ADSORPTION SUR PHOSPHATE DE CALCIUM SUIVIE D'ÉLUTION

En étudiant la courbe d’adsorption des phages sur un précipité de phosphate de calcium, R. WaHz, P. GRABAR et L. BLUM-EMERIQUE [26] ont remarqué que l’adsorption des phages sur les précipités de phosphate de calcium dépendait du pH. L’étude de cette courbe d’adsorption est à la base de la méthode que nous avons étudiée avec R. WauL [34].

Courbe d'adsorption des phages. — Les lysats sont préparés selon la technique habituelle puis centrifugés pour éliminer les grosses impuretés et les débris microbiens. Si nous prenons à ce moment les pH de différents lysats, nous constatons qu’ils sont souvent très variables. Les milieux utilisés étant identiques, nous devons soupçonner l'influence des souches bactériennes et du nombre de germes qui ont

poussé avant d’être lysés. Le milieu que nous utilisons

contient environ 20 g. p. 1.000 de phosphates; le précipité

de phosphate de calcium est formé en ajoutant au lysat une solution stérile de CaCL, à 4 p. 100. Pour faire l’étude de l’adsorption, nous avons procédé de la façon suivante : 200 cm d’un même Iysat ont été divisés en dix portions de 20 em. Nous avons ajouté à chaque échantillon de Iysat des quantités croissantes de la solution de CaClL,, soit 0,5 cm, 1 cm’, 1,5 cm° jusqu’à 5 cm* pour 20. Après agitation, les flacons sont placés à la glacière pendant quinze minutes puis centrifugés. On décante ensuite le liquide surnageant, on ne prend le pH et on effectue un titrage de phages. Nous avons effectué un assez grand nombre d’expériences de ce type; nous allons donner ici les résultats de deux d’entre elles et voir quelle est la loi de l’adsorption.

1° Expérience faite avec 200 cm* de phage D 4/2 Titre initial : 3 X 105 par cm:.' pH initial: : 7,45.

Chaque essai est pratiqué sur 20 cm de lysat.

CaCL, xp Titre

No à 4 p. 100 du surnageant du surnageant (en cm‘)

1 0,5 127,10 UAEPGEUE 2 Jin 7,03 5 Re CN À à à 15 6,89 SEX CT 4 2 6,65 Sale 5) VAR) 6,16 ECHO 6 3 6,10 211 X 10° 7 0 »,93 ‘4,5 X 105 8 4 0 3,6 X 10° 9 4,5 9:99 DASALO!

2° Expérience faite avec 200 cm° de phage D 4/1 : Titre initial : 4,5 X 105 par cm:.

pH initial : 6,91.

Chaque essai est pratiqué sur 20 em° de lysat,

CaCI, pH Titre N°° à 4 p. 100 du surnageant du surnageant (en cm“) 1 0,5 6,80 4,5 X 105 2 1 6,58 4,5 X 10 3 ho 6,48 4,5 X 10° 4 6,36 4,5 X 105 5 AS 6,18 8 X 105 6 ro 6,13 0 7 3 Ms) 5,96 3,9 X 105 8 4 5,79 1,8 X 10° 9 4,5 5,61 6 X 10:

Nous voyons que, jusqu’à pH 6,3 à 6,4, l’adsorption est pratiquement nulle, et tous les phages restent dans le liquide surnageant. L’adsorption de 99 % des phages a lieu entre pH 6,3 et 6, et continue pour devenir presque totale aux environs de pH 54; on a vérifié, d’ailleurs, qu’à ce pH il n’y à pas, en plus de l’adsorption, de destruction des phages.