II. MÉTHODE DE NlKIFOROFF

1" Durcir pendant 24 heures dans un mélange de :

Solution aqueuse à 5 0/0 de bichromate de potasse. ) Solution saturée de sublimé dans une solution à [ aa, 0.6 0/0 Na Cl )

EXAMEN DES MICROBES i 10

±' Achever de diiirir. à cliaLul, dans l'alcool à 70'\ 80" et 9.) '. 'S" Inclure dans la parafline.

4'' Colorer pendant 'lï heures dans un mélange de :

Solution aIcoolit(Lie à 1 0/0 de tropoléine «'entiinétres cubes.

Solution aqueuse concentrée de bleu de mellivle... 10 n » Solution de potasse caustique à l 0/00 '2 iiDuttes.

5" Laver dans l'eau.

G" Baigner 2 à 3 fois dans tui mélange à parties égaU's d alcool et d'é- Iher.

7° Huile de bergamote. Xyhjl.

Actynomices.

Pour faire l'examen de ces champignons dans le pus. on prélève les granulations blanchâtres caractéristiques en étalant le pus sur une plaque de verre et en recherchant les grains sur un fond sombre. Lorsqu'on les a trouvés, on les écrase sur des lamelles et on voit sans difficulté le mycélium et les renflements ou conidies (1).

On peut aussi faire des j)réparations sur les lamelh's et les colorer comme les coupes.

Coloration (ks coupes. On a imaginé un grand noini)re de méthodes des recherches en coupes ; mais les préparations ne sont généralement pas stables, et les difterentes parties du champignon, mycélium et conidies, se colorent souvent d'une façon dififérente dans la même coupe. Pour une démonstration simple, on recourt à la double coloration par l'hématoxyline et le carmin ou l'éosine, qid teint U's masses en rouge et les met en relief sur le fond bleu du tissu.

Le procédé de Weigerl pour la coloration des microbes avec coloration préalable au carmin lithiné, est applicable dans l'espèce : il différencie le mycélium beaucoup mieux que les autres méthodes.

Les deux procédés combinés de Weigert, que nous allons décrire, sont très recommandables : ils i)ermettent d'obtenir une différenciation nette du mycélium et des cellules pyriformes, les autres parties du tissu présentant une teinte très nelle.