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APPENDICE 269 - On obtient ainsi une gélose nutritive ayant la composition mentionnée ci-dessus ($ 15).

Techniques histologiques. — Les racines et tubercules destinés aux examens histologiques ont été fixés dans le liquide suivant :

PA dent SE UT RS te AR AE 10 cent. cubes, IQ be Line ee CR qe dat es nue 5 — Formotducommerce.. 5.1 TR SUR 5 — Acide picrique à 1 p. 100 dans l'alcool à 95°......... 80 -

Pour la coloration des coupes, en outre des méthodes de double coloration employées par Noël BERNARD [5], jai employé couramment la thionine phéniquée, qui donne de bonnes différenciations eytologiques des Champignons, malheureusement très fugaces.

La méthode suivante, empruntée à M. Lecroux (1), donne une bonne coloration des membranes de l’endophyte :

Après dissolution de la paraffine, la lame est lavée à l’alcool méthylique, puis transportée face en dessus dans une boîte Laveran- Mesnil, et recouverte avec 1 centimètre cube du mélange colorant suivant : 5

Éosinate de bleu de méthylène................. 7 grammes. Éosinate de bleu de toluidine .................. 187,5

PORTO ne A en in ile donnee Daelere .. 081,5 Alcoolméthylique 99952... ee sensor 490 cent. cubes.

Après une minute, verser 4 centimètres cubes d’eau distillée neutralisée au rouge neutre; retourner la lame après mélange ; au bout de dix à quinze minutes, laver à l’eau ordinaire, différencier avec une solution de tanin orange au quart dans l’eau distillée neutralisée. Déshydrater à l’alcool éthylique, passer au toluène, monter à l’huile de cèdre.

Ce travail a été fait à l’Institut Pasteur et, en partie, au laboratoire de Botanique du Muséum d'Histoire naturelle, dirigé par M. J. CosranriN. J'adresse mes plus sincères remerciments à M. CosranTin pour l'accueil que j’ai trouvé dans son laboratoire

et pour les nombreux encouragements qu’il m’a donnés.

(1) Voir Lecroux (R.) et Macrou (T.), Ann. Institut Pasteur, t. XXXIV,

- de dois à M. Prnoy, de l’Institut Pasteur, plusieurs suggestions fort utiles, dont je le remercie ; C’est sur son conseil notamment que J'ai choisi comme objet d’étude l’Orobus tuberosus. ss

M. GuiGNaRD a bien voulu s'intéresser à ces recherches et me fournir divers matériaux d'étude : je lui en exprime toute ma reconnaissance. |

Je remercie enfin les personnes qui ont bien voulu faciliter ma tâche en me procurant des graines ou autres échantillons nécessaires pour ces recherches.

& ot