K IV DÉCOLORATION DE LA PRÉPARATION

Nous avons étudié complètement l'aspect que présente dans les cas ordinaires une préparation de pus blennorrhagique frais traité par le neutralroth.

Si l’on vient à poursuivre l'observation on voit que peu à peu l'aspect de la préparation se modifie.

De 4 à 6 heures après montage de la préparation on constate que la proportion des leucocytes à noyaux colorés (10 pour 100 au début de l'expérience) a sensiblement augmenté. Le noyau de ces. leucocytes est devenu apparent et a pris une coloration jaune.

Le nombre des leucocytes dont le noyau se colore, cesse bientôt d'augmenter et si l’on examine la préparation au bout de 24 heures, surtout si l’on s’est servi d'un sérum très faible, toute trace de coloration a disparu. Les leucocytes sont à ce moment granuleux, leurs noyaux se distinguent nettement par une réfringence spéciale.

Cette décoloration s’observe un peu plus tardivement quand le sérum employé est plus chargé en rouge neutre : en tous cas, au bout de 48 heures la préparation est généralement absolument incolore.

Nous voyons que, dans une première phase de l'observation, les leucocytes sont actifs, émettent des pseudopodes, différencient, autour des éléments qu'ils ont phagocytés, des vacuoles à secrétion acide quifixent le rouge neutre et le révèlent pour ainsi dire, en vertu des affinités chimiques signalées plus haut.

Dansune deuxième phase, les mouvements diminuent, la vitalité du leucocyte s’atténue, la sécrétion acide cesse dans les vacuoles et la coloration disparaît : le leucocyte est mort.

Cette méthode a-t-elle un côté pratique ? Nous le croyons et, nous avons été souvent frappé de la facilité qu'elle présente pour la recherche des gonocoques.

Il faut une certaine habileté pour réussir à faire convenablement une préparation de pus blennorrhagique sec. C’est la coloration, l'étalement, la fixation qui peuvent être défectueuses. Nombre de cellules sont écrasées au cours de l’étalement, et les gonocoques répandus entre les leucocytes.

La méthode de l'examen dans le sérum évite ces manipulations multipliées, elle est aussi simple, aussi rapide que l'examen du pus sec.

La lame cellule n’est même pas absolument nécessaire : une simple lame porte-objet ordinaire peut suffire. La goutte de sérum est recouverte d’une lamelle maintenue par 4 gouttes de paraffine. Une telle préparation ne pourra pas servir à étudier tous les phénomènes que nous avons décrits ; elle permettra de décéler d’une façon simple, élégante et rapide, la présence du gonocoque.

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LE BLEU DIS MISTIE V LISNIES

Le bleu de méthylène a été beaucoup moins employé que le rouge neutre dans l'étude du pus blennorrhagique. La façon dont il se comporte à l'égard des leucocytes de l’uréthrite gonococienne présente cependant quelques particularités intéressantes à mettre en relief.

Commele rouge neutre, le bleu de méthylène colore seulement, dans la cellule réellement vivante les grains de sécrétion et une série d'éléments constitutifs cellulaires « qui ne prennent pas une part directe à la vitalité de la cellule $ (Galeotti).

Quand les cellules ont une vitalité normale certains liquides nutritifs et certaines enclaves du protoplasma se colorent seuls en présence du bleu.

La technique de la coloration du pus blennorrhagique par le bleu est absolument semblable à ce que nous avons indiqué pour le rouge neutre.

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Nous nous servons également de solutions extrèmement faibles dans du sérum à 8 pour 1000.

Disons tout d'abord que le bleu nous a paru doué d'un pouvoir de pénétration moindre que le rouge neutre.

Les gonocoques sont par lui parfaitement mis en évidence au sein du protoplasma du leucocyte, Ils prennent même une coloration bleu foncé très pure, qui les fait reconnaître facilement sur le fond transparent de la préparation.

La substance colorante ne se fixe pas Sur eux immédiatement, ou du moins très rapidement comme cela s'observe pour le rouge neutre.

Ce n'est guère qu'après une demi-heure que cette coloration présente toute son intensité, elle est donc progressive et graduelle.

Les gonocoques extra-cellulaires restent incolores ainsi que les autres parasites du pus uréthral.

A l'intérieur des leucocytes, les gonocoques apparaissent avec des contours nets et paraissent plus petits que dans les préparations au rouge neutre.

Le bleu se fixe en outre comme le rouge neutre, sur un certain nombre de granulations intracytoplasmiques de volume et äe nombre variables.

Nous avons déjà parlé de ces granulations et des hypothèses faites sur leur nature.

Le colorant teint en bleu léger et d’une façon diffuse toutes les parties constituantes des globules blancs, morts, et cela, nous a-t-il semblé, sans une élection colorante plus nette pour leurs noyaux.

Il donne enfin aux globules rouges de la préparation

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une teinte verdâtre métachromatique, et colore les granulations des mastzellen.

Après un temps plus au moins long, en général de 16 à 24 heures, la préparation comme celle traitée par le neutralroth subit une décoloration complète. Nous n'avons pas réussi à faire apparaître de nouveau la coloration en enlevant la lamelle et en exposant à l'air la gouttelette de sérum.

Il nous à semblé que le bleu de méthylène, tout en donnant des gonocoques des images très belles, est inférieur au rouge neutre dans l'étude du pus blennorrhagique.

Les mouvements browniens apparaissent plus vite et sont plus rapidement généralisés dans le sérum coloré au bleu.

Les élections colorantes sont moins rapides et la décoloration plus prompte.

Il est cependant indubitable que le bleu met en évidence le gonocoque dans la cellule encore vivante : nous avons constaté souvent ce fait de la façon la plus indiscutab'e. Nous regrettons que le temps trop court consacré à ce travail ne nous ait pas permis d'employer d’autres colorants. Nous espérons pouvoir ultérieurement combler cette lacune.