ANALYSE MICROSCOPIQUE DU LAIT
Le compte-globules peut avoir d'autres usages que l'étude du sang. Je l'ai employé pour l'analyse du lait et comme guide dans le choix des nourrices (1) d'après de nombreuses analyses.
On peut étudier le lait de femme au microscope, en comptant le nombre de ses globules, ce qui donne la quantité de beurre, c'est-à-dire la mesure de sa richesse. Pour cela il faut une seule goutte de lait prise après quelques minutes de succion du sein par V enfant. Or rien n'est plus facile. Il suffit de recueillir seulement une demi- cuillerée à café de ce liquide et, avec le compte-gouttes gradué, de prendre la goutte qui est nécessaire à l'analyse.
Au lieu de faire mes numérations par 5^ de millimètre cube, comme on le fait pour le sang, j'ai dû compter par 10' de millimètre cube.
En voici les raisons :
Lorsque l'on compte les globules du sang dans une cellule de verre plate, de 1/5 de millimètre d'épaisseur, les ^{ohxÀQs, plus lourds que le sérum tombent au fond au bout de quelques minutes et il n'en reste pas qui nagent entre deux eaux. Tous sont au fond de la cellule et quand la plaque de verre est au foyer du microscope on peut les compter tous.
Au contraire, avec du lait dans cette même cellule, au 5° de millimètre d'épaisseur, comme les globules de lait sont plus légers que le sérum, ils montent ainsi que la crème à la surface du liquide, et par consé-
(1) E. Bouclait, Ilijgietie de la première enfance, 1° édition. Paris, 1879.
MOYENS PHYSIQUES D EXPLORATION
quent se trouvent dans la cellule sous la lame de verre obturatrice. Mais ils ne montent pas tous, quelques-uns restent dans l'épaisseur du sérum, de façon à ne pouvoir être comptés au premier calcul. Plus l'épaisseur de la cellule d'examen est grande, plus on éprouve de difficultés à compter tous les globules du lait.
J'ai donc dû faire préparer par M. Nachet, des cellules à 1/10 de millimètre de profondeur, spéciales pour V analyse du lait, et c'est avec ces cellules que j'ai opéré.
On prend une goutte de lait de femme mesurée avec le compte-gouttes gradué de Limousin, que l'on met dans 100 gouttes d'eau distillée, pure,
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FiG. 70. — Image microscopique d'un carré de 1/5 de millimètre do côte, couvrant la cellule de verre au 10^ qui renferme une goutte de lait de fumme diluée au 100^. — 11 y a 86 globules. Cela fait 86 : 4 = 21 ;500 X 1000 — 100 = 2 150000 globules par millimètre cube de lait.
ou mieux salée au 100'. Cette addition a pour but d'avoir un liquide à 1030 de densité, facilitant l'élévation des globules de lait. Cette ascension est plus lente dans l'eau distillée.
Alors une goutte de ce mélange au 100' étant placée sous un microscope dont l'occulaire renferme un quadrillage ayant 1/5 de millimètre de côté, comme celui qui sert aux numérations de globules sanguins. On compte ce qui se trouve compris dans le carré.
Supposons qu'on y compte, une première fois, 94 globules de lait, gros ou petits, il faut changer la préparation de place et compter de nouveau. On doit faire ainsi trois calculs successifs sur des points différents et prendre la moyenne de l'addition des trois numérotages.
Cette moyenne doit être divisée par 4, puisque ayant compté dans un quadrillage ayant 1/5 de millimètre de côté et renfermant quatre carrés de 1/10, il faut prendre le quart du nombre de globules trouvés qui représente les globules d'un des quatre carrés compris dans le quadrillage
complet. Quand cette opération est achevée on multiplie le total par 1000 qui est le cube de 10. Cela est nécessaire parce que la cellule est au 10'. On multiplie ensuite par 100, puisque le titre du liquide est au 100^
Supposons 292, le nombre des globules trouvés dans trois calculs différents faits sur le quadrillé au-dessous duquel se trouve la solution de lait au 100% on a :
D'après ces calculs, on voit donc qu'il y a dans cet échantillon de lait deux millions quatre cent vingt-sept mille globules de 1 millimètre cube. Par un autre calcul, on trouve que ce lait renferme deux cent quarantedeux milliards sept cents millions de globules par litre.
D'après ce procédé au 10", et aussi d'après le procédé d'analyse au 5% j'ai compté les globules du lait chez cent cinquante-huit nourrices. Dans mes observations, j ai tenu compte de l'âge delà nourrice et de l'âge de son lait, j'ai établi des catégories pour le lait pris avant la étée, pendant la tétée et après la tétée.
Voici les principaux résultats généraux sur le chiffre des globules et globulins :
5 fois les globules ont été de 200 à 400 000;
14 fois — 400 à 600 000;
20 fois — ^ 600 à 800 000 ;
24 fois — 800 000 à 1 000 000 ;
66 fois — 1 à 2 000 000;
27 fois — 2 à 4 000 000;
2 fois — 4 à 5 000 000;
Ces nombres comprennent les gros et les moyens globules, ainsi que les petits globulins qu'il est possible de compter en faisant varier la vis du microscope à gauche, pour bien saisir tout ce qui est dans l'épaisseur de la couche laiteuse contenue dans la cellule au dixième, qui sert de moyen d'analyse.
Si Ton voulait plus d'exactitude, comme trois globulins valent à peu près un globule, il serait bon de compter tous les gros et moyens globules comme unités, puis de compter à part les globulins dont on prendrait le tiers seulement, qu'on ajouterait aux unités inscrites. Ainsi, je suppose •47 globules gros ou moyens, et 36 globulins, il faudrait compter 47 plus 12 qui est le tiers de 36, ce qui ferait 50. De celte façon on aurait des chances d'arriver à la vérité dans la manière d'apprécier la richesse du beurre du lait de femme.
Ce n'est d'ailleurs qu'une conséquence de l'étude des dimensions offertes parles globules de lait, dimensions qui varient de un à trois cen^ ièmes de millimètre de diamètre.
474 MOYENS PHYSIQUES d'eXPLORATION.
Ce qu'il y a d'important à retenir dans ces recherches et dans ces calculs à faire pour obtenir des résultats précis, c'est de compter à la fois les globules et les globulins qui peuvent échapper si l'on n'y fait pas attention.
Peut-être, pour opérer avec plus d'exactitude, faudrait-il compter à part les vrais globules et les globulins, dont on prendrait le tiers pour montrer qu'il faut trois globulins pour faire un globule. Mais cela ne m'a pas semblé indispensable à la netteté de mes analyses.
Le moyen de tout voir, c'est d'attendre dix minutes pour que, dans la plaque mise sous le microscope, tous les globules soient montés à la superficie du liquide sous le verre supérieur, et de plus, c'est de tourner la vis du microscope à droite et à gauche, tout en comptant les globules, pour varier le foyer de l'instrument.
Malgré la diversité de composition du lait, et les variations de quantité de ses éléments, chez la même nourrice aux différentes époques de la journée, la numération des globules du lait, faite avec soin, plusieurs fois en vingt-quatre heures, sur le lait du matin, du midi et du soir, donne une moyenne qui représente bien la qualité du lait de femme.
Elle ne donne exactement que la quantité des globules du beurre, dont on peut déterminer le poids, mais en général cette quantité représente la richesse ou la pauvreté des autres éléments. Cela est très suffisant pour l'appréciation et le choix des nourrices.
Rapport du nombre des globules à la densité du, lait et au poids du beurre. — Si l'on veut remonter du nombre des globules laiteux au poids approximatif de la quantité de beurre par litre de lait, ou même déterminer approximativement, à deux degrés près, la densité de ce lait, cela est facile en comparant le lait de vache au lait de femme.
Il faut alors prendre une certaine quantité de lait de vache, et parallèlement faire: 1° la numération exacte des globules sur le lait préparé pour le microscope ; puis 2° prendre la densité correspondante du lait ; et enfin 3° déterminer chimiquement par l'analyse la quantité en poids de beurre contenue dans le lait soumis à l'analyse.
Après avoir ainsi comparé ces trois ordres de calculs établis avec une scrupuleuse attention, j'ai dressé un tableau montrant à quelle densité et à quel poids de beurre par litre, correspondent les quantités de globules appréciées au microscope. De cette manière, le nombre des globules du lait dans un millimètre cube de lait permet de dire quel est, à peu de chose près, son poids de beurre par millimètre cube, par 1000 grammes, et en même temps quelle est sa densité approximative.
Ainsi un lait de vache renfermant 2 402 500 globules et globulins par millimètre cube donne trois cent-millièmes de beurre pour ce millimètre, et se rapporte à un lait qui, par litre, donnerait 36 grammes de beurre, et marquerait 1032 au densimètre.
Dans le lait de femme qui renfermerait un ou deux millions de globules par millimètre cube, il y aurait deux et trois cent-millièmes de beurre dans ce millimètre, chiffre obtenu par le calcul, ef sans qu'il soit fait d'analyse.
EMPLOI DE LA LOUPE ET DU MinROSCOPE. 175
Si l'on se sert des chiffres obtenus sur le lait de vache pour apprécier le lait de femme, on voit qu'un lait qui offre la moyenne ordinaire des globules, c'est-à-dire 1 026 000 globules par millimètre cube, est un lait qui doit avoir une densité de 10:22, correspondant à 24 grammes de beurre par 1000.
Exemples du ra-pport existant entre le nombre des globules du lait avec la dennté de ce liquide et son poids de beurre par 1000.— Ces expériences ne peuvent bien se faire que sur du lait de vache, et il est facile de voir qu'elles peuvent servir à juger par analogie de la densité et de la quantité de beurre du lait de femme.
Chez cette dernière, la densité est très difficile à déterminer d'une façon absolue, et avec l'incertitude des résultats fournis par les analyses antérieures, mon procédé de recherches acquiert une certaine importance.
Chez la femme, la densité du lait varie plus que dans le lait des différentes espèces animales connues, où déjà les chiffres publiés sont très différents les uns des autres.
Cela se comprend lorsqu'on a fait beaucoup de recherches à cet égard. D'ailleurs, il est très difficile chez la femme de recueillir une suffisante quantité de lait pour le soumettre à l'épreuve du densimètre. Chez quelques femmes, on ne peut en tirer plus de 5 à 10 grammes, ce qui est tout à fait insuffisant.
Quoi qu'il en soit, voici ce qui résulte des calculs que j'ai faits sur le nombre des globules du lait de vache comparé à la densité de ce liquide et au poids de beurre qu'il contient par 1000.