L. c. Nous avons vu que ces nuleurs Qxent nu Flemming

TRYPANOSOMES ET THYP A NOSOMIASES

6Sl mûr au bout de 3 à 0 mois. Ou laisse 1/2 heure à 2 heures dans ce mélange. On lave; on colore au bleu de méthylène polychrome; on lave; on différencie an tannin orange; on passe par les alcools; par l'huile d'aniline, on fait virer la couleur du rouge au bleu pourpre. Xylène; baume.

Minchin, qui a employé la méthode propremenl dite d'Heidenhain, conseille de longs séjours dans le mordant comme dans le colorant.

Méthode de Twovl '. — On fait une combinaison de rouge neutre et de vert lumière; on recueille le précipité, qu'on dessèche et qu'on redissoul dans l'alcool méthylique additionné de 5 p. 100 de glycérine. Pour l'emploi, mélanger 2 parties de celle solution avec 1 d'eau distillée, différencier par l'éther-glycérine d'Unna à 2 p. 100 dans l'eau. Là encore, il faut appliquer la méthode sur des préparations fixées aux mélanges où entre le sublimé, donl le liquide de Mann (sublimé picrique). Par cette méthode, on a des préparations où les contrastes manquent un peu; elles ne sont pas « à montrer», mais elles accusent quantité de nuances délicates. Nous avons déjà dit qu'elle permet, par exemple, de montre] la différence de constitution du flagelle el de la cuticule qu'elle colore en vert, de celle des noyaux qu'elle teint en rouge.

Toutes ces méthodes, dites cytologiques. donnent des résultats concordants. Elles niellent en particulier en évidence la structure vésiculaire des 2 noyaux, qui renferment chacun un gros caryosome central, structure que la coloration au Romanowsky, sur préparations desséchées, faisait méconnaître.

Frottis épais. — Quand les trypanosomes sont rares dans le sang, on a conseillé de faire des couches épaisses de sang dont on enlève ensuite toute l'hémoglobine2.

Dans la méthode de Ross3, la couche épaisse de sang, après dessiccation, esl colorée, par un des procédés que nous avons indiqués, sans se préoccuper de sa fixation. Les colorants en solution aqueuse dissolvent l'hémoglobine en même temps qu'ils colorent les leucocytes el les parasites. Naturellement, le procédé est surtout recommandable pour le sang de Mammifères.

Dans ces conditions d'emploi, on a souvent décollement de la couche de sang et de plus les trypanosomes sont très déformés el difficiles parfois à reconnaître. Ruge* a conseillé de fixer le sang, avant de l'aire agir les colorants, par une solution de formol du commerce à 2 p. 100 à laquelle on ajoute un demi à 1 p. 100 d'acide