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Genèse de la thrombine.

Des deux méthodes employées, simple observation morphologique,expérimentation physiologique, cette dernière a été, et de beaucoup la plus fertile. Elle a permis, non seulement d'établir de façon rigou— reuse des relations de cause à effet, mais également de séparer par une véritable dissection physiologique les différents constituants de la thrombine.

Le rôle respectif des globules et du plasma ne peut être aisément étudié qu'en retardant suffisamment la coagulation pour permettre la séparation de ces deux composants du sang sans les altérer. Les procédés les plus habituellement employés sont l’abaissement de la température aux environs de 0° C. et la décalcification.

Rôle du calcium.

« La découverte d’Arthus et Pagès eut une influence décisive : l'ion calcique est nécessaire à la coagulation. L’addition au sang au sortir de l'artère de sels décalcifiants tel l’oxalate sodique (L ou 2 p. 1.000), de fluorure sodique, de citrate sodique, enlève au sang le pouvoir de se coaguler spontanément, mais la recalcification ultérieure (Ca Cl?) restitue au sang et généralement aussi au plasma qu'on en a séparé par centrifugation, l’aptitude à se prendre en masse par ses propres moyens » (Bordet).

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En réalité, les sels de calcium ne sont indispensables qu’à l'élaboration de la thrombine, et, celleci une fois formée, peut coaguler le fibrinogène

même en l’absence de sel calcique.

Rôle des plaquettes.

Hayem (1878), observant la coagulation au micros: cope entre lame et lamelle, remarqua l’agglutination des plaquettes, puis leur altération coïncidant avec l'apparition des filaments de fibrine, les plaquettes servant de point de départ à ces filaments,

Le même auteur (1882) en battant du sang avec une baguette en verre, vit les plaquettes se coller à la surface de cet objet immédiatement avant que se déposent les premières couches de fibrine concrète.

Delezenne a montré que le sang des oiseaux, dépourvu de plaquettes. ne se coagule qu'avec une extrême lenteur si l’on a soin de pratiquer la saignée à l'abri des sucs tissulaires,

Hayem et Barrier (1883), laissant se sédimenter pendant de nombreuses heures et à la température de la glace fondante les éléments figurés du sang contenu dans une jugulaire de cheval excisée entre deux ligatures, démontrèrent que les plasmas se coagulent d'autant plus vite qu'ils contiennent plus de plaquettes en suspension.

« Mais les expériences devaient devenir beaucoup

plus faciles et plus précises quand on recourut aux

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sangs rendus incoagulables par addition de citrates ou d'oxalates » (Pagniez).

« Les cellules sanguines, et notamment les plaquettes, éléments pourtant fort délicats, se conservent bien en milieu oxalaté, comme l’ont montré divers auteurs, notamment Pringle et l'ait, Aynaud. On peut donc présumer que les plasmas en question séparés par une énergique centrifugation, ne se sont guère chargés des principes propres aux éléments cellulaires et qui, normalement, y restent confinés. Chez les mammifères tel le lapin, la légéreté remarquable des plaquettes, signalée par Mosen en 1893, permet de les isoler aisément : on centrifuge tout d’abord le sang oxalaté à vitesse modérée, on décante le plasma surnageant trouble qui ne contient plus que des plaquettes, dont on peut ensuite provoquer la sédimentation grâce à une centrifugation cette fois très énergique et prolongée ; le dépôt peut naturellement être lavé ensuite à la solution

physiologique légèrement oxalatée » (Bordet).

LA COAGULABILITE D'UN PLASMA EST D'AUTANT PLUS GRANDE QUE SA TENEUR EN PLAQUETTES EST PLUS ÉLEVÉE D’après Bordet et Delange (1911), après recalei fication, du plasma oxalaté modérément centrifugé, contenant donc encore de très nombreuses plaquettes mais quasi totalement privé d'hématies et de leucocytes, se prend en masse beaucoup plus vite qu'un

plasma identique mais énergiquement centrifugé,

PCT

c'est-à-dire privé de ses plaquettes autant qu'il se peut. L'addition, à ce dernier plasma, de plaquettes en accélère considérablement la coagulation.

« Les plaquettes sont si légères, qu'il est pratiquement impossible de les éliminer toutes par centrifugation. En filtrant du plasma oxalaté de lapin à travers une bougie poreuse, qui arrêteles plaquettes ou leurs débris, Cramer et Pringle obtiennent un plasma quasi incoagulable par recalcification. Mais ce plasma recalcifié coagule par addition de plaquettes ». Bordet. |

Le Sourd et Pagniez(1907) par addition de plaquettes, à du liquide d'hydrocèle, en accéière la coagulation. De même Nolf (1908) pour les solutions

pures de fibrinogwène.