‹ Technique microscopique appliquâee áa l'anatomie pathologique et áa la bactâeriologie. Manuel pratiqueChapitre 58 sur 96 · CHAPITRE XII · texte numérisé non relu

CHAPITRE XII

RKClIERCIIh: DES CHAMPIGNONS ET DES MOISISSUllES.

Pour rechercher les champignons filamenteux, chez l'homme, on dissocie les tissus dans l'eau ou dans une solution de sel marin à 0,6 0/0; ce procédé simple suffît souvent à mettre en évidence les parties constituantes de l'organisme. Si les tissus malades sont peu transparents, on peut les éclaircir par la lessive de potasse ou de soude de 1 à 3 0/0. La glycérine et l'alcool déterminent un ralatinement considérable des filaments. La méthode de Fraenkel est recommandable. On dissocie dans l'alcool à oO 0/0, additionné de quelques gouttes d'ammoniaque, et l'on examine aussitôt dans la glycérine où on pourra conserver la préparation. Pour durcir les pièces, on se sert habituellement de l'alcool absolu qui arrête rapidement le développement post mortcm. Le liquide de Miiller détermine moins de ratatinemenî. Comme colorant, on recourt de préférence à la vésuvine elau bleu de mélhylc, mais les espèces se comportent d'une façon diverse vis-à-vis des couleur^ d'aniline.

L'aspergillus se colore par la fuchsine, le violet de mélhyle el la vésuvine.

Balzer recommande de rechercher les dernuitopliytes en dégraissant, au préalable, dans l'alcool etl'éther, les poils, les écailles, etc. On les traite ensuite, pendant quelques secondes, par la solution aqueuse ou alcoolique d'éosine ou d'une autre couleur d'aniline, on déshydrate dans l'alcool et on monte dans le baume. Pour une préparation qui ne doit pas être conservée, on examine dans la lessive de potasse à 33 0/0.

Les champignons, qu'on rencontre surtout dans l'estomac, seront colorés de préférence avec une solution faible de brun de Bismark, les autres préparations d'aniline déterminant facilement une surcoloration.

La mycose du pharynx est causée par le leptothrix buccaUs ;M\\]eT en distingue quatre variétés :

RECUERCllE DES CHAMPIGNONS ET DES MOISISSURES

1*^ IJacillus maximus buccalis, coloré en bleu par le Gram. 2" Lcptolhrix innominata j

3" Leptothrix maxima buccalis > colorés en jaune — 4" lodococcus vaginalus \

l.es kérato-, oto-, pneumycoses et les mycoses viscérales sont également cause'es par des variéte's d'aspergillus.

Voir pages 14o et i46 les autres méthodes.

CHPAITRE XIII

RECHERClIt: Di:S PARASITl::» ANIMAUX.

\ai recherche des parasites aniniaux: n'ollre pas de difïicLillé si l'on n'envisage pas leur structure détaillée. Ainsi l'ascarus scabiei, l'ascarnsfollieulorum, l'oxyure vermiculaire, le trichocephalus dispar, Tanchylostome duodénal, la trichine spirale, les douves hépatique et lancéolée, peuvent être examinés dans l'eau simple. Mais il y a souvent avantage à aplalir l'animal par pression avec une aiguille sur le couvre-objet. Les œufs des nématodes, des trénuitodes et des cestodes seront aussi examinés dans l'eau.

Trichine des muscles.

Klle peut être examinée dans les préparations en dissociation ; on pciil procéder rapidement en aplatissant de petites particules de chair enirc deux porte-objets pour en faire une bouillie transparente qu'on examinera à un grossissement faible ou moyen.

On choisira surtout des morceaux de diaphragme ou des muscles masticateurs et de préférence des parties voisines des tendons.

La trichine peut aussi être recherchée dans les coupes qu'on fait à la congélation, soit directement, soit après inclusion dans la paraffine, l'allés ne doivent pas être trop minces; les plus épaisses peuvent être colcjrées dans la solution aqueuse de vert de méthyle à 1 pour oO. Ainsi les capsules de la trichine sont plus évidentes.

Les trichines encapsulées ou calcitiées sont rendues transparentes par l'addition d'acides.

Protozoaires.

On les traite avec avantage par les réactifs fixateurs et colorants, tels que l'acide osmique, l'acide chromique, l'iode, les couleurs d'aniline, etc.

Le contenu intestinal chargé de protozoaires est porté sous le microscope directement ou dans la solution de sel marin.

lil'CllERCllK DES PARASITES A.MMAUX

Coccidies.

1^1 les se colorenl bien, dans les préparalions durcies, avec le violet de jj;enliane et la vésuviiie. La double coloration à l'héniatoxyline et à l'éosine est très recommandable : on emploie une solution forte d'éosine ({u'on fait agir pendant plusieurs heures.

Lo sang doit être examiné aulant que possible au début des accès.; on dnii se servir de sanj^ frais obtenu par une piqûre au doigt. Onrecueille lagonlîe sur une lame, on recouvre avec une lamelle, de façon à avoir une couche Im' s mince : « Lorsque les hématies se niellent en piles, les hématozoaires sont très dilllciles à voir ; il fautoblenir des préparations dans lesquelles les hématies se mettent à plat. »

La préparation de sang frais est le procédé d'élection pour les corps sphériques présentant des mouvements amiboïdes, et les llagella animés de mouvements très vifs et très variés, adhérents à des corps sphériques et libres.

Le sang desséché se conserve longlenips, et sur ces préparations on distingue très bien quelques-uns des éléments parasitaires, les corps en croissant, notamment. La préparation doit éire montée à sec, sans baume de Canada (Thoinot et Masselin).

Le mieux étant d'observer le sang à l'état frais, on n'aura pas recours eu géné'ral aux colorcints.

Elle est applicable au sang frais. On porte sur la lamelle et sur le porteobjet une goutte de paraffine liquide ; on dépose une goutte de sang sur la goutte de paratline de la lame et on place le couvre-objet ; le sang se trouve ainsi entre deux couches de paraiïine. L'examen se fait sur la platine chauffante. Le meilleur colorant est le bleu de méthyle en solution aqueuse faible, ou mieux encore la solution très faible de ce produit dans le liquide de bascite stérilisé ou dans le sérum sanguin; on peut y ajouter un peud'éosine pour obtenir une double coloration. L'auteur recommande de baigner pendant 5 à 6 minutes la préparation sur lamelle, fixée par l'alcool absolu, dans la solution suivante :

Fièvre intermittente.

Méthode de Pleiin.

Solution aqueuse concentrée de bleu de méthyle.. . . Solution à 1/2 0/0 d'éosine dans l'alcool à 75°. . . . .

Eau distillée

Lessive de potasse à 20 0/0

60 grammes. 20 »

12 gouttes.

MÉTHODE DE Bu^NAMT POUR LA COLORATION DES COUPES.

1° Fixer pendant une demi-heure ou plusieurs heures dans la solution de :

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