III. - SOLUTIONS AQUEUSES

Dans un petit flacon, mêler :

Matière colorante 0sr,25

Eau distillée 25 centimètres cubes.

Agiter, laisser en contact, filtrer. La solution est saturée, il doit rester un excès de matière colorante au fond du flacon.

Ces solutions, se conservant mal, doivent être préparées au moment du besoin ; elles agissent lentement, mais donnent des colorations très nettes ; elles sont peu employées.

Les solutions aqueuses de bleu de quinoléine, vésuvine, vert de méthyle, sont utilisées pour la coloration des microbes vivants.

B. — SOLUTIONS MORDAXCÉES.

/ - SOLUTIONS PHÉNIQUÉES.

Ce sont les plus employées des solutions colorantes ; elles se conservent très longtemps sans perdre de leur pouvoir colorant.

Fuchsine phéniquée de Ziehl.

Fuchsine rubine 1 gramme.

Acide phénique neigeux 5 grammes.

Alcool absolu 10 centimètres cubes.

Eau distillée 100 —

Triturer dans un petit mortier de verre la fuchsine et l'alcool ; ajouter l'acide phénique, mélanger; ajouter par petites portions, en

EXAMEN APRÈS COLORATION. 139

continuant de remuer, les deux tiers de l'eau ; verser dans un flacon; rincer le mortier avec le reste de l'eau; réunir les liquides. Laisser en contact vingt-quatre heures; filtrer dans un flacon propre, bouché à l'émeri.

On utilise souvent une liqueur diluée, préparée comme il suit :

Fuchsine de Ziehl diluée.

Mélanger :

Fuchsine de Ziehl 1 centimètre cube.

Eau distillée 6 à 10 centimètres cubes.

- Préparer au moment du besoin. Filtrer.

Krystall violet phéniqué (Roux).

Krystall violet 1 gramme.

Acide phénique neigeux 2 grammes.

Alcool absolu 10 centimètres cubes.

Eau distillée 100 —

Préparer comme la fuchsine de Ziehl ; s'emploie en nature ; sert principalement à pratiquer la méthode de coloration de Gram.

Le krystall violet étant un composé cristallisé bien défini, ses préparations sont supérieures à celles du violet de gentiane, produit amorphe, de composition variable.

Violet de gentiane phéniqué (Nicolle).

Se prépare comme la solution précédente, en remplaçant le krystall violet par le violet de gentiane. Peut sans inconvénient être supprimé de la technique.

Thionine phéniquée (Nicolle).

Thioninc 0sr,50 à 1 gramme.

Acide phénique neigeux 2 grammes.

Alcool absolu 10 centimètres cubes.

Eau distillée 100 —

Préparer comme la solution de Ziehl.

Solution recommandée pour la coloration des coupes et frottis ; elle colore un peu plus lentement, mais donne des préparations plus nettes que le krystall violet et le violet de gentiane. N'utiliser qu'une thionine de bonne qualité, sous peine de s'exposer à des mécomptes.

Bleu de méthylène phéniqué (Kuhne).

Bleu de méthylène lsr,5 à 2 grammes.

Acide phénique neigeux 2 —

Alcool absolu 10 centimètres cubes.

Eau distillée 100 —

Préparer comme ci-dessus.

EXAMEN MICHOSCOI'lgUE DES MICROBES.