TECHNIOUE DE L'EXAMEN DU SANG

moins loin que ceux-ci par la baguette de verre pendant la préparation (Hayem)(').

1- — Préparation de sang sec normal. (Cette ligure montre un grand nomljre d hématies, un leucocyte et deu.Y hématoblastes. Comme dans toutes les préparations de sang sec, le leucocyte roulé par l'agitateur qui a servi à étaler la gouttelette de sang est élargi et d'un diamètre exagéré.)

Le sang, étalé en couche mince et desséché, se prête parfaitement à l'application des diverses méthodes de coloration.

FiG. 2. — Préparation de sang sec normal, examinée dans le point de la lame où la goutte de sang a été déposée (comparer celle figure à la précédente). (Ce dessin montre un grand nombre d'hématoblastes, quelques hématies et deux leucocytes.)

(') G. Hayem, Du sang et de ses alléralions anatomiques. Paris, 1889.

MALADIES DU SANG

La plupart des réactifs colorants usités en histologie altèrent les globules sanguins et dissolvent l'iiémoglobine.

L'eau iodo-iodurée toutefois fait exception ; employée en solution de coloration brune assez intense, elle teint toutes les parties qui renferment de Thémoglobine en acajou foncé. EJle permet ainsi, avec sûreté, de découvrir les hématies nvicléées charriées par le sang dans certains cas pathologiques. Lorsqu'on voudra faire agir sur le sang les autres réactifs, il sera nécessaire de rendre les globules inaltérables, en d'autres termes, de fixer les préparations.

Les vapeurs de l'acide osmique remplissent bien ce but; mais il importe de savoir qu'elles s'opposent à l'action ultérieure d'un grand nombre de substances colorantes.

Il sera donc préférable, ou bien d'employer pendant quelques minutes le réactif de NikiforofC (mélange à parties égales d'alcool absolu et d'éther) ou bien, selon le conseil d'Ehrlich, de recourir à la chaleur, en plaçant les préparations pendant une heure à l'étuve sèche à 120-150 degrés.

A l'état normal, les hématies se colorent sous l'action des substances acides telles que l'acide picrique et l'éosine; les noyaux des leucocytes se colorent, comme les microbes, sous l'influence des substances basiques, telles que le violet de méthyle et la safranine et leurs granulations protoplasmiques sous l'action des réactifs neutres. Pour mettre en évidence la propriété neulrophile de ces granulations, il convient, les préparations ayant été fixées par la chaleur, de les soumettre à l'action d'un bain colorant obtenu en plaçant en présence des substances acides et des substances basiques (Ehrlich). On peut, par exemple, employer la formule suivante :

Solution aqueuse saturée de fuchsine acide. . .

Agitez en ajoutant :

Solution concentrée de bleu de méthyle (basique) Eau distillée .

Laisser reposer pendant quehjues jours et filtrer.

Sous l'action de ce réactif, les hématies prennent une teinte rouge et les granulations leucocytiques une coloration violette.

On ne l'encontre qu'en petite quantité dans le sang normal des leucocytes dont les granulations prennent les couleurs acides,^telles que l'éosine; ce sont les leucocytes éosinophiles. Les leucocytes à granulations basophiles y sont très rares. Il n'en est pas de même, ainsi que nous le verrons, à l'état pathologique.

Inversement, nous verrons les hématies normalement éosinophiles, pour nous servir, en ce qui les concerne, des qualificatifs appliqués aux leucocytes, devenir parliellement ou en totalité basophiles. Le procédé qui permet le mieux d'apprécier les changements apportés dans leurs réactions colorantes est celui de la double coloration soit par l'éosine hématoxylique, soit par l'orangé et le bleu de méthylène : les parties altérées du protoplasma globulaire se colorent en bleu, alors que les parties saines prennent une teinte rouge brique si l'éosine hématoxylique a été employée, ou jaune orangé si l'on a eu recours à l'autre réactif- (Maragliano et Castellino) (').

(') Maragliano et Castellino, Sulle modificazioni degenerative dei globuli rossi. Comunicazione f. a. R. Academ. de Genov., IG aprile 1890. La Riforma medica, G maggio 1890. p. G20.

5 volumes.

1 volume.

5 volumes.