DUES AUX INFUSOIRES ET AUX FLAGELLÉS
PAR
LE Dr MARCEL LEGER
Médecin-Major ire classe des Troupes Coloniales.
En dehors de l’amibe dysentérique, Entamoeba dijsenteriœ (hystolitica, tetragena) (voir article C. Matins), on connai un certain nombre d’autres protozoaires capables de porter leur action nuisible sur le tube digestif et de déterminer des ente .
et même de véritables dysenteries. .
Les diarrhées dysentéri formes dues à l’hématozoaire de La ran, au Leishmania Donovani, au Trypanosoma gambiense ont déjà été mentionnées (voir ce Traité , fasc. I, article C . ra , p. 3y3 ; fasc. Il, article Lebceuf, p. 3 r 5 ; fasc. 111, artic e t.,
Martin et Lebœuf, p. 339).
Certains Infusoires et Flagellés ont également une action pathogène indéniable, et leur étude, dans bien des cas encore incomplète, mérite une attention toute spéciale. L’examen microscopique des selles pourra parfois donner l’explication de symptômes
intestinaux dont la cause échappe.
Nous aurons à étudier ou à signaler :
Parmi les Infusoires, Balantidium coli , Balantidium minutnm , Nuctotherus jaba , Nyctotherus af ricana , Uronema sp . Colporta cucullus, Chilodon dentatus , Chilodon uncinatus ;
Parmi les Flagellés, Trichomonas intest inalis^Lamb lia intestinain, Chilomaslix (Tetramitus) Mesnil i, Prowazekia Cruzie t Wpinberai et quelques autres plus rares.
TECHNIQUE HELMINTHOLOfilQUE APPLICABLE A L ÉTUDE DES INFUSOIRES ET FLASELLÉS DES SELLES. - Les Infusoires et les Flagellés sont des protozoaires extrêmement délicats ; leui étude morphologique exige certaines précautions.
C’est l’examen à l’état frais qui permet presque toujours de les rencontrer. L’identification ne peut être faite le plus souvent que d’après des spécimens colorés.
~1> M LEGER. - DYSENTERIES DUES AUX INFUSOIRES
Examen à l’état frais. — Lorsque les selles suspectes sont fluides, c’est le cas le plus fréquent, il suffit avec une pipette d’en placer une goutte entre lame et lamelle sur la'platine du microscope. Si elles sont consistantes, on les diluera par addition d’une petite quantité d’eau physiologique à 7 p. 1000.
L’observation se fera d’abord à un grossissement moyen (objectif 4, oculaire 2 ou 3, par exemple) ; puis on aura intérêt à employer des objectifs plus forts, objectif 7 ou 8 ou même objectif à immersion.
Grassi a fait connaître une solution qui permet aux protozoaires de rester longtemps vivants. Elle se compose de :
Chlorure de sodium j gramme.
Albumine d’œuf. 30 ccm.
Cau 200 ccm .
La grande mobilité des parasites, en particulier dans le liquide de Grassi, empêche souvent d’en surprendre la structure et surtout de distinguer les cils et les flagelles. On ajoutera à la préparation un peu de solution de gélatine ou de gélose, ou mieux une substance mucilagineuse dissoute dans de l’eau, gomme adragante, graines de cognassier, par exemple. Il arrive un moment où Infusoires et Flagellés ne se déplacent plus que lentement et où l’observation à l’état frais devient facile et profitable.
L’étude morphologique serait très facilitée, d’après Langeron (1), en additionnant d’une goutte de liquide de Bonin très étendu le produit à examiner avant de le recouvrir d’une lamelle et de luter la préparation.
Les colorations vitales, en particulier pour les Infusoires, donnent d’excellents renseignements. On se servira de rouge neutre à 1 pour 1000, ou de solution aqueuse de bleu de méthylène à 1 p. 5oo, d’après la méthode Sabrazès (2).
Examen après coloration. — De bonnes préparations colorées sont malaisées à obtenir. Les cils ou flagelles se détachent avec la plus grande facilité, les corps protoplasmiques se déforment, les noyaux retiennent mal la couleur.
Brumpt a conseillé de mélanger sur la lame le matériel à fixer à de la salive avant d’en faire un frottis. La petite quantité de salive mise suffit pour faire adhérer les flagellés ou infusoires.
Un procédé rapide a donné à G. Malliis et à nous-même (3) de très bons résultats pour le Prowazekia Weinbergi.
On dépose sur une lame, près d’une extrémité, une goutte de
(1) Langeron, Précis de microscopie, jgi3, Masson et Cio, Paris.
(2) Sabrazès, Car. hebd. Sc. mêd. Bordeaux, ay nov. 1918 et pcssim ; C. R. Soc. Biologie, igu, t. LXX, p. 247.
(3) G. Mattiis et M. Leger, Recherches de Parasitologie et de Pathologie humaines et animales au Tonkin, p. 200, 1911, Masson et G'10, Paris,
TECHNIQUE HE LMINTHOLOGIQUE
liquide riche eu flagellés (selle ou culture); ou ajoute une goutte d’un sérum quelconque et on mélange avec précaution. O11 expose ensuite la lame, durant quelques secondes, aux vapeurs d’acide osmique. On étale avec une aiguille de verre, et, dès que la préparation est sèche, on colore, d’après le mode habituel, au Leishman ou au Giemsa. De cette façon, pendant les divers temps de coloration et de lavages, les parasites restent collés sur la lame, ils ne subissent pas de trop grandes déformations, et, pour la plupart, conservent leurs flagelles. L’addition d’une goutte de sérum a de plus l’avantage d’agglutiner la plupart des bactéries, dont l’extrême abortdance dans les selles et les cultures rend l’observation des flagellés particulièrement difficile.
L’étude histologique la meilleure est faite après coloration à l’hématoxyline ferrique.
i° Fixer à l'état humide par le sublimé acétique alcoolique de Schaudinn :
Alcool absolu 30 grammes.
Solution aq. sublimé à saturation 60 —
Acide acétique glacial. . 't
Le frottis sera laissé un quart d’heure dans le liquide porte à 5o degrés environ.
2° Après lavage à l’eau, porter la lame dans la série ascendante puis descendante des alcools :
Alcool à -40°. ....
Alcool à 70° iodé
Alcool à 90°
Alcool à 70°
Alcool à 40°
3° Rincer soigneusement, puis soumettre pendant 2 heures la préparation au mordançage à l’alun de fer.
Alun de fer ammoniacal. . .
Eau distillée
4° Laver rapidement et placer la lame, pendant 12 à 1 5 heures, dans le bain colorant suivant :
Hématoxyline purissime Eau distillée
La solution se conserve en ayant soin d ajouter quelques gouttes de formol.
La solution usagée colore plus vigoureusement.
5° Laver rapidement à l’eau et soumettre la préparation a un nouveau bain d’alun de fer ammoniacal à .‘3 p. 100. 11 est impor-
