d'autre part par son titre invariable ; nous estimons que le produit connu sous le nom d’urobiline de Merck, préparée d’après le procédé d'Hoppe-Seyler répond à ces dé. siderata.
Cette solution-étalon a été préparée en faisant dissoudre un centigramme de ce produit dans 100 centimètres cubes d’alcool amylique.
VI. Cette solution-étalon, a servi à déterminer, à l’aide de la burette graduée, la fluorescence-limite, c'est-à-dire la quantité invariable d’hydrobilirubine capable de pro: duire dans 10 centimètres cubes de réactif révélateur, une fluorescence verte mais claire, succédant brusquement à une fluorescence antérieure verte mais trouble.
Cette détermination nous a donné le chiffre de 0,009010 de gramme d’hydrobilirubine. C'est-à-dire que toutes les fois que la fluorescence apparaîtra dans les 10 centimètres cubes de réactif révélateur, on pourra conclure que l’on se trouve en présence de 0,000010 de gramme d’hydrobilirubine, exprimée en urobiline de Merck et préparée d’après le procédé d'Hoppe-Seyler.
VII, Le dosage d’urines ou de fèces données comporte deux temps principaux : l'extraction de l’hydrobilirubine et son dosage proprement dit.
A. Extraction. — L'extraction de toute l’urobiline ou de toute la stercobiline d’un volume connu d'urine ou d’un poids connu de fèces déshydratées est basée sur la précipitation du pigment par le sulfate d'ammoniaque, en milieu légèrement acide, sur l'oxydation de l'urobilinogène et du stercobilinôgène par la liqueur iodo-iodurée dé Gram et
sur la reprise de l’hydrobilirubine ainsi précipitée par un volume déterminé d'alcool amylique.
Ce procédé d’extraction permet en outre de doser séparement, d’une part l’urobiline et la stercobiline, et d’autre part leurs chromogènes.
B. Dosage proprement dit. —T s'effectue à l’aide de l’appareil spécial ou hydrobilirubinomètre en faisant apparaître la fluorescence verte et claire ou fluorescence-limite dans 10 centimètres cubes de réactif révélateur. Sachant que la fluorescence-limite apparaît toujours avec une quantité d’hydrobilirubine invariablement égale à 0,000010 de gramme, une formule générale permettra de trouver facilement la teneur en urobiline ou stercobiline de l’urine ou des fèces examinées.
1° Formule applicable à l’urine :
ee >< = X V gramme d’urobiline
U égalant le nombre de centimètres cubes d'urine employée.
À égalant le nombre de centimètres cubes d’alcool amylique ayant repris toute l’urobiline des U centimètres cubes d'urine.
N égalant le nombre de centièmes de centimètre cube de cet alcool amylique qu’il a été nécessaire d'employer pour faire apparaître la fluorescence-limite.
V égalant le volume total des urines des 24 heures.
2° Formule applicable aux fèces :
— ee È X P gramme de stercobiline
1 égalant 1 gramme de matières fécales déshydratées.
À égalantle nombre de centimètres cubes d’alcool amyque ayant repris toute la stercobiline de fèces,
CONCLUSIONS yaÿl
N égalant le nombre de centièmes de centimètre cube de cet alcool amylique nécessaires pour faire apparaître la fluorescence-limite.
P égalant le poids total des fèces deshydratées des 24 heures.
Il suit de l’ensemble de ces calculs, que, si l’on se place toujours dans les mêmes conditions, il est facile d'établir une constante qui simplifiera les opérations.
1° Constante pour l'urobiline.
Si À égale toujours 50 cent. cubes d’alcool amylique,
SIAU) » 100 » d'urines,
Si V est le volume total des urines des 24 heures, on pourra écrire en définitive après simplifications successives :
N de grammes d’urobiline 2° Constante par la stercobiline.
Si À égale toujours 50 cent. cubes d’alcool amylique, Siel » 1 gramme de fèces,
grammes ou fraction
Si P est la quantité totale en grammes des fèces des 24 heures, on pourra écrire en définitive et après simplifications successives : 0,05 CU se N de grammes de stercobiline Il est et reste bien entendu que les chiffres ainsi obtenus ont surtout, du fait de la qualité relative de l’hydrobilirubine employée pour la confection de la solutionétalon et la détermination de la fluorescence-limite, la valeur de rapports, et qu'ils ne sauraient prétendre à exprimer exactement en poids des résultats absolus.
grammes ou fraction
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