SPORES

Pour étudier la formation et l'évolution des spores, il est nécessaire de pratiquer un examen en gouttelette suspendue ; on adoptera de préférence la cellule de Koch, sur la lamelle de laquelle on dépose une goutte d'humeur aqueuse ensemencée avec une trace de sang charbonneux.

En maintenant la cellule à la température de 33°-37°, on voit, peu d'heures après l'ensemencement, apparaître, dans l'intérieur du protoplasma des bactéridies, un petit point réfringent ; puis ce point grossit et devient un corps ovoïde, bien visible, grâce à sa réfringence : c'est la spore, forme de résistance de la bactéridie.

La sporulation ne se produit que lorsque certaines conditions de culture se trouvent réunies: la présence d'oxygène libre est indispensable; de plus, il faut que les cultures soient maintenues à une température comprise entre + 18" et 41°,5 ; à partir de 42» les spores ne se forment plus.

Bientôt le protoplasma de la cellule mère se désintègre et la spore

LA BACTERiniE CHARBONNEUSE, n'est plus entourée que par la mince membrane d'enveloppe du filament ; celle-cijdisparalt à son tour et la spore est mise en liberté.

Toutes les cellules d'un filament ne donnent pas de spores; certaines restent stériles; chaque cellule ne produit qu'une seule spore qui est toujours plus petite que la cellule mère.

Si le milieu est encore nutritif, on voit bientôt la spore évoluer : elle augmente de volume et perd sa réfringence, sa membrane d'enveloppe se résorbe, le protoplasma mis en liberté s'allonge et prend la-forme bacillaire (De Bary).

Coloration. — Les spores charbonneuses peuvent être colorées par les procédés indiqués au chapitre ix (lre partie). La coloration de ces spores est assez difficile à réussir par la méthode de double coloration : on aura soin en la pratiquant de ne pas décolorer avec les solutions acides, mais simplement avec l'alcool absolu (Voy. p. 149).

Conditions de culture. — La bactéridie est essentiellement aérobie. La température optima de culture est de 35°, mais la bactéridie se développe à toutes les températures comprises entre + 14° et 43°. La formation des spores a lieu entre -f- 18° et 42°. La bactéridie exige un milieu de culture neutre ou légèrement alcalin.

Bouillon. — Au bout de quelques heures à 35° apparaissent de

légers flocons, puis ces flocons s'épaississent, deviennent cohérents et tombent au fond du vase, le bouillon reste clair. Gélatine. — Est liquéfiée par la bactôridie.

a. Piqûre. — A 20°, apparaît, dès le second jour, le long de la piqûre, un trait blanchâtre d'où naissent bientôt, à angle droit, de nombreux et délicats filaments duveteux rappelant l'aspect de l'arbre de Saturne. La culture s'accentue les jours suivants, les filaments s'épaississent, puis la gélatine se liquéfie à la partie supérieure du tube; la liquéfaction envahit peu à peu toute la gélatine et est totale vers le dixième ou douzième jour; dans un liquide clair nagent alors de gros flocons blancs qui finissent par tomber au fond du tube.

Les arborisations manquent quelquefois ; la culture est alors réduite à la strie centrale; l'aspect ramifié s'observe surtout quand l'ensemencement a été pratiqué avec du sang charbonneux.

b. Plaques. — Vers le second jour apparaissent sur les plaques d'isolement de petits points blanc grisâtre, disséminés dans la gélatine.

Fig. 136. — Très jeune cul- Fig. 137. — Culture de Fig. 138. — Culture de turc de Bacillus anthracis Bacillus anthracis plus Bacillus anthracis en gélaen gélatine. âgée. line (8« jour).

Ces points augmentent rapidement de volume et forment des taches brunâtres, granuleuses, arrondies, à bords sinueux; un faible grossissement montre que ces colonies sont constituées par des fila-