‹ Anatomie et physiologie végétales à l'usage des étudiants en sciences naturelles des universités, des élèves à l'Institut agronomique, des écoles d'agriculture, etcChapitre 561 sur 612 · MILIEUX DE CULTURE · texte numérisé non relu

MILIEUX DE CULTURE

Ilest vrai que les Nostocacées sont généralement colorées par la chlorophylle et la phycocyanine (p. 69), tandis que les Bactériacées sont incolores ; mais cette différence, liée à deux modes d'existence différents, la vie libre, d’une part, la vie saprophyte ou parasite, d'autre part, ne doit entrer que secondairement en ligne de compte, comme étant de l'ordre physiologique. Du reste, quelques espèces de Bactériacées peuvent végéter aussi à la manière des plantes ordinaires, grâce à la chlorophylle ou à la bactériopurpurine qui imprègne leur protoplasme, et pareillement quelques Nostocacées (Leuconostoe, fig. 1656) sont incolores

Donc, en résumé : spores exogènes ou kystes et chlorophylile chez les Nostocacées Mdites encore: Arthrosporées : spores endogènes et absence de chlorophy Ile chez les Bactériacées, dites encore Endosporées, voilà les deux caractères distinetifs les plus généraux, mais non absolus, des deux familles de l’ordre des Algues Cyanophycées.

Culture des Bactériacées. — Cultiver une Bactérie, c'est provoquer son développement dans un milieu stérilisé, de composition appropriée et strictement déterminée ; avoir une culture pure de cette même Bactérie, c’est obtenir dans ce milieu, en l'absence de toute trace des tissus ou humeurs, dans lesquels elle à été puisée, et surtout indépendamment de tout mélange avec d’autres germes, qui jusqu'alors pouvaient coexister avec elle.

Les cultures pures forment la base des recherches bactériologiques nécessaires à la caractérisation des espèces ; en outre, elles seules, dans le cas plus particulièrement important des maladies contagieuses, permettent d'établir, par l'inoculation de semblables Fe à des organismes appropriés, le caractère pathogène des espèces étudiées, et par suite leur intervention nécessaire dans l'étiologie du mal.

La culture des Bactériacées comporte deux opérations principales

1° La préparation des milieux de culture et leur stérilisalion ;

2° L'ensemencement de ces milieux.

4° Milieux de culture. — Liquides ou gélatineux, les milieux de culture doivent nécessairement renfermer le carbone alimentaire sous la forme organique, puisque les Bac-

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BELZUNG. — Anat. et phys. végét. 17

tériacées manquent de chlorophylle ; les autres corps simples de l'aliment peuvent être donnés sous la forme saline (p. 481).

Exception doit être faite pour les ferments nitreux et nitrique, qui sont capables de végéter dans un milieu exelusivement minéral (p. 1269).

Selon les espèces, on emploie, tantôt indifféremment des milieux de culture solides ou liquides, tantôt nécessairement lun d'entre eux seulement. Ainsi, quelques espèces (Bacille du charbon...) sécrètent de la trypsine, qui attaque et liquéfie la gélatine, ce qui exclut l'emploi de ce milieu ; les ferments nitreux et nitrique végètent mal dans des milieux riches en matières organiques et pas du tout sur la gélatine ; ete.

4° Milieux liquides — Les milieux liquides les plus ordinairement employés sont les bouillons de viande ou les bouillons végétaux (bouillon de Levure, de fruits, de navets...) ; en outre, dans certains cas, le sérum sanguin. Ces milieux naturels renferment par eux-mêmes tous les éléments nécessaires au développement.

Pour préparer par exemple un bouillon de Bœuf, on divise la viande maigre en menus fragments et on la fait bouillir pendant quelques heures dans le double de son poids d’eau, en renouvelant le liquide à mesure qu’il s'évapore. Après refroidissement, on filtre, et on complète la puissance nutritive du bouillon, en y ajoutant, par litre, de { à 2 grammes de phosphate disodique, 10 grammes de chlorure de sodium, et, s’il y a lieu de lavoir plus concentré, quelques grammes de peptone sèche. Enfin, on le neutralise au moyen de carbonate de sodium.

Fig. 1658. — Conserve de bouillon stérilisé. — 4, tubulure ouverte, à étran- a) Conserves à bouillon. — Le bouillon a se PEN Re ainsi obtenu, ayant été manipulé à l'air, pince ; p, ajutage de verre renferme divers germes, qui y ont été fermé. amenés notamment avec les poussières

ambiantes pendant la filtration. Pour le conserver intact en vue de cultures ultérieures, il est indispensable de le stériliser dans des récipients appropriés.

On l'introduit à cet effet dans des conserves à bouillon (fig. 1658), préalablement lavées avec soin et chauffées à l’étuve sèche (fig. 1644) à la température de 200 degrés. Les bouchons qui ferment les deux tubulures de ces conserves sont traversés, l’un, par un tube coudé, fermé seulement par un tampon d'ouate ({), qui interdit l'accès des poussières ambiantes ; l’autre, par un tube deux fois coudé à angle droit, qui pénètre jusque vers le fond de la conserve et se prolonge à l'autre extré-

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