NO RS LS A ANS NE RER RSS
RM AUIOLINENER SE Eee LL gtts.XX MILIEU 3/c:
NASA CREER RAS Cu à 100,0
Cholestérimens 72... A dr in Te 2 1,0
ÉUMOUOLNERESSEE ee. gtts.X X MICIEUSS/d:
NO AL CR RE ie. 100,0
PhOLES ÉLIRE NE nd nu et ee 1,0
PDT ONE RE or gtts.XX
pH — 6,6 — 6,8
EDS
En ce qui concerne les Milieux 2/a — 2/d, nous avons tyndallisé la lécithine et la cholestérine à part pendant une heure et trois jours consécutifs. On les ajoute aseptiquement aux milieux.
En préparant les Milieux 3/a — 3/d, on triture la cholestérine avec l’huile d'olive, puis on tyndallise de la façon indiquée ci-dessus et on ajoute le tout aseptiquement au milieu. Les Milieux 3/a — 3/d sont liquides et ne contiennent, par conséquent, pas de gélose.
Nous exprimons dans le tableau 8 les résultats de cette série.
Ensemencé |10]j.115]j.| 20j. | 25j. | 35j. | 45j. 1/a Se See 1/b en Nr 1/6 Eee ne 1/4 Ro ne Re ner
| | k Ÿ S 2/a +++) JÉTER LEE) ete ler 2/b ne nt en tn ee 2/c Den en 2/d | = = = = Le 3/a Be ein +++) +44) +++ 3/b . se ES JON NE) +: S'SSSR 8/d 1< PRE ER + & a
Interprétation:
Il est surprenant que l'association des trois acides aminés les plus actifs donne des résultats inférieurs à ceux obtenus sur les Milieux Q/3 et Q/4 contenant de l’Acide glutamique seul. Les Milieux 1/b, 1/c, 1/4 donnent ceperdant des résultats supérieurs à ceux obtenus sur le milieu tyrosiné seul (Milieu D/o) et celui renfermant de la Leucine seule Milieux P/3 et P/j#).
Les Milieux 2/a et 2/b fournissent des cultures remarquables, mais toujours inférieures à celles des Milieux Q/3 et Q/4. Le Milieu 3/a contenant de l’huile d’olive et de la cholestérine ne produit que des cultures médiocres.
Les Milieux 2/c, 2/d, 3/b, 3/c, 3/d semblent être restés stériles. |
Ces résultats nous engagent à modifier la teneur des éléments azotés. Nous maintenons l’emploi de mêmes éléments.
Les milieux préparés sont les suivants:
MILIEU 4/a:
Milteuesynthéetiquetvilr::,:......4. 100,0 RÉ UC A en nn nue «pee ue 0,2 AGE SIUTAMUQUE LG one 0,3 TR SNOR PR PPT Re 0,2 MILIEU 4/b:
Milensevnthétiquentie "tr... 100,0 PORC Re RAT Rd ee 0,4 AVE et EE CE CORP 0,6 SOS IRON de du à ee bee 0,2 MILIEU 5/a:
NT AR ARR en 100,0 HOSTILE en DL Len ele à 0,5 RÉ CL One ne ein. ma ae 0,5 MILIEU 5/b:
NE URL DR R E anrte à 100,0 CHOIESLELINe Re nt. 0,5 CCE M 0, Lin 0,5 MILIEU 6/a:
Nireuaesyntinétiques [TZ 1.5.7. 100,0 ÉUCNOR RR nn oee don MAN 0,2 Peer ILIAMIqUe 0: near e 0,3 TON TT ER SR RENE ee 0,04 CHOC SLÉRIMOT EL Ur PM NME ae ee 0,5 LITE SOIN OR A CET RES, APE gtts.XX
sans gélose
MILIEU 6/b:
Milieu synthétique Il me 100,0 LenCinE Te ER EE 0,4 Acide: Sl0tamique PRE 0,6 TyrOosMéÉLE ES ASC AMEN RER 0,04 Cholestérine ER RS SR PERRET Re 0,5 Huile «d'ohversseeeReveen gtts.XX
sans gélose MIFIEUS/772a;:
Milieu 6/a + gélose MILIEU 7/b:
Milieu 6/b + gélose
Nous exprimons les résultats dans le tableau ci-dessous.
Ensemencé LOT 12074690 NN 4/a AN AURAS SE AN En 4/b SIN 2 RU SR Etes 5/a + +4) +4) +44) + de ne ou 6/a DR DR ee 6/b + RER EN ee - ++) ter 7 /a NV 1 7 ++) +44 7/D ANS pen rae
Interprétation:
Le meilleur développement se manifeste dans les Milieux 7/a et 7/b. T’emploi de la lécithine — sa stérilisation ayant été faite avec de grandes précautions — ne semble pas donner un rendement supérieur, fait déjà démontré par DESCOURAUX.
À l'observation rigoureuse on ne peut constater qu’une différence minime entre les cultures des Milieux 7/a, 7/b et 5/4 307:
Ale
De l’ensemble de ces recherches, nous nous croyons en droit de tirer la conclusion suivante: L'emploi de la lécithine, de la cholestérine et de l’huile d'olive n’est pas justifié et la préparation de ces milieux exigerait un travail compliqué, superflu et inutile.
Pour finir les essais de ce chapitre, nous nous sommes encore adressé au Milieu Q ne contenant que l’Acide glutamique seul comme aliment azoté et se montrant le meilleur milieu synthétique. Nous avons ajouté en même temps les trois vitamines qui avaient favorisé la croissance de notre Dermatophyte; ce sont: l’Acide folique, le Pantothénate de calcium et la Nicotylamide.
Le milieu ainsi établi a la composition suivante:
Phosphate monopotassique
Chlorure de. caleiums 7. .:...
Sulfate de magnésie ...........
Silicate dé poftasse 7: .2:.5x GICOSCR PC RE = PNCIUCRE LL AMIE EP ae ACHIOMTOLOUE EL Cr rte Pantothénate de calcium ......
NICOLA IdéS RS vec ere PATES ULIÉCRRRPA PR Er OISE Lee M EEE
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Résultats.
Les résultats sont satisfaisants et comparables à ceux obtenus sur les milieux de SaBourAUD. Les cultures commencent à pousser au bout de sept à neuf jours et se développent d’une façon luxuriante au cours d’un mois.
Pour contrôler l’exactitude de cette thèse, nous avons jugé nécessaire d'effectuer des essais quantitatifs de comparaison. Nous avons donc préparé des cultures de Trichophyton crateriforme d’une part sur milieu de SABOURAUD glucosé liquide et d’autre part sur notre milieu synthétique d’optimum cultural.
Les cultures ont été placées à 24° dans des conditions culturales toujours identiques. L’ensemencement a été pratiqué au moyen d’une émulsion homogénisée avec un nombre de germes quantitativement pareil. Le dosage des cultures a été effectué gravimétriquement en arrêtant par un cc. de formol le développement le 5°, 7°, 8°, 14°, 25°, 35° jour. Nous avons alors filtré les cultures à travers des filtres pondéraux préalablement tarés. Le mycélium qu’on récolte sur le filtre a été séché à l’étuve à 65°, puis transmis dans l’exsiccateur à l’Anhydride phosphorique jusqu’à poids constant.
PRO ee
Nous donnons dans le tableau suivant les résultats comparatifs ainsi obtenus sur les deux milieux. Les chiffres indiqués sont le résultat moyen calculé de cinq expériences ainsi pratiquées.
EP O RR RERSIS . : : 3
semencé | Me | VE Pre E 14 j. 25 j. 35 j.
[Milieu | |
Sabouraud | + +! 0,0024 | 0,0060 ! 0,0233 | 0,0295
| | Milieu | synthétique . “a 0,0015 | 0,0102 | 0,0365 | 0,0380