‹ Technique microbiologie et sérothérapique (microbes pathogènes de l'homme et des animaux)Chapitre 308 sur 350 · CHAPITRE XXXIY · texte numérisé non relu

CHAPITRE XXXIY

Article I. — ASPERGILLUS FUMIGATUS.

Laulanié a montré que YAspergillus fumigatus est susceptible de produire chez l'animal une pseudo-tuberculose expérimentale ; Dieulafoy, Chantemesse et Widal, Potain , R. Boyce, Gaucher et Sergent, Rénon, etc., ont observé des cas de pseudo-tuberculose aspergillaire chez l'homme.

La tuberculose aspergillaire de l'homme sévit uniquement chez les gaveurs de pigeons ; les pigeons présentent fréquemment sur la muqueuse buccale un chancre produit par l'Aspergillus, et Rénon a montré, qu'en . ensemençant sur des milieux appropriés des graines de millet et de vesce, on obtient des cultures de diverses espèces d'Arpergillus et en particulier YAspergillus fumigatus. — Dans les lésions de l'homme, l'Aspergillus esl fréquemment associé au Bacille de Koch.

Le pigeon, le lapin et le singe sont réceptifs; le chien et le chat semblent réfractaires.

Le pigeon constitue l'animal de choix pour les inoculations. Les passages par le pigeon exaltent la virulence du parasite (Kotliar).

L'injection, dans la veine axillaire du pigeon, d'une culture en milieu de Raulin entraîne la mort de l'animal plus ou moins rapidement, suivant la quantité injectée : une dose de 2 à 3 centimètres cubes tue en quarante-huit à soixante-douze heures, une dose de \ centimètre cube cause une maladie à marche lente se terminant par la mort au bout d'une quinzaine de jours.

Quand la mort survient de bonne heure, les lésions macroscopiques sont peu accusées, on ne trouve des tubercules que dans le » foie; les poumons et la rate paraissent simplement hyperémiés. Quand la maladie a une marche lcnle, on voit à l'œil nu de nombreux tubercules dans les viscères et notamment dans le foie ; ces lésions peuvent présenter tous les stades de l'évolution tubercu-

ASPERGILLUS FUMIGATUS.

leuse typique (granulations miliaires, dégénérescence caséeuse, transformation fibreuse).

L'examen microscopique des organes permet de constater les lésions classiques de la tuberculose de Koch, mais dans tous les tubercules on trouve un feutrage épais de mycélium et de spores.

g 2. - CARACTÈRES MORPHOLOGIQUES ET RECHERCHE.

L'Aspcrgillus fumigatm est constitué par un mycélium filamenteux d'où partent à angle droit des prolongements renflés en massues et portant les spores; ces spores sont arrondies, brunâtres ou verdàtres; leur diamètre atteint 3 à 4 [j.. L'Aspcrgillus se colore bien par les couleurs d'aniline et prend le Gram.

VAspergillUs fumigatm se développe de préférence dans le liquide de Piaulin ou le moût de bière; exclusivement aérobie, il cultive à partir de +22°. Rotliar a montré que, dans les milieux de culture (bouillon, liquide de Raulin), VAspergillus fumigatus ne forme pas de toxines ni de substances vaccinantes.

Bouillon. — Culture très grêle apparaissant tardivement; flocons mycéliens dans le liquide clair; sporulation rare.

Liquide de Raulin. — Développement abondant ; nombreux flocons dès la quinzième heure à 37°. Dans la culture, filaments enchevêtrés et très nombreuses fructifications.

Gélatine. — Développement tardif de minimes flocons le long de la strie ; de rares spores apparaissent vers la quatrième semaine; à la longue il se produit une très légère liquéfaction.

Gélose. — Vers le deuxième jour à 37°, on observe un enduit blanc le long de la strie ; peu à peu la culture prend une teinte verte qui se fonce progressivement.

Pomme de terre. — Strie abondante se développant rapidement et devenant vert noir.

Crachats. — On recherche l'Aspergillus par l'examen microscopique et les cultures.

Examen microscopique. — Rénon recommande le procédé suivant : préparer des frottis avec les parties vertes des crachats et colorer en faisant agir pendant dix minutes une solution aqueuse de safranine ; le mycélium et les spores sont teintés en orangé clair.

ASPECT MICROSCOPIQUE

RECHERCHE

b8î- LÈS MOISISSURES PATHOGÈNES.

Ensemencement. — Prélever purement de petite» parcelles au centre des crachats verdatres et ensemencer ces parcelles dans des tubes contenant du liquide de Paulin.

Coupes. — Les coupes, pratiquées après durcissement à l'alcool et inclusion à la paraffine, sont colorées par la méthode de Grain ou par le procédé de Weigert modilié comme il suit :

i° Coloration au picrocarmin de Orth (p. 227).

2° Séjour de vingt minutes dans le violet de gentiane aniline ou phéniqué.

3° Lavage rapide dans une solution de sel marin à 0,7 p. 100; enlever l'excès de liquide avec un morceau de papier filtre.

4° Faire agir pendant une minute le liquide de Gram, puis enlever le liquide avec du papier filtre.

'6° Déposer sur la coupe quelques gouttes d'huile d'aniline ; laisser agir quelques instants.

0° Remplacer l'huile par du xylol ; absorber l'excès de liquide et monter dans le baume.

Article II. — AGHORIOX SCHQENLEINII.

Schœnlein a montré que le favus est causé par un champignon, YAchorion.

V Ac horion Schœnleinii peut envahir tous les éléments épithéliaux ; on le rencontre dans le cuir chevelu (godet favique), la peau (favus des parties glabres), les ongles (ongles en moelle de jonc); dans une observation de Kaposi et Kundrat, le parasite avait envahi la muqueuse de l oesophage, de l'estomac et de l'intestin. — Le cheveu favique émerge le plus souvent d'un godet, il est décoloré jusqu'à une faible distance de son émergence; il sépile en entier et ne casse pas sous la pince.

Dans le favus humain on pourrait rencontrer plusieurs variétés d'Achorion, très voisines les unes des autres; Bodin en décrit cinq, Neebe et Unna, neuf. Beaucoup d'auteurs soutiennent, au contraire, l'unicité de l'Achorion.

Les tentatives d'inoculation aux animaux n'ont fourni que des résultats incertains.

Favus des animaux. — Les parasites du favus de certains animaux sont voisins de l'Achorion mais ne lui sont pas identiques. Le favus du chien est causé par YOospora canina (Gostantin et Sabrazès), le favus de la poule par YEpidermophyton gallinae (Mégnin), celui de la souris par YAchorion Quinckeanum ou Achorion Artoinr/i (Quincke).

Placer sur une lame une goutte de solution de potasse caustique à 40 p. 100, y déposer la cheveu et recouvrir avec une lamelle.

ACHORION SCHŒNLEIN1I.

Chauffer avec précaution sur la veilleuse d'un bec Bunsen jusqu'à commencement <l 'ébullition. Dès qu'une bulle s'est formée, arrêter la dissociation en posant la lame sur un corps froid et examiner immédiatement (oc. I, obj. 8); le cheveu est éclairci et laisse voir le parasite.

Ces préparations sont très favorables à l'étude, mais elles ne se conservenl pas. On obtienl des préparations durables en faisant pénétrer, par capillarité, sous la lamelle des préparations à la potasse, une gouttelette do glycérine éosinée. Il ne faut jamais faire agir l'eau sur les cheveux traités par la potasse : ils se réduiraient immédiatement en une fine poussière

Dans les cheveux faviques traités par la potasse, on voit de nombreux filaments mycéliens sporulésou non. Ces filaments sont placés suivant l'axe du cheveu, ils sont ténus, noueux, simples ou pourvus de deux à quatre ramifications. Les spores ont 3 à 7 u. de diamètre, elles sont arrondies ou légèrement aplaties par pression réciproque ; elles n'infiltrent pas la totalité du poil, mais y forment des chaînes ramifiées séparées les unes des autres.

Le parasite franchit les gaines épithéliales et pénètre dans le derme; il détruit la papille pilaire et entraîne la chute du poil. Au niveau des godets faviques, il se produit une. surproduction de cellules épithéliales au milieu desquelles on trouve le parasite agglutiné par une glaire amorphe.

Dans le poil, l'Achorion se caractérise par les particularités suivantes :

a. 11 ne possède pas d'enveloppe visible; en réalité, il existe une enveloppe, mais elle est très réfringente et difficile à déceler.

b. Le mycélium a un aspect irrégulier, noueux, les filaments sont sinueux.

c. Le parasite n'infiltre jamais la totalité du poil.

d. Les filaments se divisent en trois ou quatre ramifications rappelant l'aspect des os du tarse de l'homme (iar.se faviquc).

Conditions de culture. — L'Achorion se distingue des autres moisissures en ce qu'il ne cultive pas sur les milieux acides (Duelaux et Verujski) : une acidité supérieure à Oe', 3 d'acide tartrique par litre arrête la culture. Il exige, pour se développer, des milieux riches en peptone ; les sucres lui conviennent fort mal, au contraire la glycérine (bouillon et gélose glycérinés) et la mannite sont pour lui des aliments de choix. 11 est aérobie.

Son développement commence à -+- 15°, la température optima est de 33°; à 38° le développement s'arrête.

LES MOISISSURES PATHOGENES.

VAchorion SchœnleUiii n'existe pas à l'état pur clans les lésions faviques ; pour obtenir des cultures pures on a recours au procédé suivant: dans une cellule dépolie et stérilisée, on triture un fragment de godet i'avique avec un peu d'acide silicique pulvérulent et stérilisé; on dissémine la poussière obtenue sur une plaque de gélatine en boîte de Pétri; on prélève les colonies qui se développent au niveau des points où a été déposée une seule spore.

Gélose. — Culture caractéristique : formation d'un enduit jaune brun plissé, irrégulier, déprimé au centre et rappelant l'aspect des godets faviques du cuir chevelu.

Bouillon. — A la surface se produit une grosse colonie très étalée qui flotte et prend l'aspect delà culture sur gélose.

Article III. — TRICOPHYTON TOIVSURANS.

Le Tricophyton a été découvert par Gruby et décrit par Malmsfen.

Le Tricophyton produit des hyphes sporifères disposées en grappe et rentre par conséquent dans le groupe des Bothrytis. Il se développe sur le cuir chevelu (teigne tonsurante), la barbe (sycosis), la peau glabre (herpès circiné, folliculite agminée) et dans les ongles,

Cultures. — Comme l'Achorion, le Tricophyton ne pousse pas sur les milieux acides. II affectionne les milieux contenant du sucre et peu de matières azotées, en particulier le moût de bière (180 p. 1000 de maltose) et le liquide suivant (Sabouraud) :

Ce liquide peut être solidifié par addition de 14 p. 1 000 de gélose.

Ensemencements. — Pour obtenir des cultures de Tricophyton, on s'adresse à un poil malade, au contenu d'une vésicule d'herpès circiné ou à du sang recueilli au niveau des lésions.

1° Ensemencement du sang. — Prélever quelques gouttes de sang au niveau des parties malades, en opérant comme nous l'avons dit à propos de la pelade, et étaler ce sang sur des tubes de gélose de Sabouraud inclinés.

2° Ensemencement du contenu des vésicules. — Prélever purement, avec une très line pipette ou une ose, le contenu d'une vésicule et l'étaler sur des tubes de gélose de Sabouraud.

3° Ensemencement d'un cheveu. — Le Tricophyton est mélangé dans les lésions à cinq ou six espèces commensales ; pour pratiquer l'isolement, Sabouraud conseille le procédé suivant :

Arracher un cheveu malade, le déposer sur une lame flambée et,

Maltose.

Peptone Eau. . . .

3sr,80 0er,75 100 grammes.

TRICOPHYTON TONSURANS.

avec une aiguille coupante, le sectionner en autant de fragments que possible. Chaque fragment est transporté dans un milieu nutritif (moût de bière ou liquide de Sabouraud) contenant beaucoup de sucre et de peptone, milieu sur lequel les espèces commensales ne se développent pas. Faire deux à trois passages à 18° sur le même milieu, puis, prélever un fragment de la dernière culture, âgée d'environ vingt jours, et en faire un frottis sur une. tranche de pomme de terre; on obtient ainsi des colonies isolées de Tricophyton.

Variétés. — Sabouraud désigne le Tricophyton tonsurant de Malmsten sous le nom de Tricophyton megalosporum, pour écarter toute confusion avec un autre champignon à petites spores, le Microsporum Audouini, qui cause lui aussi une teigne et que nous étudierons plus loin. Dans l'espèce Tricophyton megalosporum, Sabouraud distingue deux variétés :

A. — TRICOPHYTON ENDOTHRIX.

Le Tricophyton endothrix se développe à l'intérieur du cheveu. Le cheveu atteint est cassé très court, il est plus gros que les cheveux sains et ne présente pas de collerette; il est très difficile à épiler ; parfois il est décoloré.

ASPECT MICROSCOPIQUE

L'examen microscopique, pratiqué sur un cheveu traité par la potasse (Voy. p. 584) ou dissocié dans une goutte d'acide acétique et monté dans la glycérine, montre que ce cheveu est rempli de spores très nombreuses, disposées en chaînettes, et de filaments mycéliens peu abondants.

Le parasite se reconnaît aux caractères suivants :

a. Les spores ont 5 à 6 p. de diamètre; elles sont rondes forment des chapelets.

b. La totalité du cheveu est envahie par les spores.

a. Les filaments mycéliens présentent au plus deux bifurcations jamais on ne constate l'aspect du tarse favique.

Fig. 238. — Tricopkyton Cheveu (Reich. ; Obj.

megalosporum. — 8; Oc. H).

ou cubiques à angles émoussés et

Certains Tricophylons se laissent facilement dissocier; d'autres, au contraire, résistent à l'action de la potasse.

Le Tricophyton endothrix forme à la surface des milieux de culture un tapis feutré, continu, de couleur crème, avec des nervures rayonnant du centre à la périphérie. Parfois, le centre de la culture se creuse en un godet entouré d'une zone poudreuse et brunâtre.

Dans les cultures en milieux maltosés, le Tricophyton donne un mycélium avec hyphes sporifères en grappes; dans les milieux peptonisés ordinaires, le développement est peu intense et l'on obtient l'aspect observé chez l'homme.

L'inoculation est difficile à réussir chez l'homme, à cause de l'acidité des sécrétions cutanées, acidité qui s'oppose au développement du parasite (Verujsky). Pour réussir l'inoculation, il faut rendre la sueur alcaline en administrant au patient 15 à 20 grammes de bicarbonate de soude; on peut encore brûler un point de la peau en y appliquant la pointe rouge d'une allumette qui vient de s'éteindre : il se forme une petite vésicule contenant un liquide neutre; le lendemain on inocule le parasite à l'intérieur de la vésicule.

L'inoculation du Tricophyton endothrix réussit très difficilement chez les animaux (cobaye, lapin, chat). La lésion guérit spontanément en cinq à six semaines.

B. - TRICOPHYTON ECTOTHRIX.

Le Tricophyton ectothrix est d'origine animale (cheval) ; il produit chez l'enfant la teigne dite Kérion de Celse et chez l'adulte le sycosix et la tricophytie unguéale. Le Tricophyton cctothrix est pyogène ; les lésions qu'il provoque s'accompagnent de dermite.

Le cheveu atteint est cassé et légèrement replié sur lui-même à son extrémité libre, ce qui donne à la plaque de teigne un aspect irrégulier caractéristique.

Le parasite se développe au dehors du cheveu et forme une colleretle autour de la portion radiculaire de celui-ci ; la gaine épidermique est pénétrée plus que le cheveu lui-même.

Pour la recherche du parasite, on doit s'adresser, non aux poils adultes, mais aux petits poils follets qu'on rencontre à la périphérie des lésions. Le poil follet, enlevé avec le cône épidermique dont

MICROSPORUM AUDOU1NI.

émerge, est examiné après action de la potasse ; les filaments sporulés forment une masse compacte dans la gaine épidermique du poil. Les spores sont en général plus grosses que dans le Tricoplujton endothrix, quelques-unes peuvent atteindre 15 à 18 p. de diamètre.

Quand on échoue à déceler le parasite sur les poils, on prend le pus d'une vésicule non encore ouverte et on en examine une gouttelette sans coloration. Dans ce pus, on observe un petit nombre de filaments sporulés présentant les mêmes caractères que ceux des poils; en éclairant fortement avec le condensateur Abbé, on voit entre les globules du pus une quantité de débris mycéliens très grêles et très courts qui avaient passé inaperçus à l'examen à la lumière ordinaire. 11 est difficile d'obtenir des préparations colorées satisfaisantes; la fuchsine et l'éosine donnent les meilleurs résultats.

Sur le moût de bière gélose, milieu de choix, la culture forme d'abord une fine houppe duveteuse, blanche, qui s'accroît et s'entoure de rayons étoilés; puis, vers le huitième jour, elle se couvre d'une poussière blanche, plâtreuse; vers le quinzième jour, reparait au centre une houppe de duvet.

Toujours les cultures sont blanches; ce caractère est important, les Tricophytons à cultures blanches étant tous pyogènes.

Le Tricophyton eclothrix peut vivre à l'état de saprophyte; il cultive aisément sur le terreau, les feuilles de mûrier, etc.

Le T. eclothrix est inoculable à l'homme et au cobaye. L'inoculation au cobaye est facile: il suffit de prendre un peu de la culture sur une pince à griffes et de pincer la peau de l'animal avec l'instrument.

Article IV. — MICltOSPORUM AUDOUINI.

Le Microsporum Audouini a été découvert par Gruby dans une affection parasitaire des cheveux, qu'il nomma prurigo decalvans et qui fut, depuis, confondue avec les pelades et la tricophytie.

Sabouraud a fixé l'entité pathologique de la teigne de Gruby qu'il désigne sous le nom de teigne tondante rebelle ou de teigne tondante de Gruby. Le parasite de cette affection doit conserver le nom de Microsporum Audouini et non prendre celui de Tricophylon Microsporum que Sabouraud lui avait attribué au début de ses recherches; il diffère entièrement des Tricophytons.

Le M. Audouini ne se développe jamais sur la peau glabre; il

atteint les seuls cheveux. Ceux-ci ont un aspect spécial; ils se cassent à 0 un 7 millimètres tic la peau, sont très lins, décolorés et revêtus d'une gaine d'apparence épidermique, unie, grise, formée par le parasite; les parties atteintes semblent saupoudrées d'une poussière bleue.

Les cheveux traités par la potasse (Voy. p. 584) se montrent recouverts par une mosaïque de spores ayant 1 à 3 p. de diamètre, rondes ou polyédriques par pression réciproque, agglomérées sans ordre, jamais disposées en chaînettes et possédant une enveloppe claire et transparente. Les spores ne pénètrent jamais à l'intérieur du cheveu. Entre les spores, on voit de rares filaments mycélienstrès courts, sigmoïdes (lig. 239). — Le Microsporum Audouini se développe de haut en bas sur le cheveu ; il s'enfonce d'autant plus profondément autour de la portion radiculaire que la lésion est plus ancienne.

Le cheveu, déposé sur une lame de verre stérile, est coupé en petits fragments dont chacun est porté dans un des milieux utilisés

pour le Tricophyton ; le plus souvent on obtient une culture pure dès le premier ensemencement.

Pomme de terre. — Culture caractéristique. — Au bout de sept à huit jours, strie grisâtre puis brun reugeâtre. Vers le dixième ou douzième jour, apparaît sur cette strie un duvet rare, court, formant par places de petits bouquets.

La culture sur pomme de terre garde plusieurs mois sa vitalité; dans les mômes conditions le Tricophyton meurt en dix-huit jours.

Moût de bière gélose. — Au bout de trois à quatre jours, touffes de mycélium radié pénétrant dans la gélose et prenant l'apect soyeux des graines de peuplier; puis, du centre de la colonie, émerge une touffe de rameaux aériens duveteux, en môme temps qu'il se forme

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