Taylor, Lancet

vol. LXXII, p. 357 et 1905, vol. LXXI.V, p. 147.

6. Bohme, Méthode opsonique et sa valeur ^Rechercaes sur la). Û€ uL Arch - fùr klin. Med., 1909.

‘•Weinstein, Berl. klin. Wochens., 1906, n® 3.

Tant les cas, supérieur, égal ou inférieur à la normale.

Il semble a priori difficile de déduire de ce phénomène un élément quelconque de diagnostic. Aussi nombre d’auteurs avec Charles-E. Simon 1 , Petit et Breton 2 , dénient à l’index opsonique toute spécificité ou bien, avec Mae Farland, ne lui reconnaissent qu’une spécificité atténuée. D’autres enfin, avec Bohnie 3 contestent la valeur de toute la méthode.

II est cependant hors de doute qu’il existe dans les immum-sérums des substances spécifiques agissant sur le microbe pour en favoriser la phagocytose.

Bien avant que Wright ait fait de l’importance de ces substances la base de sa conception de l’immunité, Denys et Leelef 4 avaient démontré leur existence.

Mettant des streptocoques en présence, d’une part de sérum d’animaux immunisés, de l’autre de sérum d’animaux neufs, ils virent que lés premiers étaient phagocytés de façon bien plus complète et bien plus rapide.

Après Wright, Lohlein 5 ,Neufeld et Rimpau 6 ,Héktoen

I. Charles et Simon, Reprint form lhe Journ. of exper. Med., «déc. (906.

3- t-OHLEiN, Ann. Institut Pasteur, (905, Toi. XXII, p. 6«. 6- Xeufeld et Rimpau, Deul. mei. Wochens., (904, p. «58.

laisse là phagocytose se faire pendant une demi-heure.

Dans ces conditions, il ne saurait être question de pouvoir leuco-activant du sérum, puisque le milieu dans lequel se fait la phagocytose n’en contient presque pas (i/5 dé goutté).

Or, lorsque après étalement et coloration, on numère les levures ingérées par les leucocytes, d’une part, dans la pipette contenant les levures opsonisées par l’immum-sérum, de l'autre dans la pipette témoin, on constate que la phagocytose est manifeste dans la première et nulle dans la seconde.

Cette expérience et les expériences antérieures de Neufeld démontrent que l’immum-sérum détermine des modifications microbiennes durables, rendantlemicrobe plus phagocytable. En d’autres termes, non seulement

Partant de ces idées théoriques : possibilité de dation des opsonines, impossibilité de fixer le pouvoir leuco^-activant, il semble à priori facile de les isoler l’un de l’autre. Il devrait suffire de diviser l’expérience en deux temps :

i° Un temps d’opsonisation, où le microbe subirait

pouvoir leuco-activant du sérum humain normal a ici complètement masqué l’opsonisation préalable par le sérum spécifique.

Prenons comme exemple l’expérience du chien préparé que nous avons relatée plus haut.

Dans l’expérience telle que nous l’avons exécutée, à

1° Opsonisation à 2 gouttes pour 10 pendant un premier quart d’heure ,

2 0 Phagocytose d’une goutte de mélange opsonisé (une heure dans le sérum artificiel citraté) ; le pouvoir opsonisant répondant au rapport :

revu depuis par : Marchand, Arck. méd. expérimentale, mars 1898, f - • Hektoen, Proceed of lhe New York palh. soc., 1906, vol. VI ; tsvADm et Inmann, C. R. Soc. Biol-, 1907, vol. LXII, p. 869 ; Bor- DET ' Recherches sur la phagocytose. Ann. Inslüal Pasteur, 1896,

le premier de ces tubés on ajoute 2 gouttes du sérum supposé opsonisant, dans le deuxième 2 gouttes d’un sérum témoin, on brasse et on porte à l’étuve à 3/ pendant un temps variant de un quart d’heure à une demi-heure.

Phagocytose. — On prépare alors le mélange suivant dans deux pipettes identiques (les plus pratiques sont

sera une culture sur bouillon vieille de 2 à 4 jours; l'opsonisation durera un quart d’heure ; on mettra 2 gouttes de l’émulsion opsonisée dans chaque pipette de phagocytose; la phagocytose durera une demi-

Pour le bacille paratyphique, on se servira également d’une culture sur bouillon vieille de 2 à 4 jours; l’opsonisation durera un quart d’heure ; on mèttra t goutte d’émulsion opsonisée dans chaque tube de phagocytose; la phagocytose durera un quart d’heure.

Pour le pneumocoque, on se servira d’une culture ancienne sur bouillon ; l’opsonisation durera une demiheure ; on mettra 2 gouttes de l’émulsion opsonisée dans chaque tube de phagocytose; la phagocytose durera un quart d’heure.

Pour le bacille tuberculeux, on se servira d’une culture de bacille homogène d’Arloing et Courmont. L’opsonisation durera une demi-heure ; on mettra 1 goutte d’émulsion opsonisée dans chaque tube de phagocytose ; la phagocytose durera une demi-heure.

Voici dans ces conditions les résultats que nous avons obtenus :

Fièvre typhoïde.

Oas- »■ — R... Malade parvenu à la convalescence d'une fièvre typhoïde régulière avec taches rosées, splénomégalie, diarrhée. Agglutination positive au 5o".

neuses et ulcérées à la fin de l’iléon. Cœur flasque et décoloré,

Pouvoir opsonisant la veille de la mort. ... 9 Le pouvoir leuco-activant le même jour était de. 0,4

Obs. 8 . — R..., 23 ans. Fièvre typhoïde grave. Taches rosées, diarrhée fétide incoercible, adynamie profonde, grosse rate, hémorragie nasale, mort 2 jours après son entrée (12 e jour).

Obs. 9. — P..., entrée au i5 e jour de sa maladie, en pleine sécrétion lactée (enfant de 4 mois). Taches rosées, grosse rate, stupeur. Pas d’agglutination le jour de l’examen, plus tard, agglutination tardive au 5o e .

Le lait n’a pas présenté de pouvoir opsonisant, non plus d’ailleurs que de pouvoir agglutinant.

Obs. 10. — B..., 19 ans, ajusteur, parvenu au 3o e jour d’une fièvre typhoïde classique avec grasse rate, diarrhée, taches rosées. Fausse défervescence quelques jours auparavant, puis recrudescence et température à 39°,5 au moment de l’examen. Agglutination positive au 5o e .

Tous ces malades ont été examinés en même temps que de nombreux sérums témoins. Ceux-ci, appartenaient, la plupart à des sujets normaux, deux à des méningites tuberculeuses, un à une pneumonie, un der-

nier, à un malade atteint de talalgie blennorragique. 7 Dans tous ces cas lé pouvoir opsonisant n’a jamais dépassé sensiblement la normale. Le chiffre le plus fort que nous ayons observé appartenait à l’un des deux cas de méningite tuberculeuse. 11 était de i.3o. ; ÿ

En résumé, nous avons observé d’une façon sensiblement constante au cours de la fièvre typhoïde, un pouvoir opsonisant très supérieur à la normale variant entre 3,5 et 9. La seule exception que nous ayons constatée a trait à un malade parvenu au cinquième jour de sa maladie et dont le sérum était encore dépourvu de pouvoir agglutinant. II y a donc, ainsi que nous le verrons à propos des faits expérimentaux, parallélisme relatif entre la propriété opsonisante et la propriété agglutinante.

Cette élévation du pouvoir opsonisant ne présente aucun rapport avec les variations du pouvoir Ieucoactivant. Dans les deux cas de fièvre typhoïde grave par nous observés, le pouvoir leuco-aetivant était inférieur à la normale, tandis que le pouvoir opsonisant était manifestement supérieur (9 et 3,9). Bien plus, dans le cas rapidement mortel de S... (obs. 7), nous avons pu observer la veille de la mort par syncope un pouvoir opsonisant de 9 associé à un pouvoir leuco-activant dà 0,4. Il n’y a donc entre les deux propriétés sériques, la spécifique et la non-spécifique, aucune sorte de parallélisme.

Enfin, le pouvoir opsonisant ne présente aucune espèce de valeur pronostique. Il était très élevé dans les deux cas rapidement mortels que nous avons étu-

Courmont, recherché chez les tuberculeux les variations du pouvoir opsonisant.

Nous avons examiné ainsi une vingtaine de malades représentant les divers stades de la tuberculose pulmonaire à marche lente.

Dans aucun de ces cas et malgré que nous ayons essayé les techniques les plus diverses, employant successivement comme milieu de phagocytose le sérum artificiel citraté, le sérum artificiel ordinaire, le sérum de cheval,Ieliquide d’ascite, nous n’avons observéd’élévation ou de diminution notable du pouvoir opsoni-

Dans tous les cas, l’on observait une phagocytose très marquée du bacille de Koch, mais il était impossible de déceler une différence nette entre les lames du malade et celles du témoin.

Il ne semble donc pas qu’il y ait dans la tuberculose pulmonaire banale de modifications quelconques en plus ou en- moins des propriétés opsonisantes du sérum. L’on sait d’ailleurs combien il est difficile, par les diverses méthodes aujourd’hui en usage, de déceler dans le sérum des tuberculeux des anticorps spécifiques vis-à-vis du bacille de Koch '.

Infections expérimentales.

Nous avons enfin déterminé chez l’animal des infections expérimentales à l’aide du bacille d’Eberth et du bacille paratyphique. Nous avons pu ainsi suivre parallèlement le développement dans le sérum des animaux en expérience des propriétés opsonisantes et agglutinantes spécifiques.

Nous verrons que le développement de ces propriétés s’est faite de façon progressive et très sensiblement parallèle pour l’une comme pour l’autre.

Le i3 novembre, on inocule deux chiens. Le premier, gris à poils ras, reçoit sous la peau 2 centimètres cubes ; d’une culture sur bouillon du bacille d’Eberth âgé de 4 24 heures. Le deuxième, épagneul noir et blanc, reçoit dans les mêmes conditionsa centimètres cubes de bacille paratyphique en culture sur bouillon âgé de 2.4 heures. L’échantillon inoculé provient de l’un des deux premiers cas de fièvre paratyphoïde étudiés autrefoisipar MM. Achard et Bensaude et qui depuis ont été identifiés par Conradi au bacille paratyphique B. Un troisième animal est conservé comme témoin.

A dater de ce jour les inoculations sont répétées dê>| deux en deux jours et l’agglutination, ainsi que le pouvoir opsonisant, suivis de façon méthodique. Voici d’ailleurs le bilan de l’expérience.

Cette expénence nous p e de points importants.

Tout d’abord, le pouvoi loppe de façon précoce ent marqué dès le deu

interpréter cette exception aux expériences antérieures de Wright et d’Hektoen.

Si nous superposons maintenant les faits cliniques aux faits expérimentaux, nous voyons que l’ensemble de nos résultats est extrêmement concordant, et permet, nous semble-t-il, de déduire un certain nombre de notions générales.

Tout d’abord il existe bien indépendamment des propriétés non spécifiques des leucocytes et du sérum, des propriétés spécifiques répondant à la définition générale que Wright 1 a donnée des opsonines, agissant sur le microbe pour en favoriser la phagocytose, comme dans le phénomène de Denys et Leclef (de Louvain) 2 .

Ces propriétés se développent d’une manière progressive, comme il est aisé de le constater par l’expérimentation. Nous n’avons pas, dans nos expériences, observé de phase négative contrairement à ce qu’ont vu les auteurs, qui,après Wright 3 et Hektoen 4 ,ont étudié lés infections expérimentales. La raison nous en paraît simple.

Dans le procédé de Wright, propriétés spécifiques et propriétés non spécifiques agissent de concert, si bien qu’il est impossible de faire le départ entre ce qui revient aux unes et ce qui revient aux autres.

Or, si nous résumons en un sehéma l’évolution des

Joum -P’W-'lpalh.g é n.,

diverses propriétés leucocytaires étudiées par nos procédés, nous voyons :

Que tandis que les propriétés leucocytaires (activité leucocytaire et pouvoir leuco-activant') s’abaissentde façon brutale dès le début et pendant toute la période d’état pour ne remonter qu’à la phase critique du mal, le pouvoir opsonisant, par contre, s’élève progressire-

Dans un premier stade, par conséquent, l’abaissée ? ment considérable des propriétés non spécifiquesannulera et au delà l’apparition des propriétés opsonisantes spécifiques, encore insuffisamment dévelop ;;

Le résultat sera donc dans la méthode de Wright un index opsonique abaissé.

Dans un deuxième stade les deux propriétés, là spécifique et la non-spécifique, l’un de signe négatif, l’autre de signe positif, tendent à s’annuler ; et alors, selon que l’on aura affaire à des infections déterminant ou ne déterminant pas une forte réaction immunisante, on observera un index inférieur ou un index supérieur à la normale.

C’est ainsi que dans la tuberculose banale et chronique, il est, nous l’avons vu, à peu près impossibl e de mettre en lumière des propriétés opsonisantes duj sérum, — et comme le pouvoir leuco-activant et l’actkj vité leucocytaire sont généralement inférieurs à la normale, — l’index sera presque constamment abaissé. J

Dans certains cas cependant à la suite d’une pous- | sée aiguë, les propriétés leucocytaires remontent; &|!

dans les infections à forte réaction îm Sque, telle que la fièvre typhoïde, l’ap iriétés opsonisantes spécifiques annul sement des propriétés non spécifiques issus dë la normale (Milhit, Hektoen it abaissement des propriétés non spé sur la phagocytose globale (produ

l’occasion d’une perforation intestinale De même Lew 2 étudiant les variations de l’indice

opsonique au cours de l’appendicite et de la salpingite en se servant du streptocoque et du coli, a vu l’indice s’abaisser au cas de péritonite et rester très bas si la

i. Milhit, Hektoen, loc. cil.

~ Réaction hémolytique deBordet et recherche des opsonines en chirurgie. Th. de Paris, déc. 1909.

péritonite était mortelle. Cette chute relève de la chute des propriétés leucocytaires non spécifiques et parti* culièrement du pouvoir leuco-activant du sérum. :;iÆ

Dans les eas où le pouvoir opsonisant élevé l’emporte sur les propriétés leucocytaires diminuées, la phase positive de Wright se trouve correspondre à la période d’état de la maladie. A cette période, par contre; les propriétés non spécifiques sont inférieures à la normale et partant de signe négatif.

C’est cette opposition qui permet de comprendre les résultats en apparence contradictoires observés par les

Une fois dissociées au contraire les propriétés leucocytaires prennent chacune leur valeur propre et leur J évolution spéciale.

Les propriétés non spécifiques (activité leucocytaire et pouvoir leuco-activant du sérum) se superposent étroitement à l’évolution delà maladie. Elles ont donc une valeur pronostique considérable [mais pas de valeur diagnostique. Les propriétés spécifiques (opsonisation) montent progressivement quelle que soit l'évolution du mal. Elles n’ont pas de valeur pronostique; j mais possèdent une valeur diagnostique réelle comme l’avait déjà montré Milhit’ à propos de la fièvre typhoïde.

En résumé :

L’on peut par une technique spéciale isoler les propriétés non spécifiques et les propriétés spécifiques ; opsonisantes du sérum.

Une fois isolées, ces dernières sont constamment de signe positif.

Elles présentent une réelle valeur diagnostique tout an moins dans la pneumonie et dans la fièvre typhoïde.

Nous n’avons pas réussi à les mettre en lumière au cours de la tuberculose pulmonaire chronique, ce qui cadre bien avec ce que l’on sait de la faiblesse et de l’irrégularité des réactions immunisantes au cours de cette affection.

nous essayons de concevoir l’ensemble des réactions de l’organisme au cours des infections, réaction® la fois cellulaires et humorales, — nous voyons qu’il en existe deux grandes classes au point de vue spécial de la phagocytose.

1“ Réactions non spécifiques appartenant d’une part aux leucocytes (activité leucocytaire), et de l’autre aux humeurs (pouvoir leuco-activant du sérum).

2” Réactions spécifiques. Les unes dues à l’élément humoral sont depuis longtemps indiscutablement établies. Le pouvoir opsonisant en constitue simplement? l’expression en ce qui concerne la phagocytose. Il est ainsi superposable à tout l’ensemble des lysines.

Les autres dues aux leucocytes sont moins complu tement connues, bien que Metchnikoff 1 et ses élèves se soient attachés à en démontrer l’existence.