IV. MÉTHODE de CzAPLEWSKI

Klle est basée sur ce fait que les acides minéraux forts décolorent un certain nombre de bacilles de la tuberculose, qui échappent ainsi aux recherches. C'est pourquoi on recourt à la Iluorescéine,

Voici le procédé :

P Colorer à chaud dans la fuchsine phéniquée.

2° Laisser égouUer l'excès du colorant et baigner dans le mélange de solution alcoolique concentrée de tluorescéine jaune et de bleu de méthyle en excès.

Y plonger la lamelle G à 18 fois, en égouttant chaque fois lentement la préparation.

3° Baigner dans la solution alcoolique concentrée de bleu de méthyle.

4° Laver rapidement à l'eau. Sécher. Baume de Canada.

Mais, si les coupes ne renferment que de rares bacilles, on aura recours aux méthodes d'Ehrlich et de Neelsen, qui permettent de prolonger ;i volonté le bain colorant et d'en modifier l'action.

Bacille de la lèpre.

Il ressemble beaucoup au bacille de la tuberculose et se colore par les mêmes méthodes que lui, mais s'en différencie en ce qu'il prend la couleur plus rapidement, et la perd aussi plus vite, parfois en quelques luuires. La méthode de Gabbet fournit aussi, avec les coupes, des préparations stables. Ce bacille se colore par le Gram. Ce qui le distingue du B. de Kocli, c'est qu'il prend rapidement le Gram et qu'il ne se colore pas dans les solutions hydro-alcooliques des couleurs d'aniline.

Méthode de Bai moartex.

1" Coloration })en(laiil() à 7 minutes dans la solution alcoolique diluée (le fuchsine f5 gouttes d'une solution alcoolique concentrée dans un verre (le montre d'eau).

Décoloration pendant 1/4 de minute dans l'alcool acide (acide nitrique 1, alcool 10).

3° Lavage à l'eau.

4" Coloration de contraste au bleu de métliyU;, lavage à l'eau, etc. Baume de Canada.

Si les bacilles de la lèpre se montrent sous l'aspect de bâtonnets rouges sur fond bleu, les bacilles de la tuberculose ne se colorent pas aussi rapidement avec cette méthode.

D'autre part, Lustgarten a montré — ce fait est important pour le diagnostic différentiel — que les bacilles de la lèpre, colorés par le violet d(î gentiane à l'eau d'aniline ou par la fuchsine à l'eau d'aniline, ne se décolorent pas, par une solution à 1 0/0 de sous-chlorate de soude, aussi lacilement que ceux de la tuberculose.

Lnna colore les coupes dans la solution boracique de bleu de méthyle, puis

EXAME.\ DES MICKOBES

passe kl coupe dans Teau, la solution iodo-iodiirée, l'alcool, la créosote etl'liuile de tére'bentlîine. Comme l'iode met en relief d'une façon très marquée les espaces clairs — regardés par quelques-uns comme des spores — , Unna pense que les bacilles de Hensen se composent de chaînettes de microcoques.

Bacille du choléra.

Il se colore surtout bien dans les solutions concentrées aqueuses de riichsino. n est bon de laisser agir la solution pendant 10 minutes. Il ne prend pas le Gram. On colore les coupes par la solution de fuchsine ou [)ar le bleu de niéthyle.

Un le met le mieux en relief en examinant les flocons muqueuxgris des selles, ou bien en puisant à la surface du liquide de culture obtenu par la méthode de Schottélius (consistant à ensemencer un bouillon avec les matières diarrhéiques et à portera l'étuve pendant douze heures). On le colore ensuite par le Ziehl dilué :

Fachsine. 0 gr. 25.

Acide piiéiiique 0 gr. 25,

Alcool 2 gr. 5.

Eau distillée 100 grammes.

Nous avons indiqué plus haut les méthodes de coloration des cils.

La méthode de coloration du hacillc de FinJder-Prior est la même; on ne fera donc le diagnostic qu'en se basant sur d'autres caractères (production du rouge de choléra dans les vieilles cultures, etc.).

Spirille de la fièvre récurrente.