OX Y HÉMOGLOBINE

sang défibriné de cochon d’Inde quelques gouttes d’éther, et d’agiter pendant quelques instants le liquide épais, rouge groseille, pour voir celui-ci se prendre en une masse de cristaux. On les a aussi obtenus avec le sang de dinde, d’oie, de pigeon et a'ec celui de beaucoup de poissons. Mais il faut remarquer que les cristaux obtenus avec le sang de divers animaux ne sont pas identiques, et appartiennent à des systèmes cristallins différents. J1 semble donc exister diverses espèces d’ox> hémoglobine. En outre, il convient de distinguer de Poxyhémoglobine 1 hémoglobine réduite et diverses combinaisons définies d’hémoglobine avec des gaz. Nous allons décrire tous ces corps.

OXYHÉMOGLOBINE.

5 131. Préparation des cristaux d’oxyhémoglobine. —

1°M. W. Küline J a indiquéjaniétliode suivante comme donnant un rendement abondant de cristaux avec lT^sang d^THevalT" On place ce sang dans une éprouvette que l'on refroidit, de manière à empêcher la coagulation (page 305). Les globules se déposent et se séparent du plasma. Après avoir enlevé ce derniei, on ajoute aux globules 1 gr. de bile cristallisée pour 600cc de sang. Les globules se dissolvent, et ce qui reste de plasma finit par déposer de la fibrine sous forme d'un réseau lâche qui emprisonne quelques globules non dissous, et qui se sépaie facilement de la solution rouge foncé. On ajoute à celle-ci de 1 alcool à 90 centièmes aiguisé d’une petite quantité d’acide acétique, jusqu’à ce que le précipité d’abord formé se soit redissous ; puis on laisse reposer la liqueur à la température

de 0»; au bout de quelques heures, elle s’est prise en une bouillie cristalline.

, 0n Peut ailssi soumettre à la congélation les globules séparés du plasma, au lieu d’y ajouter de la bile cristallisée (Bollet). Le liquide dégelé est une solution de globules d’où se déposé bientôt un coagulum de fibrine accompagnée d'une certaine quantité du stroma des globules. On fait passer le liquide

10uge à travers un filtre, et on le traite comme précédemment.

L Lehrbuch der physiologischen Cliemie, p. 197.

LE SANG

2° M. Hoppe-Seyler 1 recommande le procédé suivant :

Du sang défibriné est mélangé avec au moins 10 fois son volume d’une solution de chlorure de sodium renfermant, pour 1 volume de solution saturée, environ 1 4 volumes d’eau. On laisse reposer pendant 1 ou 2 jours dans un endroit frais, de manière que la plus grande partie des globules se dépose. On décante alors le liquide surnageant, on introduit le dépôt dans un ballon, on y ajoute l’eau, dont il faut éviter un excès, puis une égale quantité d’éther, et l’on agite vivement : les globules se dissolvent. Après avoir décanté l’éther, on filtre rapidement, à la température de 0°, et l’on ajoute au liquide 1/4 de son volume d’alcool, pareillement refroidi à 0°. On laisse ensuite reposer le tout pendant quelques jours à 0° ou mieux à une température plus basse encore. Le liquide se prend en une masse cristalline.

Aveclesangde rat, de cochon d’Inde, d’écureuil, de chien, les cristaux d’oxyhémoglobine se forment avec une grande facilité pendant la filtration du liquide rouge renfermant la solution de globules ; une partie de ces cristaux peut rester sur le filtre. S’il en était ainsi, on les reprendrait avec une certaine quantité d’eau à 40° : le liquide filtré rapidement, refroidi à 0° et additionné du quart de son volume d’alcool froid, fournit une nouvelle cristallisation, lorsqu’on l’abandonne à une basse température.

Le procédé qui vient d’être indiqué est applicable à la purification des cristaux d’oxyhémoglobine bruts préalablement recueillis sur un filtre et débarrassés d’eau mère par l’expression.

3° On peut retirer l’oxyhémoglobine du sang de chien, qu’il est assez facile de se procurer.

Pour cela, on laisse coaguler ce sang; on divise le caillot et on l’exprime à travers un linge; on ajoute au sang défibriné quelques centimètres cubes d’une solution de 1 partie de bile cristallisée dans 3 parties d’eau. Au bout de 24 heures, on filtre et l’on ajoute au liquide filtré un cinquième de son volume d'alcool. On laisse reposer dans un endroit froid, on recueille les cristaux et on les lave d’abord à l’alcool faible et puis à l’alcool concentré (W. Kuhne).

1. Ilandbuch der Phys. u. Pathol. Chemischen Analyse. 4e éd., p. 251.

OXYHÉMOGLOBINE.

M. Hoppe-Seyler a indiqué un procédé encore plus simple. Le sang de chien défibriné est mêlé d’un égal volume d’eau ; la solution rouge ainsi obtenue est additionnée d’alcool dans la proportion de 1 volume pour 4 volumes de sang étendu. Le tout est abandonné à une température qui ne doit pas dépasser 0n. Les cristaux séparés au bout de 24 heures sont recueillis sur un filtre, exprimés entre du papier et redissous dans la plus petite quantité possible d’eau à 25° ou 30°. La solution est de nouveau additionnée d’alcool et abandonnée à la cristallisation à une basse température.

4° S'agit-il simplement de former des cristaux d’oxyhémoglobine dans une goutte de sang pour les observer au microscope, il convient d’opérer de la manière suivante : on place une goutte de sang défibriné sur le porte-objet, on la laisse évaporer jusqu’à ce que les bords commencent à se dessécher; on dépose ensuite au centre une gouttelette d’eau et on couvre le tout avec la lamelle de verre. Le liquide déborde ainsi au delà de l’anneau d’abord formé, et les cristaux de sang ne tardent pas à se montrer.

§ 132. Forme et composition des cristaux d’oxyhémoglobine. — Ces cristaux sont microscopiques et constituent, à l’état humide, une masse pâteuse d’une couleur rouge de cinabre. Séchée au-dessous de 0°, cette masse se convertit en une poudre rouge brique. Lorsque la dessiccation a lieu au-dessus

Oxyhémoglobine retirée du sang de l'homme et de celui de la plupart des carnivores.

de 0°, la poudre prend une couleur plus foncée, due sans doute à une décomposition partielle.

LE SANG

Sous le microscope, les cristaux d’oxyhémoglobine présentent des formes variées, appartenant à des systèmes cristallins différents. Ceux du sang veineux de l’homme sont des prismes à quatre pans et se présentant souvent sous forme de rectangles ou de rhombes allongés (fig. 8 et 9). Les cristaux du sang de chien forment généralement des prismes à k pans ; ceux du sang de chat sont des tables rhomboïdales minces, ou

Oxyhémoglobine retirée du sang de la souris,

Oxyhémoglobine retirée du sang de l’écureuil.

des prismes à quatre pans, avec des faces terminales très obliques (fig. 9). Seuls, les cristaux du sang de dinde paraissent appartenir au système régulier. Ce sont des cubes rarement modifiés par des faces octaédriques. Les cristaux du sang d’écureuil (fig. 11) apparaissent comme des tables hexagonales. L’oxyhémoglobine du sang de rat et de cochon d'Inde cristallise en tétraèdres ou en octaèdres orthorhombiques (fig. 10); celle du sang d’oie en tables rhomboïdales très minces; les uns et les autres cristaux appartiennent probablement au système du prisme orthorhombique.

Les cristaux d’oxyhémoglobine renferment de l’eau de cristallisation dont une partie se dégageparla dessiccation à0°, dans

une atmosphère "séchée par l’acide sulfurique. Le reste de l’eau ne se dégage qu’à 110 ou 120°, en même temps que Poxyhémoglobine se décompose partiellement. La quantité d’eau de cristallisation que renferment les cristaux varie suivant leur forme et suivant la nature du sang d’où ils proviennent. Les analyses

OXY HÉMOGLOBINE . 303

suivantes, dues à MM. C. Schmidt et Hoppe-Seyler1, indiquent la composition de ces divers cristaux. L’eau de cristallisation y est rapportée à 100 parties de cristaux desséchés sous la machine pneumatique.

Carbone

Hydi’ogène.

Azote

Oxygène 21,84

Soufre

Fer

Acide phosphorique.