Amibe de la dysenterie

Morphologie de l'Amibe de la dysenterie. — L étude d E. dysenteriae s’appuie sur l’observation du parasite à l état vivant et sur l’examen de préparations fixées et colorées.

La fixation à sec est à rejeter d’une façon absolue. Il faut toujours avoir recours à la fixation à l’état humide, au moyen soit du sublimé alcoolo-acétique, soit du liquide de liouin-Duboscq. La

MORPHOLOGIE ET ÉVOLUTION DE9 ENTAMIBES 241

coloration de choix est le procédé à l’hématoxyline ferriqueéosine.

Le matériel est fourni ; i<> par des selles dysentériques ; 20 par les divers pus amibiens (abcès du foie, abcès cérébraux, etc.) et par des organes présentant des lésions dysentériques ; 3° par des selles diarrhéiques fécales émises par des convalescents de dysenterie ; 4° par des selles normales de sujets sains porteurs d’amibes.

Pendant longtempsTAmibe dysentérique ne fut connueque sous un seul aspect : la forme amiboïde mobile, que Lambl et Lüscli ont découverte et que Schaudinn a décrite sous le nom d ’E. histolijtica. En effet, pour étudier le parasite, les observateurs s’adressaient uniquement au matériel prélevé chez les malades (selles dysentériques, pus) ou recueilli à l’autopsie de sujets ayant succombé à une atteinte d’amibiase (intestin dysentérique, foie suppuré).

Or, dans les parties muco- sanguinolentes des selles, comme dans les pus d’abcès amibiens et dans les coupes d’organes lésés, l’Amibe se présente toujours avec les mêmes caractères morphologiques, sous le type que nous appellerons histolytica. Mais lorsqu’à la suite de la découverte des kystes tétragènes , on eut l’idée de continuer à examiner les selles des dysentériques pendant les jours qui suivaient la crise aiguë, on constata dans les matières diarrhéiques et fécales la présence des formes mobiles et kystiques identiques à celles décrites par Yiereck comme appartenant à E . tetragena. Il devint évident que l’on avait toujours sous les yeux l’Amibe dysentérique, mais sous des aspects differents.

Plus lard, on se rendit compte que les formes amiboïdes du type tetragena , ainsi que les kystes, pouvaient persister très longtemps, après la guérison clinique complète etmême on arriva à les décelerchez des individusparfaitement sains, ayant séjourné dans des régions où l’amibiase est endémique, ou ayant vécu au contact de dysentériques.

Nous connaissons donc E. dysenteriae sous l’aspect d’une amibe mobile et sous la forme kystique ; à la phase mobile, elle se présente sous deux types : type tetragena et type hislolytica.

Nous étudierons d’abord la forme tetragena et les kystes, puis la forme histolytica :

1° Forme mobile du type tetragena. — Dans les parties fécales des selles dysentériques, dans les selles diarrhéiques et aussi dans les selles de consistance normale de convalescents d’amibiase, A. dysenteriae , examinée à l’état vivant, se présente sous l’aspect d’une masse cytoplasmique mesurant de i5 à 26 \j. environ

et de forme plus ou moins régulièrement ovalaire; elle émet lentement des pseudopodes et se meut paresseusement. On distingue parfois à la périphérie une zone plus claire, d’aspect plus homogène^ mais la différenciation du cytoplasme en ectoplasme et en endoplasme est toujours peu marquée.

Le cytoplasme, finement grenu, ne contient pas de globules

Fiff io.— Amibe de la dysenterie (Fixation: sublimé-alcoolo-acétique. Coloration :

hématoxyline ferrique).

a, Forme mobile du type tetragena ; b, Amibe binucléée du type tetragena ; c, Forme mobile du typ e hislolytica.

rouges ; il présente quelques grandes vacuoles, mais aucunenest contractile. Le noyau, facilement visible, occupe une position variable ; tantôt il est situé au centre, tantôt il est rejeté plus ou moins vers la périphérie ; il est de forme vésiculeuse et mesure 4 à 5 [j- de diamètre. Le noyau renferme des granulations refring-entes détaillés inégales et qui sont accolées contre la membrane, formant une couronne d’un aspect très caractéristique.

MORPHOLOGIE ET ÉVOLUTION DES ENTAMIBES

Au centre du noyau, il existe un corps figuré ayant l’aspect d’un nucléole, mais avec des propriétés chromatiques différentes. Cet élément nucléaire a reçu le nom de caryosome. D’après Hartmann (1908-1 g r^.), il serait le siège de phénomènes intéressants. Cet auteur aurait vu, sur le vivant, le caryosome émettre dans l’espace nucléaire des granulations qu’il considère comme des particules de chromatine ; celles-ci vont se fixer sur un réseau achromatique périphérique où elles se disposent en couronne. Dans un caryosome ainsi appauvri en chromatine, Hartmann aurait constaté la présence d’un grain central qui, d’après son rôle dans la division nucléaire, doit être homologué à un centriole. Ces périodes d’excrétion chromatique alternent avec des périodes d’élaboration au cours desquelles le caryosome reprend son volume primitif. • (

Examinée sur des préparations fixées et colorées à l’hématoxyline ferrique-éosine, l’Amibe montre un cytoplasme, teinté en rose ou en violet plus ou moins foncé, possédant une structure alvéolaire très nette. Le noyau, riche en chromatine, présente un aspect en roue très particulier. La fine membrane nucléaire est renforcée intérieurement par de grosses granulations de formes irrégulières et colorées en noir intense ; au centre se trouve le caryosome. Celui-ci est presque toujours entouré d’une zone claire, circonscrite elle-même par un anneau de fins granules (Werner, Hartmann, Whitmore), d’où partent de minces trabécules de linine allant à la membrane nucléaire. Il existe souvent sur ces trabécules, anastomosées en réseau, de fines granulations chromatiques disposées en couronne. Lorsque la différenciation des préparations est suffisamment poussée, et surtout lorsque le caryosome est pauvre en chromatine, on constate au centre de celui-ci la présence d’un^granule qui a fixé plus électivement la laque ferrique : c’est le centriole. Chez E. dysenleriae , le centriole est donc intranucléaire, et non extranucléaire, comme l’ont prétendu certains auteurs.

Cet aspect du noyau que nous venons de décrire se modifie au cours de l’évolution cyclique de la chromatine caryosomienne, ainsi que lors des remaniements nucléaires qui se manifestent au moment de la division et de l’enkystement. Aussi ne faut-il pas s’attendre à trouver chez tous les individus du typ etetragenci un aspect uniforme du noyau.

2° Les kystes. — Les kystes en plus ou moins grand nombre accompagnent toujours les amibes du type lelracjena. Ils se présentent sous des aspects multiples que, pour la commodité de la description, nous rangerons en trois catégories: les kystes mûrs, les kystes en voie de développement et les kystes en voie de dégénérescence.

Les kystes de ces diverses catégories se rencontrent dans les selles en proportions variables ; tandis que dans certaines les kystes uninucléés ou en voie de développement prédominent, dans d’autres les kystes mûrs sont en majorité. Ce fait est en rapport avec le degré d’évolution des kystes au moment où ils sont éliminés avec les déjections.

1° Kystes murs. — Ces kystes peuvent être typiques ou atypiques.

Les kystes mûrs typiques sont pourvus de 4 noyaux et présen-

p;™ ,i. — Formation des kystes tétragènes de l’Amibe dysentérique (Fixation, su- ®‘ blimé-alcoolo-acétique ; Coloration : hematoxylme ferrique).

, Formation de vacuoles dans le cytoplasme ; a, Constitution des bâtonnets sidéro- Dhiles 3 et 4 Première division nucléaire ; 5, Stade a deux noyaux; 6 et 7, Deuxièmes divisions nucléaires ; 8 et 9, Kystes tétragènes.

tent dans leur cytoplasme des masses oblongues en forme de bâtonnets d'une substance très réfringente, sur le frais, et qui se colore en noir intense par la laque ferrique (chromidium des auteurs allemands, cristalloïdes de Chatton, corps sidéroplnles). Les noyaux, de . m 5 à 2 p. 5 de diamètre, montrent une couronne de granulations appliquées contre la membrane e amas central, plus ou moins compact, de lins granules siderop ules correspondant au caryosome. Au point de vue de leurs dimensions, les kystes mta typiques sont de deux sortes qui se ren-

MORPHOLOGIE ET ÉVOLUTION DES ENTAMIBES 245

contrent avec la même fréquence. Sur le frais, les uns mesurent 12^5, les autres i4 p.; cette différence de i |a5 dans les diamètres est très appréciable lorsque ces deux sortes de kystes se trouvent dans un même champ microscopique. Sur préparations fixées et colorées, en raison de la rétraction due à la fixation, les dimensions sont respectivement io p, et 1 1 p. 5.

Les kystes mûrs atypiques diffèrent des précédents par leurs dimensions anormales ou par l’absence de bâtonnets sidérophiles. Certains kystes mûrs, en effet, tout en ayant le meme aspect et la même structure que les kystes typiques sont de dimensions inférieures ou supérieures à celles que nous venons d’indiquer, pouvant aller de 7 à 16 jj. (sur le frais).

Se basant sur ces différences que l’on constate dans la taille des kystes, les auteurs anglais, Wenyon et O’connor (1916), Dobell et Jepps ( J 9 1 7) ont été d’avis qu’il y avait lieu de considérer dans

les infections à E . dysenteriae .

i° Des cas, de beaucoup les plus nombreux, dans lesquels les kystes ont des dimensions moyennes comprises entre 10 et i5 p.;

2o Des cas dans lesquels les kystes ont des dimensions inférieures à 10 [x. ;

3° Enfin de rares cas dans lesquels les kystes ont des dimensions supérieures à i5 p..

Nous sommes d’accord avec les auteurs anglais pour reconnaître qu’il existe des cas d’amibiase où les kystes sont tous de petites tailles. Les préparations que Dobell nous a aimablement envoyées ne nous ont laissé aucun doute à cet égard et nous avons pu faire la même constatation sur des préparations faites avec des selles de dysentériques en traitement où nous avons vu des kystes de 5 à 7 p. (après fixation et coloration). Par contre, nous ne sommes pas convaincus de l’existence de cas d amibiase à grands kystes. Les auteurs anglais n’en ont constaté qu exceptionnellement et ils n’ont pas dit sur quels caractères ils se sont appuyés pour les rapporter à E. dysenteriae plutôt qu’à E. coli.

Mais s’il est exact qu’il existe des cas d’amibiase où les kystes sont tous de petites tailles, faut-il en conclure qu’il s’agit de races différentes? Pour accepter cette conception de races il faudrait démontrer :

i° Que mis à l’abri de toute contamination nouvelle, un malade en cours de traitement, qui présente dans ses selles des kystes dont les dimensions de fréquence sont de 12 p.. <r> et i4 F-* nt montrera jamais de petits kystes ;

2° Qu’en infectant un individu avec de petits kystes on retrouvera exclusivement des petits kystes dans ses selles.

Tant que celte démonstration n’aura pas été faite, on peut se demander si les variations dans la taille des kystes ne sont pas des

246 MATHIS. - L’AGENT PATHOGÈNE DE L’AMIBiASE HUMAINE

fluctuations dues à des modifications du milieu intestinal et non desmutations correspondant à des races. On sait que des facteurs divers : nourriture anormale ou insuffisante, température, etc., peuvent déterminer du nanisme chez certaines espèces animales. Il est donc possible que des modifications de la flore intestinale de 1 Homme ou que l’action de médicaments employés dans le traitement de l’amibiase soient des causes suffisantes pour déterminer du nanisme chez E .dysenteriae. La diminution de la taille des kystes correspondrait par suite à un état pathologique. En faveur de cette hypothèse nous noterons que dans les infections où les kystes sont tous de dimensions inférieures à io p,., ceux-ci présentent des signes manifestes d’altération : fréquence des déformations et vacuolisation du cytoplasme.

Des examens répétés des selles de nombreux dysentériques avant et pendant le traitement permettront d’établir d’une façon indiscutable si cette manière de voir est exacte.

Quant aux kystes tétragènes dépourvus de bâtonnets sidérophiles, on ne les trouve guère que dans une proportion de io o/o et ils peuvent être de dimensions normales ou anormales.

Nous avons admis avec la majorité des auteurs, et en particulier avec Hartmann (1912), que les kystes mûrs à' E . dysenteriae n’ont jamais plus de 4 noyaux. Pour nous, il ne fait aucun doute que tous les kystes à huit noyaux doivent être rapportés à E. coli. Or, Kuenen et Swellengrebel ( r 9 1 3), Swellengrebel et Schiess ( r 9 1 7) n’ont pas hésité à attribuer à E . dysenteriae des kystes à huit noyaux. Cette affirmation, si elle était justifiée, supprimerait un caractère différentiel important pour la diagnose des deux Entamibes intestinales de l’Homme. Il nous paraît donc nécessaire d’examiner de près les arguments que ces auteurs apportent en faveur de leur thèse.

C’est dans un cas de dysenterie contractée aux Indes néerlandaises (1913) que Kuenen et Swellengrebel disent avoir constaté la présence de ces kystes à huit noyaux. A l’appui de leur manière de voir, ils indiquent : i° qu’ils n’ont jamais observé E. coli chez leur malade; 20 que ces kystes à huit noyaux ne présentent pas la membrane d’enveloppe à double contour caractéristique, d’après eux, des kystes d ' E. coli.

À notre avis, ces arguments ne nous paraissent pas suffisants pour entraîner la conviction.

En effet, l’appréciation de l’épaisseur de la membrane kystique n’est pas toujours facile à faire et il est illusoire de vouloir séparer les kystes des deux entamibes intestinales de l’Homme à l’aide de ce caractère morphologique. Il 11’est d’ailleurs pas toujours possible de constater la présence de la membrane kystique et James (1914) note que même chez E. coli , il est difficile, dans

MORPHOLOGIE ET EVOLUTION DES ENTAMIBES

bien des cas, d’affirmer si l’on sc trouve en présence d’un kyste ou d’une amibe mobile multinucléée.

D’autre part,Kuenen et Swellengrebel n’ont pas prouve d une façon irréfutable qu’Æ': coli ^existait pas chez leur dysentérique. On sait, en effet, la difficulté qu’il y a, dans une infection double, de séparer les formes amibiennes mobiles d E. coli de certaines formes végétatives d’E. dysenteriae du type tet™qenci Ouantaux kystes à huit noyaux qu’ils rapportent a 1 Amibe de la dysenterie, il faut remarquer qu’ils sont dépourvus de bâtonnets sidérophiles et plus volumineux que les kystes mûrs typiques de cette Entamibe. Ils rentrent dans les dimensions que l’on attribue aux kystes d’E. coli. En admettant même que les diamètres des kystes à huit noyaux vus par Kuenen et Swellensrebel aient été compris dans les limites des dimensions des kystes tétragènes, on ne serait pas encore en droit de les considérer

comme n’appartenant pas à l’Amibe banale du colon.

La majorité des auteurs, en effet, qui ont étudié E. coli reconnaissent que certains kystes à huit noyaux de cette entamibe sont de même taille ou de taille plus petite que les kystes typiques d’E. dysenteriae , et Wenyon (1913), en particulier, aurait même observé des kystes n’ayant que 9 de diamètre. Quant à James (1914), qui a rencontré deux foisdes kystes à huit noyaux de 1 1 p. 5, il se demande, sans se prononcer, s’il faut les rapporter à E. coli ou à E. dysenteriae. #

Tout récemment, dans une communication à la Société de Pathologie exotique, Swellengrebel, en collaboration avec Schiess (1917), a de nouveau affirmé l’existence de kystes à huit noyaux chez E. dysenteriae. Comme ces auteurs n’apportent aucune nouvelle preuve à l’appui de leur observation nous n’ajouterons rien aux critiques que nous venons de formuler. Toutefois, nous ferons remarquer qu’il eût été désirable que ces auteurs fissent connaître dans quelle proportion ils ont rencontré ces kystes a

huit noyaux. .

En ce qui nous concerne, nous avons eu l’occasion d examiner de nombreux cas d’infection pure à E . dysenteriae et jamais nous

n’avons vu de kystes à huit noyaux.

20 Kystes en voie de développement. — Les kystes en voie de développement sont des kystes à 1, 2 ou 3 noyaux. Louis mien sions sont celles des kystes mûrs et par conséquent sont comprises sur le frais entre 10 et 1 5 \j. avec les deux mêmes fréquences de 12 |x 5 et i4 Mais dans ces formes en évolution, la structure nucléaire est variable suivant que les royaux sont en repos

ou en division. C’est dans ces kystes que l’on peut étudier les

processus mitotiques aboutissant à la formation des 4 noyaux. Dans la très grande majorité des cas, les mitoses des deux noyaux

248 MATHI8. - L’AGENT PATHOGÈNE DE L’AMIBIASE HUMAINE

secondaires du kyste sont synchrones, et l’on passe du stade binucléé au stade à 4 noyaux. Mais il peut arriver que la division d’un noyau secondaire précède celle de l’autre, ainsi s’explique la présence de kystes à 3 noyaux qui, du reste, ne se rencontrent que très rarement.

Les bâtonnets sidérophiles peuvent manquer aux divers stades de l’évolution kystique comme dans les kystes mûrs.

Fig. i2. — Amibes de la dysenterie à l’état vivant dans une selle mucosanguinolcnle. a, Amibes en mouvement ; /, leucocytes ; h, hématies.

3° Kystes en dégénérescence. — La dégénérescence des kystes porte sur les noyaux et sur le cytoplasme.

Les phénomènes de dégénérescence d’ordre nucléaire se traduisent par unecondensation de la chromatine du noyau qui peut être suivie d’une fragmentation allantjusqu’à l'émiettement. Ces divers aspects ne peuvent être mis en évidence que sur préparations colorées.

La dégénérescence du cytoplasme consiste en une liquéfaction qui détermine la production de petites vacuoles. Celles-ci se

MORPHOLOGIE ET ÉVOLUTION DES ENTAMIBES 249

fusionnent en une grande vacuole d’aspect clair, de forme ronde ou ovale qui, occupant presque tout l’espace kystique, rejette les bâtonnets sidérophiles et le ou les noyaux à la périphérie. Les kystes vacuolaires n’ont jamais plus de un ou deux noyaux, ceux-ci affectent le plus souvent une forme ovalaire et montrent une disposition anormale de la chromatine.

Certains auteurs, Dobell et Jepps (1917), en particulier, admettent que ces kystes vacuolaires correspondent à un stade normal dans le développement et pour eux les vacuoles contiennent du glycogène.

Les kystes en dégénérescence ne sont jamais très abondants et leur nombre, variable suivant les selles, oscille entre 3 et '

3° Forme mobile du type histolytica. — A ce stade l’Amibe de la dysenterie s’observe dans les selles muco-sanguinolentes. A l’état vivant, elle se présente comme une masse protoplasmique uninucléée très mobile et changeant incessamment de forme. Ses dimensions sont comprises généralement entre 25 et 4o p., mais elles peuvent être considérables et atteindre jusqu’à 5o p..

Dans le cytoplasme, on distingue un ectoplasme clair, très homogène, très fortement réfringent, surtout apparent quand le parasite est en mouvement, et un endoplasme sombre, granuleux, plus ou moins vacuolaire, de teinte légèrement jaunâtre ou vert clair, et contenant le noyau, des hématies et des débris cellulaires.

Certains auteurs contestent que l’endoplasme présente parfois une teinte tirant sur le vert. Cette teinte s’observe sur les Entamibes ayant englobé des hématies ; elle est quelquefois très atténuée mais elle est appréciable si on examine par comparaison l’endoplasme d’amibes ne phagocytant pas de globules rouges, comme la plupart des amibes du type Umax.

Mesnil se demande s’il ne s’agit pas d’un pigment analogue à la biliverdine comme il en a observé dans la digestion du sang par les Actinies.

Dans les conditions favorables de température et de milieu, les amibes du type histolytica se font remarquer par la grande activité de leurs mouvements. L’émission des pseudopodes se fait brusquement, presque instantanément en un point quelconque du corps. Quelquefois le prolongement pseudopodique reste purement ectoplasmique et ne tarde pas à se rétracter. D autres fois, il est ensuite rapidement envahi par l’endoplasme qui coule comme une substance en fusion entraînant passivement avec lui le noyau, les hématies et les divers autres corps étrangers qui y sont inclus. Les mouvements du parasite persistent plusieurs heures à la température du laboratoire. Dans scs courtes périodes de repos, l’Amibe prend une forme plus ou moins ovalaire. Le

cytoplasme contient des vacuoles digestives mais pas de vacuole contractile.

Les hématies sont en nombre variable : on peut en compter huit et meme dix; les unes récemment phagocytées sont intactes, les autres englobées depuis un certain temps sont à des degrés

Fig. i3. — Amibe de la dysenterie (Fixation ; sublimé-alcoolo-acctique. Coloration :

hématoxyline ferrique).

a, Forme mobile du type letragena ; b, Amibe binuclééc du type tetragena; c, Forme mobile du tye histolijtica.

d’altération plus ou moins avancés et finissent par disparaître.

Le noyau chez l’Amibe mobile n’est pas toujours facile à distinguer surtout si l’endoplasme est fortement vacuolaire. D’aspect vésiculeux, il mesure en moyenne de 5 à 6 p.. Sur la membrane du noyau, sont appliquées des granulations très réfringentes, de forme irrégulière. Dans l’espace nucléaire, il existe également quelques granules réfringents.

MORPHOLOGIE ET ÉVOLUTION DES ENTAMIBES

2ül

Sur frottis fixés et colorés, le parasite a pris généralement une forme sphérique et, le plus souvent, il n’y a pas de différenciation entre l’ectoplasme et l’endoplasme. Cependant chez quelques individus fixés rapidement et dans de bonnes conditions, au moment de l’émission de pseudopodes, on distingue en certains points de la périphérie, des zones plus claires correspondant à la substance ectoplasmique. Au sein du cytoplasme', de couleur rose ou violette et à structure alvéolaire, on voit des hématies, les unes récemment englobées sont teintées en noir, d’autres plus ou moins digérées se montrent comme des taches grises à contours flous.

Le noyau sphérique, entouré d’une mince membrane, est relativement pauvre en chromatine. Les granules chromatiques, fortement colorés en noir, sont appliqués sur la surface interne de la membrane nucléaire, quelques-uns sont disséminés à l’intérieur du noyau; le caryosome n’est pas toujours perceptible.

Cycle évolutif d'E. dysenteriae. — Nos connaissances sur le cycle évolutif d’ El dysenteriae sont loin d’être complètes et définitives. Nous en donnerons un aperçu d’après les derniers travaux (Viereck, Werner, Hartmann, Elmassian, Prowazek, Chatton, Hartmann et Whitmore, Darling, Mathis et Mercier).

Le fait que le type histolytica s’observe exclusivement dans les selles muco-sanguinolentes des crises aiguës d’amibiase, nous permet d’admettre que ce type n’appartient pas à l’évolution cyclique du parasite. Le type tetragena et les kystes sont les seules formes constantes connues de l’évolution.

C’est sous sa forme tetragena que l’amibe se multiplie dans l’intestin de son hôte.

Cette multiplication se fait par division simple.

i° Division simple d’E. dysenteriae. — Le noyau d’une amibe du type tetragena qui va se diviser perd tout d’aîaord de sa chromaticité. Les blocs chromatiques périphériques accolés à la membrane se résolvent en finsgranules ; le caryosome, au lieu de se colorer en noir intense par l’hématoxyline ferrique, prend une teinte grise et le centriole devient alors visible sous forme d’un petit grain qui a fixé électivement la laque ferrique. Ces aspects du noyau se trouvent facilement dans les préparations ; mais les figures, qui correspondent aux phases suivantes de la division nucléaire, sont d’une excessive rareté, meme dans les selles récemment émises, et doivent être minutieusement recherchées. Nous avons pu cependant en observer, avec L. Mercier, les phases les plus caractéristiques. Tout d’abord le centriole se divise, puis les centrioles-fils s’écartent l’un de l’autre tout en restant unis par un filament controdesmien ; en même temps le noyau, de splié- • ique, devient ovalaire. Aux phases suivantes, le noyau s’al-

longe progressivement et prend la forme d’un fuseau. Les centrioles, occupant les extrémités de la figure fusoriale, sont réunis par quelques fibres achromatiques sur lesquelles sont disposées, en séries longitudinales, de fines granulations chromatiques. Ces grains chromatiques se répartissent entre chacun des deux pôles, où ils se fusionnent et constituent une calotte qui coiffe le centriole. Cette calotte polaire, indice d’une division récente, persiste pendant un certain temps dans chacun des deux noyaux-fils. Peu à peu ceux-ci acquièrent la structure nucléaire du type tetragena, et l’amibe binucléée est constituée.

En résumé, la division du noyau est une mitose s’effectuant sous la membrane nucléaire, c’est-à-dire selon la terminologie proposée par Chalton (1910), une mésomitose. Ce n’est donc pas une amitose comme l’admettait Schaudinn. La description que nous venons de donner de ce phénomène concorde avec celle qu’ena faite Hartmann (1912) et la complète. Mais pas plus que cet auteur nous n’avons pu saisir la bipartition du cytoplasme. Cependant, la présence dans nos préparations de petites amibes dont les noyaux ont les mêmesdimensions que ceux des amibes binucléées ne laisse aucun doute sur la réalité de ce phénomène, qui doit s’accomplir très rapidement.

Contrairement à ce qu’admettent certains auteurs, notamment Werner (1908), nous sommes d’avis que E. dysenteriae au type histolytica a perdu le pouvoir de se multiplier, car malgré l’examen minutieux de nombreuses préparations de selles dysentériques nous n’avons jamais observé chez ce type d’aspects susceptibles d’être interprétés comme se rapportant à une phase de division nucléaire.

La présence, en grand nombre, d’amibes histolytica dans les selles muco-sanguinolentes, s’explique par la transformation d’amibes tetragena en ce type. Celles-ci, en effet, sont toujours présentes dans l’intestin et, en se divisant très activement, elles assurent la pullulation du parasite durant les crises aiguës de dysenterie.

Au cours de recherches que j’ai faites en collaboration avec L. Mercier, nous avons observé uniquement la multiplication par division simple.

C’est également l’amibe du type tetragena qui est le point de départ de l’évolution kystique.

20 Formation des kystes. — Les amibes qui vont se transformer en kystes sont de petite taille. En même temps qu’elles prennent progressivement une forme sphérique, elles subissent des modifications dans leur structure. On voit d’abord se former deux ou trois vacuoles dans le cytoplasme alvéolaire ; tandis que les vacuoles grossissent, de petites granulations d’une substance

MORPHOLOGIE ET ÉVOLUTION DES ENTAMIBES

colorable électivement par la laque ferrique apparaissent à leur périphérie. Ces granulations deviennent de plus en plus nombreuses et augmentent de taille ; puis, tandis que les vacuoles disparaissent, elles se fusionnent en deux ou trois bâtonnets compacts. Pendant l’élaboration de cette substance, d’origine cytoplasmique (i), l’Amibe s’est entourée d’une enveloppe kystique.

Fig. 14. — Formation des kystes tétragènes de l’Amibe dysentérique (Fixation au sublimé-alcoolique-acétique : Coloration : hématoxyline ferrique).

t. Formation de vacuoles dans le cytoplasme ; 2, Constitution des bâtonnets sidérophiles ; 3 et 4, Première division nucléaire ; 5, Stades à deux noyaux ; 6 et 7, Deu xièmes divisions nucléaires; 8 et 9, Kystes tétragènes.

Jusqu’alors, le noyau n’a été le siège d’aucun changement ; il a conservé la structure du type tetragena avec cette différence que la chromatine périphérique, au lieu d’être répartie en gros

(1) On voit que le mot chrorru'dium employé par les auteurs allemands ne saurait être appliqué aux enclaves des kystes de l’Amibe pathogène, pas plus d’ailleurs qu’à celles des kystes de l’Amibe banale du côlon. En effet, Kichard Herlwig a créé le terme chromidies d’où est dérivé celui de chromidium, pour désigner une substance expulsée du noyau dans le cytoplasme. Or, comme nous venons de le voir, et contrairement à ce (m'avaient admis Hartmann (1912) et d’autres auteurs, les bâtonnets sidérophiles d’£. dt/senlttriae, comme les amas sidérophiles que l’on rencontre parfois chez E. coli, ont une origine exclusivement cytoplasmique et ne sont nullement de nature chromidiale.

Il en est, du reste, de même pour d’autres enclaves cytoplasmiques qui existent chez un certain nombre d'Entamibes animales, et GhaLlon étudiant une Entamibe ( Lôschia sp.) d'un singe, avait montré, dès 1912, que chez cette espèce elles prennent naissance au contact de vacuoles cytoplasmiques.

blocs, se présente sous forme de fins granules. Mais à ce moment, il se produit un remaniement de la chromatine qui aboutit à une mitose, avec centrioles, fuseau achromatique, plaque équatoriale, s’effectuant sous la membrane nucléaire. Les deux noyaux-fils conservent pendant quelque temps comme indice d’une division récente une calotte chromatique compacte. Peu à peu, dans chaj y some se constitue et il prend la structure

du type tetragena. Après un certain temps de repos, les noyauxfils se divisent à leur tour par un processus identique. Ainsi se trouve constitué le kyste tétragène. Pendant celte évolution nous n avons jamais constaté, contrairement à ce qu’affirme Hartmann (1912),! expulsion de chromati ne hors du noyau, ni aucune variation quantitative du soi-disant chromidium en rapport avec le degré de maturité du kyste.

Notons qu’exceptionnellement les secondes divisions nucléaires peuvent ne pas être synchrones; ainsi s’explique la présence de kystes à trois noyaux.

Que deviennent les kystes rejetés avec les selles dans le milieu extérieur ?

Protégés parleur membrane d’enveloppe, ils demeurent dans cet état et sans subir de modifications jusqu’au moment où, ingérés parle porteur ou par un autre individu, ils arriveront dans l’intestin pour y continuer leur évolution.

Nous n’avons que peu de renseignements sur la durée de leur vitalité hors de l’organisme.

Darling (1913) ayant conservé des selles contenant des kystes en chambre humide, aurait constaté que dès le 2e jour les kystes étaient devenus rares et qu’après 6 à 10 jours, on ne pouvait plus les reconnaître même sur préparations fixées et colorées. Dans des selles, datant de 24 heures, il aurait noté la disparition des bâtonnets sidérophiles de la plupart des kystes. Il aurait observe, en outre, des mouvements amiboïdes à l’intérieur de certains kystes et il aurait assisté à la sortie de petites amibes. Cette éclosion se produirait encore au cours du 2e et 3e jour, de sorte que le nombre des kystes diminuerait progressivement. D’autre part, avec des selles desséchées et conservées ainsi pendant 7 semaines, on pourrait faire, d’après Darling, des préparations où les formes végétatives et les kystes se retrouveraient et se coloreraient aussi bien que dans des préparations faites avec des selles récemment émises. Toutefois Darling ne réussit pas à infecter de jeunes chats en leur faisant ingérer des matières fécales desséchées depuis plusieurs jours ou conservées pendant 3 jours en chambre humide.

Kuenen et Svvellengrebel (1913), s’appuyant sur ce fait que, soumis à l’action de l’éosine, les kystes vivants restent incolores

MORPHOLOGIE ET ÉVOLUTION DES ENTAMIBES 255

alors que les kystes morts prennent une teinte rose, ont trouvé : i° que des kystes exposés aux rayons solaires mais protégés par une couche d’eau de quelques centimètres de hauteur périssent dans la proportion de 5o pour 100 au bout de 7 heures d’exposition; 20 que des kystes lavés puis placés à l’étuve à 37° étaient tous morts après trois jours; 3° que des kystes mis dans l’eau et conservés à la température de la chambre étaient encore tous vivants après trois jours, que la moitié avaient péri au 4e jour et qu’ils étaient tous morts au i3e jour.

Ujihara (1 g 1 4)> avec des fèces desséchées depuis un mois, aurait réussi à infecter des macaques.

Job et Hirtzmann (1916) ont échoué dans leurs tentatives d’infections de jeunes chats,, en leur faisant ingérer des matières fécales contenant des kystes et diluées dans l’eau depuis 5 jours. Un examen préalable leur avait montré que tous les kystes se laissaient pénétrer par l’éosine.

Wenyon et O’Connor (1917), en utilisant la coloration par l’éosine, ont constaté que les kystes étaient tués instantanément par la dessication, mais que dans l’eau ils pouvaient survivre au delà de 3o jours.

Enfin Penfold, Woodcock et Drew (1917) auraient réussi à déterminer, par l’action du suc pancréatique, l’éclosion de kystes placés depuis 12 jours dans une eau légèrement courante et Chatton (1917), ayant fait ingérer à de jeunes chats des fèces conservées sans précaution pendant 10 jours, aurait observé l’éclosion des kystes dans l’intestin de ces animaux.

En résumé, nous voyons : i° que dans des selles gardées sans précaution les kystes resteraient vivants au moins 10 jours (Chatton); 20 que dans des selles gardées en chambre humide la disparition des kystes serait complète en 5 jours (Darling); 3° que dans des selles diluées dans l’eau, les kystes d’après les uns se-, raient morts au 6e jour (Job et Hirtzmann), au 1 3e jour (Kuenen et Swellengrebel), mais seraient encore vivants d’après les autres au 12e jour (Penfold, Woodcock et Drew) et môme au delà du 3o* (Wenyon et O’Connor) ; 4° enfin alors que Wenyon et O’Connor affirment que la dessication tue très rapidement les kystes, Ujihara aurait réussi à infecter des macaques avec des fèces desséchées depuis un mois. Mais, dans ce dernier cas, on peut se demander si les animaux utilisés dans les expériences n’hébergeaient pas une des entamibes propres aux singes.

En ce qui nous concerne, nous avons eu l’occasion au Tonkin (1914) de faire quelques expériences relatives à la vitalité des kystes. Nous avons constaté que les selles conservées sans précaution se putréfient très rapidement et qu’il devenait alors impossible de retrouver les kystes à l’examen microscopique.

Nous avons, d’autre part, dilué des selles dans une assez grande quantité d’eau physiologique stérile et nous avons fait barboter dans la dilution un courant d’air continu, filtré sur coton. Dans ces conditions, les phénomènes de putréfaction étaient évités, les bactéries diminuaient progressivement de nombre, le mélange s’éclaircissait et au bout d’une semaine il était possible de retrouver des kystes dont la membrane était intacte. Mais à un fort grossissement, on remarquait que le cytoplasme s’était rétracté et que les noyaux étaient groupés en un amas. Il n’est pas douteux pour nous que les kystes étaient altérés et avaient perdu leur vitalité.

Si en présence de ces résultats assez divergents, il est difficile d’être fixé sur la durée exacte de la vitalité des kystes hors de

I organisme, on peut toutefois affirmer que, même sous la forme enkystée, l’Amibe dysentérique ne tarde pas à périr dans le milieu extérieur.

3° Formes de dégénérescence. — Mais à côlé de ces aspects que nous venons de décrire, et qui correspondent à des phases différentes de l’évolution, on rencontre fréquemment des formes de dégénérescence qui ont souvent retenu l’attention des auteurs et ont été l’objet d’interprétations variées.

C’est ainsi que les processus de bourgeonnement simple et multiple décrits par Schaudinn (1903) chez E. histolytica et aboutissant à la formation de kystes de 3 à 7 p, de diamètre ne sont que des phénomènes de dégénérescence. En effet, pour faire ses observations, Schaudinn examinait ce que devenaient les amibes dans les selles muco-sanguinolentes conservées à l’étuve.

II rencontra ainsi des aspects très variés qu’il n’hésita pas à rattacher les uns aux autres pour en faire des stades d’un mode particulier de multiplication du parasite. Constatant la présence d’individus dont le noyau offrait tous les degrés de résolution depuis une simple fragmentation jusqu’à l’émiettement complet en fines granulations chromatiques éparses dans le cytoplasme, il conclut qu’il s’agissait d’un état chromidial du noyau, notion alors très répandue en Allemagne. S’appuyantensuite sur d’autres aspects, il imagina une formation de kystes exogènes par individualisation d’une petite quantité de cytoplasme périphérique autour de chromidies. Craig (1908) et Hartmann (1910) prétendirent tout d’abord avoir revu ce mode de .multiplication par bourgeonnement exogène, mais les recherches ultérieures d’Hartmann (1912), de Darling (1913), de Craig ( r 9 r 3) et de James (1914) prouvèrent finalement que les faits avancés par Schaudinn reposaient sur l’observation de formes de dégénérescence et sur des erreurs d’interprétation.

Même dans les selles examinées aussitôt après leur émission

MORPHOLOGIE ET ÉVOLUTION DES ENTAMIBES

il n’est pas rare d’observer des amibes dont les noyaux ont subi les memes phénomènes de caryolyse, pouvant éveiller l’idée d’un état chromidial. C’est sans doute en se basant sur de telles images que tout récemment Job et Hirlzrriann (1916) ont décrit chez E. histolytica un mode de schizogonie tout à fait spécial qui de ni a n der a i t co n fir r n a t i o n .

Certaines images ont même été interprétées comme représentant des phénomènes de sexualité et de reproduction. Des aspects de noyaux de formes prékystiques rappelant soit un bourgeonnement, soit une émission de chromatine, ont été considérés comme correspondant à une phase de réduction nucléaire. On n’a même pas hésité à décrire des phénomènes comparables à l’émission des globules polaires lors de la maturation de l’œuf.

Certaines amibes binucléées présententparfois un dimorphisme nucléaire résultant de l’altération de l’un des noyaux. Cet aspect correspondrait pour certains auteurs à un phénomène de réduction, pour d’autres, au stade suivant, la conjugaison cytogamique de deux amibes.

Enfin les idées nouvelles relatives au dualisme de la substance nucléaire et au rôle trophogénérateur du noyau des protistes ont conduit également des auteurs à rechercher des aspects susceptibles d’être interprétés comme se rapportant à des phénomènes de sexualité. En ce qui concerne E. dysenteriae , Hartmann (1908- I9°9)> etl particulier, s’est fait, pendant un certain temps, le protagoniste de cette conception et, d’après lui, la reproduction de ce protozoaire aurait consisté en un phénomène d’autogamie s’effectuant de la façon suivante : Le noyau de l’amibe parvenue au stade prékystique expulse dans le cytoplasme des chromidies et se divise en deux noyaux sexués qui copulent. Puis l’amibe s enkyste et le noyau de copulation se divisant deux fois donne les 4 noyaux du kyste. Mais Dobell (1908-1909) ayant nié l’existence de 1 autogamie chez E. rancir uni et Mercier (1910), ayant mis en évidence l’existence d’un processus sexué hétérogamique chez A. blattae, Hartmann (1912) a abandonné peu à peu ses idées touchantl autogamie chez E . dysenteriae ; il admet en particulier que les figures qu’il a données comme représentant la copulation des deux noyaux 11e sont que des aspects de dégénérescence.

!\" Absence de schizogonie chez E. dysenteriae. — Nous croyons être en droit de nier l’existence de phénomènes schizogoniques chez A. dysenteriae, car pas plus qu’Harlmaun ( 191 2) nous n avons observé chez cette amibe la présence île formes mobiles à plus de deux noyaux.

Lependant de très rares auteurs: Werner (1908), Darling D91.)), James (1914)0111, représenté des amibes mobiles à quatre noyaux. Par analogie avec ce que nous savons d’A’. culi, de telles

Iraitb de pathologie exotique.

formes étaient susceptibles d’être considérées cpm me desschizontes. Mais aucune des figures ou des descriptions qui ont été données ne nous a convaincus qu’il s’agissait d’amibes multinucléées. En effet, Werner ne donne qu’un mauvais dessin et se contente de signaler d’un mot la présence d’un élément quadrinucléé chez un sujet infecté par E . dysenteriae au type telragena. Darling dit avoir observé dans des selles et dans le pus d’un abcès amibien du foie des amibes à quatre noyaux*qu’il considère comme des schizontes. Il aurait même vu, dans une préparation de selle, une amibe dont le noyau se serait divisé sur place en quatre petits noyaux-fils. A notre avis, dans les figures données par Darling, il est difficile de reconnaître la structure des noyaux d’Entamibes. D’autre part, le mode de division du noyau sur place, qu’il indique, rappelle le processus de division multiple admis par Schaudinn pour E . coli, mais contesté avec raison, selon nous, par Hartmann et Whitmore. Aussi nous semble-t-il nécessaire d’attendre la confirmation des observations de Darling avant d’accepter sa manière de voir.

James a représenté une amibe à quatre noyaux qu’il considère comme semblable aux formes vues par Darling. Mais il ne se prononce pas sur sa nature exacte et il fait remarquer qu il est difficile de dire s’il s’agit d’un schizonte ou d’un kyste. Pour nous, en raison de la disposition des noyau* accolés les uns aux autres et de la présence de nombreuses masses sideropliiles dans le cytoplasme, nous avons l’impression qu’il s agit d un élément en voie de dégénérescence.

Ainsi chez E. dysenteriae aucun auteur n’a donné d’image représentant indiscutablement une amibe à plus de quatre noyaux. Pour expliquer la pullulation du parasite lors de certaines crises de dysenterie, il n’est nullement besoin, comme 1 on fait certains auteurs, d’invoquer une schizogonie, la division simple suffisant à assurer la multiplication intense de l’Amibe.

Hypothèse sur le cycle évolutif d ïj. dysenteriae. L’évolution d’if, dysenteriae n’est donc connue que d’une façon incomplète, et l’examen des selles fraîchement émises, comme des coupes d’organes, se montre insuffisant à nous révéler toutes les phases du cycle évolutif. On a donc cherché à combler les lacunes par l’observation des amibes libres ou enkystées dans les selles émises depuis un temps plus ou moins long, par la culture de l’amibe, et par l’infection expérimentale. Mais aucune de ces tentatives n’a fourni de données nouvelles sur I évolution du

parasite.

Il nous paraît cependant possible, dans l’état actuel de nos connaissances, d’émettre une hypothèse et d’indiquer comment on peut essayer de la vérifier.

MORPHOLOGIE ET EVOLUTION DES ENTAMIBES 250

En prenant comme point de départ les kystes, il semble

/si

•îj

► rj

que le cycle, évolutif d’L. dysentenae doit s’accomplir de lafaçon suivante :

Lorsque des kystes sont ingérés par un individu sain, ils

Schéma du cycle évolutif de l’Amibe dysentérique.

donnent naissance chacun à quatre amibes formées par individualisation d’une petite masse de cytoplasme autour de chacun des noyaux. La mise en liberté de ces amibes doit se produire dans la région initiale de l’intestin grêle.

Les recherches d’Ujihara ( i g 1 4) ont montré, en effet, que la membrane des kystes résiste à l’action du suc gastrique alors qu’elle est dissoute au contact de la trypsine et de la bile. Nous pouvons supposer, par analogie avec ce qui existe chez E . blattae , que les amibes issues des kystes copuleht deux à deux pour donner naissance à une amibe qui va augmenter de taille et prendre les caractères du type tetragena. Les kystes d ’E .dyserileriae seraient donc, selon nous, des kystes gamogoniques.

Parvenue à ce stade, l’amibe se multiplie par division simple un certain nombre de fois. Après quelque temps de cette vie végétative, certaines formes mobiles s’enkystent. Dans les kystes, le noyau subit deux bipartitions successives qui aboutissent à la formation des quatre noyaux. Les kystes mûrs, bien que morphologiquement identiques, sont-ils de sexualité différente? Un même kyste contient-il des amibes toutes du même sexe? Autant de questions auxquelles il est impossible de répondre actuellement.

Les kystes, expulsés avec les excréments, périssent rapidement s’ils sont abandonnés dans le milieu extérieur. Au contraire, s ils sont ingérés par le porteur ou par un nouvel hôte, ils seront le point de départ d’un nouveau cycle.

Mais si, au cours de l’évolution que nous venons de résumer, les conditions dans lesquelles se trouve l’Amibe dysentérique viennent à changer, si notamment la muqueuse intestinale devient le siège d’une altération minime, amenant une hémorragie même légère, un certain nombre d’amibes évolueront vers la forme histolytica. Cette transformation d’un type dans l’autre paraît due principalement au changement de nourriture. Le parasite qui, normalement, së nourrissait de bactéries ou de sucs intestinaux, est devenu hématophage et a acquis par suite un pouvoir nécrosant. Tant que les conditions ne se modifieront pas, un nombre plus ou moins grand de parasites, en raison de leur hémalophagie, prendront les caractères de la forme histolytica. Mais dès que le milieu intestinal sera redevenu normal, cette transformation d’un type dans l’autre ne se produira plus, les amibes histolytica n’ayant pas le pouvoir de se multiplier disparaîtront progressivement et il ne subsistera que des amibes du type telragena. Celles-ci ne sont donc point, comme l’affirment certains auteurs, des formes histolytica modifiées; elles dérivent d’amibes du même type. L’Amibe pathogène, sous son type telragena, e, si en effet, toujours présente dans l’intestin, même dans les crises aiguës de dysenterie.

morphologie et évolution des entamibes

Si, en effet, l’examen microscopique porte simultanément surdos mucosités sanguinolentes et sur des selles de nature fécale émises en pleine crise, on constate la prépondérance des formes histulutica dans les glaires sanguinolentes, alors que les formes tetragena existent seules dans les matières purement fécales.

Le schéma ci-contre représente le cycle évolutif &’E. dysenteriae tel que nous le concevons. Nous voyons que dans ce cycle il reste à mettre en évidence les stades correspondant à la mise en liberté des petites amibes hors des kystes et à leur copulation. Comme ces phénomènes se passent dans la première portion de l’intestin grêle, il ne saurait être question de les étudier chez l’Homme et il est donc de toute nécessité de recourir à l’infection expérimentale chez les animaux.

Le Chat, qui constitue l’animal de choix pour la reproduction de la dysenterie expérimentale, ne paraît pas convenir pour ce genre de recherches car il semble bien que son tube digestif ne se prête pas cà l’évolution normale du parasite dysentérique. Darling ( r 9 1 3), Sellards et Baetjer (iqi4) ont bien soutenu que, chez cet animal, Entamoeba dysenteriae produisait des kystes tétragènes,mais Swellengrebel et Schiess (1916) sont d’un avis opposé. Ils ont pratiqué de nombreux passages de chat à chat et ils ont constaté que l’amibe continuait à se multiplier uniquement sous les formes végétatives sans jamais donner lieu à des kystes.

A notre avis, les Singes se prêteraient mieux à ces expériences, en raison tout d’abord de leur parenté zoologique avec l’Homme et surtout du fait qu’ils hébergent des entamibes spécifiques, très voisines de celles de l’intestin humain. Nous avons en effet décrit (191 3), sous le nom d ’E. legeri et d E. duboscqi, deux amibes ressemblant, l’une à E. coli, l’autre à E. dysenteriae. Ce fait autorise donc à penser que, chez les Singes, E . dyseateriàe pourra prendre toulcsles formes normales de son évolution. La possibilité, d’autre part, de sacrifier les animaux, permettra de rechercher les stades du parasite dans toute l’étendue’ du tube digestif et de compléter l’étude du cycle évolutif de l’Entamibe de la dysenterie.

TT. — Amibe banale du côlon E. coli (Lôscb) emend. Schaudinn 1903

Morphologie d ’£. coli.

1° Forme mobile. — L’Amibe du côlon sous sa forme végétative ressemble beaucoup i\ l’Amibe delà dysenterie au type tetragena. A létal, vivant, elle se présente sous l’aspect d’une masse ronde ou ovalaire, à structure plus ou moins granuleuse, sans différenciation nettement marquée entre l’ectoplasme et l’endoplusme.

2f>2 MATHIS - L’AGENT PATHOGÈNE DE L’AMIBIASE HUMAINE

Elle sc meut toujours assez lentement. Cette paresse dans les mouvements permet de la distinguer d ' E . dysenteriae sous son type his toi y t ica mais la rapproche de la même Entamibe sous son type tetragena. Elle englobe surtout des bactéries, des levures et même d’après Wenyon et O’Connor (1917) des kystes d ’Entamoeba dysenteriae et de Lamblia. Pour certains auteurs, l’Amibe banale du côlon serait susceptible de phagocyter parfois

Fig- ,5. Formes mobiles et kystes de l’Amibe banale du côlon (Fixation : sublimcalcoolo-acctiquc ; Coloration : hématoxyline ferrique).

n, Forme végétative d ’ Entamoeba coli\ b , Amibe banale du côlon à a noyaux ; c, Kyste gamogoniquë à 8 noyaux d ’E.cnli; d. Kyste schizogonique à iô noyaux d'E. coli; e, Kyste vacuolaire à 2 noyaux d'E. coli.

des hématies en petit nombre. Nous n’avons jamais constaté, pour notre part, cette hématophagie. Wenyon et O’Connor (19 17), de leur côté, n’ont jamais observé, sous le microscope, l’englobement. d’hématies par E. coli. Ils ont fait, en outre, remarquer que dans les selles muco-sanguinolentes de dysentériques bacillaires où il existe, en même temps, des amibes du côlon, celles-ci ne contiennent pas de globules rouges.

Les dimensions, très variables suivant les individus sont coin-

MORPHOLOGIE ET ÉVOLUTION DES ENT AMIBES

prises entre io et f\0 \j. ; mais les formes les plus nombreuses mesurent de 20 à 3o p,. Le noyau de 5 h 9 [a de diamètre est toujours très visible à l’état vivant ; il est d’aspect clair et renferme quelques granules réfringents, les uns collés à la membrane, les autres situés dans l’espace nucléaire.

De la position du noyau chez les deux Entamibes, on a voulu faire un caractère différentiel. On a dit que le noyau est situé excentriquement chez l’Amibe banale. En réalité, le noyau suit passivement les courants endoplasmiques pendant la progression du parasite, il est donc, tantôt au centre, lantôten un point plus ou moins rapproché de la périphérie.

Sur préparations fixées et colorées, seule la structure dunoyau présente quelques particularités à signaler. Le caryosome, entouré d’une petite zone claire, occupe le plus souvent une position excentrique comme chez E. mûris et chez E . legeri.

De même que chez l’Amibe de la dysenterie, lorsque la différenciation par l’alun de fer est suffisamment poussée, le caryosome décoloré laisse apparaître le centriole. Dans l'espace nucléaire, occupé par un réseau à larges mailles, il peut exister, indépendamment du caryosome, quelques fins granules chromatiques, mais on ne voit jamais, entourant le caryosome, l’anneau que l’on observe généralement chez E. dysenteriae du type tetragena.

20 Forme mobile multinucléée. — Ces formes multinucléées ou schizontes n’ont été observées que très rarement dans les selles des sujets parasités par E . coh. Ce sont des éléments de forme généralement ovalaire, parfois à contour irrégulier et mesurant de r4 à 28 [a de long sur i3 à 20 [a de large. Leur cytoplasme, à structure nettement alvéolaire, renferme de grandes vacuoles contenant fréquemment des bactéries. Les noyaux, en nombre variable, possèdent la structure caractéristique du type colit t sont souvent de tailles inégales.

3° Les kystes. — Les kystes d ’E. coli se présentent sous des aspects encore plus variés que ceux d ’E. dysenteriae. En outre des kystes gamogoniques, il existe chez l’Amibe banale du côlon des kystes d’un autre type : kystes schizogoniques en rapport avec un mode de multiplication qui manque chez l’Amibe pathogène.