LôuLein, Ann. Institut Pasteur, 1905, vol. XXII, p

3. La difficulté d'obtenir la phagocytose des microbes virulents est un fait connu de longue date. Établi par Metchnikoff, il a été

Or, on ne peut, nous l'avons dit, se servir comme milieu de phagocytose du sérum même dont on recherche le pouvoir opsonique : pouvoir leuco-activant et pouvoir opsonisant pouvant, suivant les cas, s'ajouter ou s’annuler, et, dans les deux cas, donner lieu à des causes d'erreur graves. On pourrait supposer qu'en se servant comme milieu phagocytaire d’un sérum humain normal on constaterait des différences d'intensité entre la phagocytose après opsonisation par l’immum-sérum et la phagocytose après opsonisation par le sérum-témoin. En réalité, il n’en est rien. Les différences, quand elles existent, sont insignifiantes et insuffisantes à justifier un avis, encore moins un diagnostic ferme. Le pouvoir leuco-activant du sérum humain normal a ici complètement masqué l’opsonisation préalable par le sérum spécifique.

Prenons comme exemple l'expérience du chien préparé que nous avons relatée plus haut.

Dans l'expérience telle que nous l’avons exécutée, à Savoir :

1° Opsonisation à 2 gouttes pour 10 pendant un premier quart d'heure,

2° Phagocytose d’une goutte de mélange opsonisé (une heure dans le sérum artificiel citraté) ; le pouvoir opsonisant répondant au rapport:

revu depuis par: Marcnanb, Arch. méd. expérimentale, mars 1898, n° 2; HekTOEN, Proceed of the New York path. soc., 1906, vol. VI; Levanrri et INmManw, C. R. Soc. Biol., 1907, vol. LXII, p. 869 ; Borper, Recherches sur la phagocytose. Ann. Instilul Pasteur, 1896, p. 105.

Phagocytose des levures opsonisées par le sérum préparé Phagocytose des levures opsonisées par le sérum neuf

était de — 5, chiffre, on le voit, considérable.

0,1 Si dans le deuxième temps (phagocytose) on remplaçait le sérum artificiel citraté par un sérum. normal de chien, dans les conditions ordinaires des expériences d'activité, le rapport:

Phagocytose des levures opsonisées par le sérum préparé Phagocytose des levures opsonisées par le sérum neuf

tombait à 1,3.

L'opsonisation préalable était donc totalement masquée par le pouvoir leuco-activant du sérum normal, servant de milieu phagocytaire.

Pour tourner la difficulté, 1l fallait done avoir un milieu suflisamment favorable pour permettre la phagocytose des microbes pathogènes et pas assez pour que l’opsonisation soit dissimulée par le pouvoir leucoactivant.

Après de longs tâtonnements, nous avons constaté que le milieu formé d’un mélange à parties égales de sérum de cheval (pratiquement sérum antidiphtérique) ct de sérum artificiel citraté, réalisait les meilleures conditions pour une pareille expérience.

Le sérum de cheval est en effet fort peu leucoaclivant (0,19 à 0,29); 1l permet toutefois une légère phagocytose des microbes pathogènes les plus ordinairement étudiés, tels que le bacille d'Eberth et le pneumocoque.

Après opsonisation par un sérum immunisant, qu'il s'agisse d’un immum-sérum obtenu artificiellement par injections successives, ou du sérum d’un malade à l’état d'infection encore, cette phagocytose devient des plus nettes. Il est donc aisé de mettre en lumière par ce procédé les propriétés opsonisantes d’un sérum. |

Nous avons appliqué cette technique à la recherche du pouvoir opsonisant dans la fièvre typhoïde, dans la pneumonie, la tuberculose et les infections expérimentales paratyphiques et éberthiennes'. Avant d'exposer nos résultats, nous donnerons la technique de notre procédé général de recherche et les quelques modifications qu'il est utile de lui apporter dans chaque cas particulier.

1° Technique générale. — Larecherche comprend deux temps :

1° Opsonisation ;

2° Phagocytose.

Opsonisalion. — Dans deux tubes identiques, on met 10 gouttes d’une même émulsion microbienne. Dans le premier de ces tubes on ajoute 2 gouttes du sérum supposé opsonisant, dans le deuxième > gouttes d’un sérum témoin, on brasse et on porte à l’étuve à 37° pendant un temps variant de un quart d'heure à une demi-heure.

Phagocylose. — On prépare alors le mélange suivant dans deux pipettes identiques (les plus pratiques sont