Coloration au carmin des cylindraxes, méthode de Schmaus

1° Durcissement dans le liquide de Mûller (sans lavage consécutif] ; 2° Durcissement complémentaire dans l'alcool, à l'abri de la lumière; 3^ Coloration dans une solution, obtenue par ébullition pendant une demi-heure et filtrée à froid, composée de :

Carminate de soude 1 gramme.

Nitrate d'urane 0 gr. 5.

Broyer et dissoudre dans :

Eau 100 grammes.

4'' Lavage à l'eau, etc.

Le même auteur recommande aussi la coloration des cylindraxes dans une dilution bleu noir (0.25 p. 100 d'alcool à 50''), additionnée d'une petite quantité d'acide picrique. Colorer pendant i heure. Layer à l'eau.

6. Coloration des cylindraxes au bleu d'aniline, Méthode de Strœ;be.

Pour colorer en même temps les cylindraxes et les gaines de myéline, Ciaglinski^ après coloration préalable à la safranine et lavage à l'eau, traite par la solution de bleu d'aniline et lave à l'eau. Strœbe a modifié cette méthode en faisant, après la coloration à l'aniline, le lavage non pas •dans l'eau, mais dans l'alcool alcaliné. Voici son procédé.

1° Durcissement dans le liquide de Millier ;

2° Coloration dans la solution aqueuse saturée de bleu d'aniline, une demi-heure à une heure ;

3° Lavage à l'eau des coupes colorées en bleu noir ;

-4° Dépôt dans un récipient contenant de l'alcool additionné de 20 à 30 gouttes d'alcool caustique à 1 0/0 (potasse caustique 1, alcool 100; laisser reposer 24 heures, filtrer) jusqu'à ce que la coupe soit d'un rouge brun clair et transparente. Il faut en général une à plusieurs minutes ;

5° Lavage des coupes dans l'eau distillée pendant 5 minutes : elles redeviennent bleu clair ;

6" Coloration de contraste pendant un quart d'heure ou une demi-heure dans la solution saturée de safranine, diluée dans son volume d'eau ;

7° Lavage, déshydratation dans l'alcool absolu. Xylol, baume de Canada.

1° Durcissement soigné dans le liquide de Muller; 2° Coloration des coupes, de 10 minutes à plusieurs heures, dans le mélange de :

3" Lavage à l'eau ou à l'alcool jusqu'à ce que la substance grise tranche par sa teinte claire sur la coloration bleu foncé de la substance médullaire ;

4° Éclaircissement dans l'huile de cèdre. Baume de Canada.

Les gaines médullaires sont bleu foncé, les cellules ganglionnaires bleu verdâtre, et les noyaux de névroglie bleus. La méthode est surtout indiquée pour la recherche simultanée des microbes. Les préparations ne se conservent pas indéfiniment.

Coloration a l'or des cylindraxes. Méthode de Freud.

Les cylindraxes prennent urc coloration isolée.

1° Durcissement dans le liquide de Muller;

2° Coloration pendant 3 à 5 heures dans une solution de :

Métuode de Sauli.

Solution aqueuse saturée de bleu de méthyle

Eau distillée

Solution de borax à 5 0/0

21 grammes.

Solution de chlorure d'or à 1 0/0.

Alcool à 950

3° Lavage à l'eau ;

4° Séjour de 2 à 3 minutes dans :

à parties égales.

Lessive de soude Eau distillée

1 gramme.

6 grammes.

5" Lavage à l'eau ;

6° Solution d'iodure de potassium à 10 0/0, o à 15 minutes ; 8° Lavage. Alcool. Baume de Canada.

La méthode à l'or de Freud ne réussit pas toujours. Les cylindraxes ont une coloration allant du bleu sombre au rouge sombre.

Souvent aussi une partie des gaines de myéline se colore en même temps. Les manipulations doivent être pratiquées avec des aiguilles en verre.

Il y a beaucoup de modifications de la méthode à l'or. Cohnheim^ qui employait d'abord la méthode pour colorer les nerfs de la cornée, portait les coupes dans une solution de chlorure d'or à 0.5 0/0, et ensuite, pour quelques jours, dans l'eau acidifiée par l'acide acétique.

Voici en quoi consistaient les modifications, si nombreuses, qui ont été recommandées dans la suite :

a) La solution est beaucoup plus diluée et les coupes y séjournent plus longtemps.

h) On emploie du chlorure d'or et de potassium ou du chorure d'or et de sodium, au lieu du chlorure d'or seul.

c) On renouvelle la solution de chlorure d'or.

d) On opère la réduction non plus par facide acétique, mais par l'acide chlorhydrique, par l'acide formique ou par l'acide tartrique.

C'est avec les préparations fraîches, non durcies, que cette méthode fournit les meilleurs résultats.

1" Durcissement pendant quatre à six mois dans la solution, souvent renouvelée, de bichromate de potasse dans l'eau distillée à 1 0/0 au début, à 2 0/0 dans la suite, de préférence à l'abri de la lumière ;

2° Lavage aussi rapide que possible des coupes durcies dans feau distillée.

Bain de deux à trois jours d'alcool à 50 0/0, souvent renouvelé et obtenu par dilution de l'alcool absolu ;

3° Bain d'alcool à 93° obtenu également par dilution de l'alcool absolu jusqu'à ce que les coupes aient une coloration nettement verte : il faut généralement deux à quatre semaines ;

4° Éventuellement, inclusion dansla celloïdine. Confection des coupes;

5° Coloration des coupes, pendant 2 heures, dans une solution de :

MÉTHODE d'UpSON.

Chlorure d'or

Eau distillée

Acide chlorhydrique

1 gramme.

100 grammes.

6° Lavage des coupes dans l'eau distillée ;

EXAMEN DES TISSUS ET DES ORGANES IGl

1" Dépôt pour une demi-minute dans la solution de potasse à 10 0/0 ; 8° Lavage à l'eau ;

9° Réduction dans la solution préparée extemporanément de :

Acide sulfurique 5 centimètres cubes.

Teinture d'iode à 3 0/0 10 à i5 gouttes.

Mêler et ajouter :

Liqueur de chlorure de fer 1 goutte.

10° Lavage dans l'eau, aussitôt que la coupe a une coloration rouge rosé ;

11" Alcool, huile de cèdre, baume de Canada.

Les coupes seront conservées à l'abri de la lumière. Toutes les manipulations doivent être faites avec l'aiguille de platine ou de verre ; on évite le contact des objets métaili([ues.

Coloration des cvlindhaxes a la nigrosine.

1° Colorer les coupes, 5 à 10 minutes, dans une solution concentrée aqueuse de nigrosine ;

2" Décolorer dans l'alcool dilué, puis dans l'alcool absolu; 3" Huile d'origan, baume de Canada.

La méthode à la nigrosine se recommande par sa simplicité; elle fournit de bonnes vues d'ensend)le, surtout des foyers de dégénérescence.