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RÉCHERCHES HISTOLOGIQUES

1° Première série d'expériences : foie adulte.

Nous avons tout d’abord voulu chercher à établir quelles seraient les lésions produites par les rayons X sur le foie d’un animal adulte, et s’il y aurait quelques différences dans ces lésions en employant des doses de radiations sensiblement doubles, tout en gardant les mêmes conditions électriques.

Nous avons pris pour cela deux lapins adultes dont nous avons exposé une moitié du foie. L’un a eu six séances d’exposition de dix minutes chacune, soit une heure d'irradiation; l’autre, douze séances de la même durée, soit deux heures d'exposition. Les rayons ont été les mêmes comme intensité et comme pénétration. Nous précisons ces données comme suit :

EXPÉRIENCE n°9 I. — Lapin adulte, six séances d'irradiation de dix minutes chacune, à trois par semaine. Distance de l’anticathode : 15 centimètres. Rayons n° 6 du radiochromomètre de Benoist. Intensité au secondaire, 1 "mA,

EXPÉRIENCE n° II. — Lapin adulte, du même âge que le précédent. Douze séances d’exposition de dix minutes chaque, à trois par semaine. Même ampoule radiogène que pour l’expérience n° 1, placée à 15 centimètres. Rayon n° 6. Intensité au secondaire, 14,

Nos deux animaux ont été sacrifiés tous les deux un mois après la dernière exposition.

Résultats.— Nous ne cacherons pas que l'importance des résultats obtenus par la rôntgenisation du foie adulte n’a pas été en rapport avec le nombre et l’intensité des irradiations, puisque la dose la moindre que nous ayons employée dans ces expériences a été de six séances de dix minutes : nous sommes

HUDELLET, 2

noue

loin d’avoir obtenu des résultats aussi positifs que ceux auxquels sont arrivés MM. Bergonié et Tribondeau, qui ont pu déterminer l’aspermatogénèse du testicule chez des rats blancs en une seule séance de vingt-cinq minutes. Mais nous croyons pouvoir en donner une explication très rationnelle (voir chapitre IT).

A l’autopsie, nous n'avons relevé chez aucun de nos deux lapins d’altérations macroscopiques du foie; pas d’adhérences avec les organes voisins, pas de différence de coloration bien nette entre les côtés exposés et non exposés ; le foie de l’expérience n° I était un peu plus jaunâtre du côté irradié; mais, disons-le tout de suite, cette différence d’aspect n’a correspondu à rien au point de vue histologique.

Immédiatement après l’autopsie, nous avons prélevé pour chacun des organes en expérience quelques parcelles du tissu (côtés exposé el non exposé) que nous avons fixées de différentes façons. Les unes l’ont été simplement à l’alcool fort, puis colorées, après inclusion à la paraffine, par l’hémalun-éosine, pour étudier l'architecture du tissu; d’autres, par le mélange de Tellyesniezki, et colorées à l’hématoxyline ferrique; par la liqueur forte de Flemming et colorées au rouge magenta picro-indigo carmin et à la safranine -gentiane orange, afin de rechercher les altérations cytologiques.

Pour ces deux premières expériences, nous avions irradié nos deux animaux en faisant varier la dose de rayons X du simple au double : nous avons trouvé si peu de chose par notre examen que nous n’avons pas pu établir une différence bien nette entre les deux expériences : aussi engloberonsnous en une seule description le peu de troubles cellulaires constatés.

Nous n'avons d’abord trouvé aucun trouble dans l’architecture du foie; les lobules sont normaux, notamment dans les dimensions, les travées cellulaires régulièrement disposées autour des veines centrales. À un plus fort grossissement, on constate que les espaces portes 6t les éléments histologiques qu'ils contiennent ne sont pas altérés, ainsi que la capsule de Glisson, qui ne nous à paru aucunement épaissie; de même

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les cellules glandulaires gardent leur volume et leurs contours polygonaux nets; les noyaux ont conservé leur forme et leur colorabilité. Mais on remarque cependant que du côté exposé le protoplasma des cellules est plus liquide et moins riche en granulations ; le réticulum cytoplasmique est plus lâche et plus apparent, il limite des mailles claires plus larges que du côté non exposé. «

Et c’est tout ce que nous avons relevé au point de vue histologique. C’est peu si l’on compare les résultats qu’a obtenus Thies par l’action directe et prolongée du radium sur le foie du lapin. (On voit les capillaires gorgés de sang; les trabécules des lobules hépatiques n’ont plus leur disposition normale; les cellules elles-mêmes, de polygonales sont devenues rondes ou ovales; leurs noyaux se colorent mal; ensuite les cellules se détruisent, et autour du foyer de nécrose apparaît le tissu conjonctif(:). »

Nous croyons cependant, avec Seldin(:), qu'avec plus de rayons et de temps on doive arriver à produire des lésions au niveau du foie adulte. Mais nous avons voulu nous tenir dans nos expériences à des doses voisines de celles employées en radiothérapie.

2° Deuxième série d'expériences : foie jeune.

N'ayant trouvé que fort peu de chose par l’examen du foie adulte après rôntgenisation, — ce qui concordait assez avec les recherches de Seldin, — nous avons cherché s’il en serait de même en agissant sur des animaux encore en évolution.

Aussi cette deuxième série d'expériences a eu lieu sur quatre lapins de la même portée, âgés de un mois, ayant vécu dans les mêmes conditions, et dont l’un d'eux a été gardé comme témoin. Nous nous sommes attaché, en plus, à conserver les mêmes données expérimentales, sauf pour ce qui est de la pénétration des radiations.

@) Tres. — L'action des rayons du radium sur divers tissus et organes (Mitthei-

lung aus dem Grensgebiete der Medizin und Chirurgie, 1905, t. XIV). (2) Loco citato.

nn —

En effet, partant de cette idée admise généralement que les rayons X n’ont d’action qu’au point où ils sont absorbés, notre expérimentation a été méthodiquement poursuivie en soumettant le foie à l’action de radiations de pénétration différente, mais dont la dose a été toujours sensiblement la même.

Nous avons commencé à irradier nos trois lapins à un mois d'âge et nous avons continué pendant deux mois et demi, alors qu’ils étaient en pleine période d'évolution ; le nombre des séances a été de vingt, une tous les trois jours environ. Nous allons résumer pour chaque expérience toutes ces données en les complétant :

EXPÉRIENCE N° III. — Lapin jeune (un mois), exposé à des rayons de faible pénétration. Vingt séances d'irradiation. Intensité au secondaire, de 0,9 à 1mmA, Rayons « mous », marquant 3 ou 4 au radiochromomètre de Benoist, avec un tube donnant une étincelle équivalente de 2 à 3 centimètres. Durée des expositions, dix minutes.

EXPÉRIENCE N° IV. — Lapin de la même portée, exposé à des rayons « moyens ». Vingt séances de dix minutes. Intensité au secondaire, de 0,9 de milliampère. Rayons moyens, n° 6 ou 7 de l’échelle chromométrique de Benoist, avec une étincelle équivalente de 6 centimètres.

EXPÉRIENCE N° V. — Lapin de la même portée, exposé à des rayons très pénétrants. Pour cette expérience, nous avons cherché à supprimer, pour la moitié de la zone irradiée, les rayons mous qui peuvent se produire avec une ampoule même «dure», en plaçant sur notre tube limitsteur un demi-disque d'aluminium de 0"",6 d’épaisseur. Vingt séances d'exposition d’une durée de dix minutes. Intensité au secondaire, 0,8 de milliampère. Rayons «durs », du n° 12 du radiochromornètre, avec 12 à 14 centimètres d’étincelle.

En résumé, pour ces trois expériences, même quantité de radiations, mais qualité différente, dans le but de voir si à des rayons de diverses pénétrations correspondraient des lésions différentes.

Ces trois lapins, ainsi que l’animal témoin, ont été sacrifiés trois jours après la dernière exposition, temps suffisant pour permettre aux lésions possibles d'évoluer, et plusieurs parcelles de leur foie — parties exposées et non exposées — fixées comme pour nos expériences I et II.

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Résultats. — Notre but avait été, dans cette série d’expériences, de chercher à la fois l’action des rayons de Rüntgen sur le foie d'animaux en développement, et en même temps l’action de radiations de pénétrations différentes.

Ce dernier point de vue a été assez intéressant à étudier, non seulement à propos des radiodermites produites, mais même au point de vue de l’action sur le foie. Pour les radiodermites nous avons constaté ce fait, qui est du reste assez bien connu en radiologie, qu’elles étaient d'autant plus intenses que les rayons employés étaient moins pénétrants. Ainsi, notre lapin n° III présentait une véritable escharification des téguments; le lapin n° IV, de la chute des poils, avec simplement de la vésication; le n° V, seulement de la chute des poils, et cela uniquement dans la zone irradiée directement; dans la zone protégée par la lame d’aluminium, la peau était absolument saine.

Quant à l’action sur le tissu hépatique, les expériences TITI et V ont été à peu près négatives, ce qui s'explique assez bien: les rayons très mous ont été presque tous absorbés par la peau, d’où l'intensité de la radiodermite constatée; les rayons très durs ont traversé tout l’animal sans provoquer de réaction très notable.

Les résultats les plus positifs ont été obtenus avec les rayons de pénétration moyenne. À un faible grossissement, on remarque du côté exposé un certain tassement des cellules hépatiques : dans quelques lobules on ne peut reconstituer que très difficilement les travées cellulaires. Il nous a paru tout de suite que la coupe des lobules offrait moins de surface du côté exposé que du côté non exposé. Nous avons cherché à mesurer cette surface, après avoir dessiné quelques lobules à la chambre claire, et nous avons trouvé très nettement que cette surface était moindre d’un tiers environ du côté exposé.

A un plus fort grossissement, nous avons retrouvé les mêmes troubles cellulaires que sur le foie adulte, mais plus accentués, protoplasma plus vacuolaire, cellules contenant plus d'eau et moins de granulations. Mais, en plus, dans les parties superficielles du foie le plus directement soumises aux

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rayons X, nous avons remarqué de nombreux groupes de cellules dont les éléments avaient leurs limites effacées, comme effritées : nous retrouverons cette lésion avec beaucoup plus d'intensité chez le foie du nouveau-né.

Les noyaux, que nous avions trouvés normaux dans le foie adulte, sont là moins colorés du côté exposé, les grains de chromatine moins nets.

Nous avons dessiné à la chambre claire des parties de lobules, pour nous rendre compte de la dimension des éléments qui les constituent : comme pour la surface lobulaire, nous avons constaté que la largeur des travées cellulaires et des espaces intertrabéculaires était diminuée de un tiers du côté exposé. [1 y avait donc là un certain degré d’atrophie du foie.

Tout cela, nous l’avons constaté sur le foie de notre expérience n° IV (rayons moyens). Pour les expériences n° IT et V, où nous avions employé des rayons mous et durs, nous n'avons guère remarqué que les mêmes troubles cellulaires moins prononcés, la même différence de colorabilité du noyau. Mais quant à la dimension des lobules et des travées, elle ne nous à pas paru diminuée, au moins dans la grande majorité des cas.

En résumé, entre ces trois expériences, qui ne diffèrent que par la qualité des rayons, c’est l'expérience n° IV qui nous a donné le plus de résultats, lesquels sont plus positifs que ceux obtenus dans nos précédentes expériences sur le foie adulte.

3" Expérience n° VI: foie de nouveau-né.

Nous avions fait nos deux premières séries d’expériences sur des lapins adultes, ou au moins arrivés déjà assez loin dans leur évolution. Notre expérience n° VI a été faite dans le but d'étudier l’action des rayons X sur le foie d’un animal pris à une période de son développement aussi peu avancée que possible.

Pour cela, nous avons choisi le chat nouveau-né, cet animal offrant suffisamment de résistance à cette période de sa vie, surtout en le laissant à sa mère en dehors des expositions. Nous avons donc pris un chat

dont nous avons exposé le foie régulièrement tous les deux jours, à

partir du troisième jour de sa naissance. Le nombre des irradiations a

été de 9, d’une durée de dix minutes chacune, soit en tout une heure et demie,

Les rayons X employés marquaient 5 ou 6 au radiochromomètre de Benoist, et l’ampoule radiogène, dont la résistance intérieure mesurée au spintermètre était égale à 5 centimètres d’étincelle, était traversée par un courant d’une intensité qui a varié entre 1mmA4 et 4 mmA4,

Nous avions sacrifié un chat de la même portée le jour de la première exposition; nous en avons sacrifié un autre le même jour que le chat exposé, trois semaines après la dernière irradiation : nous avons pu ainsi nous rendre compte assez exactement de ce qu'était notre tissu hépatique avant les expositions, et de ce qu’il aurait été si on l'avait laissé évoluer normalement. Nous n’avons pas pu, ici, vu la petitesse de l’animal en expérience, faire ce que nous avions fait pour nos premières recherches, c’est-à-dire n’exposer qu’une zone du foie : mais nous croyons que ‘la comparaison des foies de deux chats de la même portée, ayant vécu dans les mêmes conditions, nous donne, — faute de mieux, — comme contrôle, une garantie d’exactitude suffisante.

Résultats. — Nous avions négligé de donner les caractères histologiques du foie normal chez le lapin : sa structure en est tellement classique que nous n’avons pas cru utile de le faire. Le foie du chat nouveau-né offre des caractères un peu spéciaux, analogues à ceux décrits par Nattan-Larrier(:) chez l’homme et les rongeurs nouveau-nés, sauf pour la graisse, qui n'existait pour ainsi dire pas chez nos chats.

À un faible grossissement, on remarque un aspect vacuolaire du foie; de loin en loin, on distingue des espaces portes; mais on dirait qu’il n’existe pas de capillaires rayonnés, qu'il n’y a pas de systématisation des cellules; les veines centrales du lobule sont elles-mêmes peu apparentes.

À un fort grossissement, les cellules apparaissent globuleuses, leurs parties périphériques sont si condensées et elles

(1) NATTAN-LARRIER. — La graisse, le glycogène et l’activité cellulaires du foie du nouveau-né (C. R. de la Soc. de Biol., 1908, p. 835).

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sont, d'autre part, tellement tassées les unes contre les autres qu’elles semblent posséder une membrane limitante très nette. Par contre, leur contenu est très clair, creusé de cavités anguleuses, irrégulières, communiquant les unes avec les autres; le réseau protoplasmique qui les sépare est très évident et très coloré, mais grêle et peu riche en granulations protoplasmiques : cet aspect s’explique par les colorations à la gomme iodée, qui montrent les cellules couvertes de flaques de glycogène.

Après certaines colorations (hématoxyline-safranine), on distingue bien les globules rouges, ce qui permet de reconnaître les capillaires, très petits, écrasés par les cellules globuleuses. Le foie du chat de la même portée, sacrifié le premier jour des irradiations, offrait les mêmes caractères.

Quant au foie du chat exposé, il différait du tout au tout. Nous décrirons d’abord le parenchyme de la glande tel qu’il est devenu sous l’action des rayons X, puis les zones superficielles du foie qui étaient le plus directement influencées, celles-ci présentant des lésions très particulières.

Dans le parenchyme profond, à un faible grossissement, on distingue d'emblée les travées (fig. 5); néanmoins elles ne sont pas orientées par rapport aux veines centrales ; pas d’aspect rayonné; leur disposition est irrégulière, comme disloquée. Dans les parties où la disposition trabéculaire persiste, on remarque des espaces clairs, assez larges, séparant les cellules (capillaires). A l'immersion, on voit que les cellules glandulaires ont leur aspect polygonal ordinaire : leur protoplasma, au lieu d’être clair et creusé de cavités, comme chez l'animal témoin, est granuleux et homogène, et ces granulations sont si nombreuses que le réseau protoplasmique n’est pas visible.

Parsemés au milieu du tissu glandulaire, on remarque quelques grosses cellules claires, creusées de cavités arrondies qui sont des cellules hépatiques ayant subi la dégénérescence graisseuse, comme nous nous en sommes rendu compte après fixation au Flemming.

Les noyaux ont à peu près les mêmes dimensions que sur

Fic. 4.

FOIE NORMAL (chat à un mois).

{Stiasnie, -obj. 1/12, oc. 1.

Hématoxyline ferrique.)

Les cellules glandulaires sont globuleuses, tassées les unes conire les autres.

Leur protoplasme est très vacuolaire.

Elles restent semblables à elles-mêmes jusqu'à la capsule de Glisson.

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