TOME I

MM. Camus et GLey les ont vues également et rapportent les différences observées à la dose, ou encore, ce qui revient au même, à la toxicité variable du sérum employé ; ils donnent des tableaux d'expériences très significatifs auxquels nous ne pouvons mieux faire que d'emprunter un bon nombre des données suivantes :

1° Action des fortes doses. — Elles déterminent la mort du cobaye ou du lapin en quelques minutes, avec prédominance des accidents convulsifs. Ceux-ci consistent en mouvements brusques de propulsion, en convulsions cloniques ; il s’y joint des troubles soudains de la respiration, dyspnée, arrêt des mouvements respiratoires : c’est ainsi qu’un lapin pesant 1.685 grammes, qui reçoit dans les veines o cc. 7 d’un sérum d'Anguille, présente aussitôt des contractions généralisées, de l’opisthotonos, du myosis, en même temps que de la salivation et de l’hématurie : il meurt en 3 ou minutes. Un cobaye, du poids de 375 grammes, qui reçoit dans la jugulaire o cc. 065 de sérum, manifeste aussitôt des convulsions et un arrêt brusque de la respiration, qui entraîne la mort en 3 minutes.

D'une façon générale, à dose forte, de o cc. 1 à o cc. 15 par kilo pour le lapin, et de o cc. o7 à o cc. 08 par kilo pour le cobaye, le sérum d'Anguille détermine une excitation du système nerveux qui se traduit par des convulsions, et l’animal meurt rapidement au milieu de ses convulsions ou dans une courte phase de paralysie généralisée, avec arrêt respiratoire précédant la mort du cœur, c’est-à-dire avec prédominance des accidents bulbaires.

C'est cet arrêt respiratoire que Mosso considère comme le caractère le plus constant de l’intoxication suraiguë et qu'il a montré être d’origine centrale.

2° Action des doses faibles. — À dose plus faible, ou à même dose s'il s’agit d’un sérum moins toxique, ce sont les accidents paralytiques qui surviennent d’abord. Après un peu d’agitation, l’animal, cobaye ou lapin, peut rester dans cet état jusqu’à la mort ; d’autre fois, il se produit secondairement des phénomènes convulsifs : secousses fibrillaires dans les muscles ou même des convulsions cloniques ou contractures, après lesquelles l'animal meurt, Il survient fréquemment dans cette forme lente de la salivation et du larmoiement, de la dyspnée pouvant aller jusqu'à la polypnée, de l’hypothermie consécutive, manifestant l’action bulbaire ; mais la moelle est fortement atteinte aussi.

Souvent l'animal, en cet état, ne mange pas ; même quand il peut s’alimenter, il se produit dans les premières heures une perte de poids considérable, qui dépasse de beaucoup celle qui correspond à une simple inanition qui est due, d’après les recherches de MM. SErI et GaizLaRDoT à une élimination de vapeur d’eau pulmonaire pendant la polvpnée, relevant par conséquent de cette polypnée.

Si pendant l’envenimation on prélève du sang, on constate qu'une partie de l’hémoglobine a diffusé dans le sérum.

La mort survient en 24 à 72 heures.

Ainsi, comme l'avait déjà vu A. Mosso, les troubles fonctionnels sont intenses et portent particulièrement sur l’appareil respiratoire, le système nerveux et le sang.

Action locale du sérum d’Anguille. — MM. Héricourr et RICHET ont vu que de faibles doses inoculées sous la peau d’un chien ne produisent qu'une légère douleur et un empâtement qui disparaît en quelques jours.

Si la dose est plus forte, soit 1 cc. pour un chien de taille moyenne, les effets sont plus marqués : au bout de 24 heures, la région inoculée devient œdémateuse et s’infiltre de plus en plus pendant trois ou quatre jours. Dans quelques cas, il y a mortification étendue, avec suppuration intense, gangrène et sphacèle. Dans d’autres, au contraire, il y a accumulation de sérosité rougeâtre, sans suppuration.

WEHRMANN a observé des abcès par nécrose.

De nouvelles inoculations donnent toujours les mêmes effets locaux : comme pour les venins de Serpents, de Lézards, de Batraciens, etc., l’immunité ne porte pas sur l’action phlogogène locale, mais seulement sur les symptômes généraux.

Anatomie pathologique. — À l’autopsie, on trouve dans les deux cas, mais naturellement plus marquées dans le second, des congestions viscérales diverses des poumons, du foie, des capsules surrénales. Le sang est fluide dans les gros vaisseaux et dans le cœur ; la vésicule biliaire est distendue ; la vessie contient parfois de l’urine sanguinolente ; le liquide péritonéal lui-même peut être plus ou moins teinté de sang. Dans les urines, MM. Camus et GLEy ont constaté la présence de nombreux cylindres granuleux et des globules rouges. Les altérations du parenchyme rénal sont très graves et se produisent très rapidement, puisque M. PETTIT a pu les constater déjà chez les animaux qui meurent en quelques minutes : les cellules des tubili contorti subissent la dégénérescence hyaline, le corps cellulaire est gonflé et présente un aspect clair anormal. Quand l'animal survit quelques heures, les cellules claires dominent dans les tubili ; elles font saillie dans la lumière canaliculaire, qu’elles obstruent, et leurs limites sont distinctes. Les tubes droits sont également altérés dans un certain nombre d’entre eux, les cellules épithéliales se continuent insensiblement avec une masse compacte, granuleuse, remplissant le tube. Dans d’autres, la lumière est comblée par un magma granuleux contenant quelques noyaux altérés. MM. Jousser et LEeras ont signalé aussi des lésions du foie et du cœur chez les lapins envenimés.

Chez les animaux ayant servi aux expériences de KosseLz, WESTPHAL a observé dans le renflement cervical de la moelle des altérations cellu-

laires analogues à celles que Gorncueiner et FL\rau ont signalées dans le tétanos.

M. Grey à constaté, chez les animaux qui ont reçu à plusieurs reprises du sérum d’Anguille en vue de les immuniser, de l’hypertrophie avec de la surcharge graisseuse du cœur et souvent de l'épanchement péricardique.

Action sur les diverses fonctions

Action sur le sys'ème nerveux. — Les expériences de Mosso sur la grenouille et autres animaux, les convulsions et les phénomènes paralvtiques observés chez les Mammifères, montrent que le système nerveux est profondément frappé : les nerfs moteurs, chez la grenouille, sont paralysés : le sciatique, très fortement excité, ne fait plus mouvoir la jambe, bien que le cœur palpite encore ; il en est de même de l’excitabilité musculaire. On observe encore une action narcotique et une réduclion telle de la sensibilité chez le lapin, qu'on peut brûler ou marcher sur les pattes des sujets, surtout les postérieures, sans qu'ils réagissent. IL y à probablement, dit Mosso, lésion profonde de la conductibilité pour la moelle vers le cerveau et pour les nerfs sensitifs des régions postérieures. Les nerfs moteurs du lapin sont moins affectés. Le réflexe patellaire est conservé, mais s’affaiblit jusqu'à la mort (Grey).

Action sur l'œil. — MM. Camus et GLEey ont observé parfois, à une phase avancée de l’intoxication, du ptosis ; d’autres fois, quoique plus rarement, une exophtalmie très marquée. D'après ces auteurs, un autre symptôme, le myosis, est presque constant. On trouve rarement des sérums qui ne le produisent pas. Le resserrement pupillaire est souveut égal des deux côtés ; d’autres fois, il est plus marqué d’un côté que de l’autre.

L'injection intra-veineuse préventive d’atropine n'empêche pas le myosis ; elle le diminue seulement un peu lorsqu'il est établi, et il en est de même de l'excitation du segment céphalique du sympathique cervical. D'autre part, l'extirpation préalable du ganglion cervical supérieur n'empêche pas le myosis de ce côté : l’action myotique n'est donc pas due à la paralysie des fibres sympathiques irido-dilatatrices. MM. Camus et GLey ont cherché si elle serait due à une excitation des filets irrido-constricteurs ; mais la section intra-crânienne du moteur oculaire commun, effectuée dans ce but, est une opération fort délicate qui entraîne souvent des hémorrhagies et ne permet pas d'observer exactement les résultats. Toutefois, comme le myosis persiste après la mort, ces auteurs pensent qu'à l’action précédente. possible, pourrait bien se joindre l’action directe sur les éléments musculaires de l'iris, plutôt que sa congestion, qui est cependant très réelle.

L'instillation directe d’une goutte de sérum dans l’œil ne donne lieu qu'à une faible action myotique : elle irrite fortement la cornée et la conjonctive.

Le sérum, chauffé à 58° pendant 15 minutes, a perdu son action myotique.

Enfin, sur les animaux immunisés, elle ne se produit plus.

Action sur la respiration. — Aussitôt après l’inoculation d'ichthyotoxine, on observe de l’accélération des mouvements respiratoires; la dyspnée devient rapidement de la polypnée ; puis survient l'arrêt, qui s'étend d’abord au diaphragme, ensuite à l’abdomen et enfin à la face. Cet arrêt qui, d’après A. Mosso, est d'origine centrale, peut être très brusque et entraîner la mort.

Mosso fait toutefois remarquer qu'avec des doses massives l'arrêt du cœur peut se produire simultanément avec celui de la respiration et même le précéder. Ce fait ne se trouve pas confirmé dans les travaux ultérieurs.

Perte de poids sous l'influence du sérum d’'Anguille. — L'injection de doses faibles, non rapidement mortelles du sérum d’Anguille, détermine un abaissement rapide du poids, même quand l’animal peut s'alimenter ; lorsqu'il ne mange pas, la perte de poids est notablement supérieure à celle qui se produirait par la simple inanition (Camus et GLEY).

Ricuer et HéricourT ont vu aussi que les chiens qui ont reçu plusieurs injections sous-cutanées de sérum d’Anguille dépérissent. H. Kosser. a également observé que l'injection d’une dose non mortelle d’ichtyotoxine entraîne en quelques jours une perte de poids très forte : c'est un fait d’ailleurs bien connu pour les venins et les toxines microbiennes.

MM. Camos et GLEy ont montré que cette perte de poids peut être de 236 grammes en 24 heures pour un cobaye qui pesait 540 grammes, et qu'elle se produit encore avec le sérum chauffé à 58° pendant 15 minutes, qui ne détermine pas d’autres symptômes morbides.

La perte de poids, qui est souvent plus du dixième du poids du corps, est plus marquée encore après l’incculation intra-rachidienne qu'après l’inoculation intraveineuse. Elle se produit très peu de temps après l'injection, atteint son maximum une heure après et décroît progressivement ensuite, ne persistant pas au delà de quelques heures. MM. SEriN et GarLLarporT, qui l'ont étudiée dans ses détails, ont vu en outre que, pour une intensité trop forte des phénomènes nerveux, la chute de poids est atténuée, et cela d'autant plus que la mort est plus rapide.

La perte de poids est d'autant plus élevée que la polypnée est plus forte, et comme les autres émonctoires fonctionnent normalement, que le quotient respiratoire reste constant, les auteurs en concluent qu'elle est due à cette polypnée toxique, à laquelle s'appliquent les lois exprimées par Cr. Rroner pour la polypnée thermique : 1° l’animal se refroïdit en respirant rapidement ; 2° cette polypnée entraîne la réfrigération par exhalation de vapeur d’eau.

La polypnée résulte probablement d’une action directe de la substance toxique sur le bulbe et non d’une action de Co?, puisque celui-ci n'est pas exhalé en plus grande quantité.

Le sérum de Torpille se comporte comme le sérum d’Anguille et détermine des pertes de poids suivant le même mécanisme.

Les sérums toxiques entraîneraient donc une perte de poids considérable en agissant directement sur les centres bulbaires.

La perte de poids n’est pas entravée par l’inoculation de sérum antitoxique.

Effets cachectisants des petites doses répétées. — Un certain nombre d'auteurs parmi lesquels Viaup-Granp-Marais, C. Pnisarix, ont signalé les effets cachectisants des petites doses de venin de vipère. On signale des cas de mort tardive par cachexie progressive.

Les mêmes effets ont été observés par MM. Héricourr et RICHET sui des chiens ayant reçu, à intervalles de plusieurs semaines, des doses répé tées de sérum d’Anguille.

D'autre part, Kossez signale que l'injection d’une faible dose de sérum détermine une intoxication chronique : au bout de quelques jours, les animaux subissent une forte baisse de poids ; ils sont parésiés et finissent par mourir.

Nous avons vu la baisse subite et énorme qui se produit après l’injection des fortes doses et qui relève de la polypnée toxique.

Action sur le cœur et sur la circulation. — A. Mosso a commencé l'étude analytique des troubles cardio-vasculaires consécutifs aux injec tions intraveineuses de sérum d’Anguilie. BarniER a observé un ralentissement suivi d’une accélération et d’une phase d'irrégularité dans les battements, comme s’il y avait d’abord excitation, puis paralysie des nerfs modérateurs.

Avec les doses rapidement mortelles, la respiration s'arrête toujours avant le cœur. De même que le venin des Serpents, le sérum d’Anguille n’a pas d'action locale sur le cœur de la grenouille ; mais Mosso, qui signale ce fait, n'a pas réalisé beaucoup d'expériences dans cette voie. La circulation périphérique est également troublée : lorsque la mort ne survient pas en quelques minutes, on peut constater chez le lapin que les vaisseaux de l'oreille se dilatent d’abord, puis se resserrent de plus en plus, quelquefois très fortement.

La pression intra-artérielle s'élève presque aussitôt après l'injection d'une forte dose, puis s’abaisse lorsque cessent les convulsions, ce qui indiquerait qu'elles sont la cause de l'élévation de pression. Ce fait, vu par Mosso, a été confirmé par M. Grey. Mais il y à des cas où la vasodilatation est très accusée et où l’on observe des hyperémies viscérales intenses : viscères très congestionnés et même suffusion sanguine dans le péritoine.

Cette action, quoique moins marquée, est analogue, dans ses effets sinon dans son mécanisme, à celle qu'on observe après l’injection de venin de Vipère.

{ction sur la coagulation du sang

À. Mosso à vu que le sang veineux des animaux envenimés par le sérum d’Anguille est très foncé et qu'il ne coagule pas. Quand il y à un début de coagulation, la masse prend l'aspect d’une gelée friable qui ne se rétracte pas. Le mécanisme de cette action a été analysé par C. Dece- ZENNE, en 1897. Cet auteur établit par un certain nombre d'expériences que le sérum agit à la facon de la peptone en déterminant une réaction qui aboutit à la formation dans le foie d’une substance anticoagulante, d’une thrombose. En effet

In vitro, le sérum d’Anguille accélère la coagulation du sang de chien ; mais si on le fait passer à travers le foie isolé, en l’injectant par la veine porte, et qu'on recueille le produit par la veine sus-hépatique, on constate que le sérum a perdu son pouvoir coagulant in vitro.

DELEZENNE à montré que, toutefois, la présence de globules blancs est nécessaire au phénomène, car si l’on répète l'expérience précédente en lavant préalablement le foie à l’eau salée et en y faisant ensuite passer un plasma lymphatique bien débarrassé de ses leucocytes et additionné de peptone, le liquide recueilli dans la veine sus-hépatique coagule d’ordinaire spontanément quelques minutes après son passage et accélère toujours la coagulation du sang in vitro. Remarquant que les agents anticoagulants (peptone, venins, sérums) ont tous un pouvoir leucolytique très marqué, l’auteur, s'appuyant d'autre part sur les recherches de Scamir et de LiLIENFIELD, qui ont montré que les leucocytes contiennent à la fois des substances coagulantes et d'autres anticoagulantes, considère que la leucolyse est la cause principale du phénomène et que le rôle de la cellule hépatique se bornerait à fixer et à retenir la substance coagulante, laissant ainsi passer la substance anticoagulante.

Mais pour qu'une substance leucolytique rende le sang incoagulable, il faut qu'elle localise son action sur les leucocytes et qu'elle n’atteigne que faiblement les globules rouges (peptone, ricine, abrine, venins).

Suivant la dose employée, certaines substances, généralement anticoagulantes, peuvent devenir au contraire coagulantes si elles détruisent les hématies dont l'extrait, comme la bile, l’urée, etc... empêche l’action anticoagulante de se produire.

Ces faits présentent le grand intérêt d'être bien enchaînés et de donner, dans certains cas, une explication rationnelle du phénomène ; mais celui-ci dans d’autres semble plus complexe et ne pas relever du même mécanisme. L'espèce inoculée joue aussi un rôle comme l'avaient vu Fonrana et Mosso à propos du venin de vipère, et comme l'a précisé C. Prisauix : le venin de vipère inoculé dans les veines du chien à la dose de 1: millig., 5 provoque l'incoagulabilité du sang alors qu'il coagule le sang du lapin et produit la mort foudroyante par thrombose chez cet animal.

et (D) Le]

Action sur les globules du sang ; hémolyse

Le sérum d’Anguille agit sur les deux catégories de globules, produisant la leucolyse et l’érythrolyse. Cette dernière à été particulièremeni. étudiée par MM. L. Cauus et Grey.

Ces auteurs avaient observé, au cours de leurs nombreuses expériences, qu'à la suite de l'injection intra-veineuse de sérum souvent l'iris s'injecte, qu'il se produit souvent des hémorrhagies nasales, de l'hémoglobinurie et de l’hémoglobinhémie, et que parfois le liquide péritonéal est sanguinolent ou même nettement hémorrhagique.

Pour déterminer l'intensité de ce pouvoir globulicide MM. Cauus el GLEY ont employé la méthode de Hamburger. La solution de chlorure de sodium, isotonique au plasma sanguin du lapin est de o g. 52 p. 100. Or, l'addition d’une goutte de sérum d’Anguille à diverses solutions salines diminue la résistance globulaire du lapin dans des proportions telles que l’hémoglobine diffuse encore dans des solutions hypertoniques de 0,70 de NaCÏI p. 100. Cette action globulicide d'ordinaire très intense, varie cependant beaucoup avec les sérums ; elle à pu être une fois observée avec un sérum d'Anguille dilué seulement à 1 p. boo ; elle a pu se produire encore avec un sérum dilué à 1 p. 20.000.

Cette action globulicide, in vivo et in vitro, si intense pour le lapin, grande encore pour le cobaye et pour les animaux sensibles à l’action toxique du sérum d’anguille, est au contraire très faible pour le hérisson, la chauve-souris, le pigeon, la poule, la tortue, la grenouille, le crapaud.

Ces animaux sont à la fois résistants à l’action toxique générale et à l’action hémolyÿtique du sérum d’Anguille, de sorte que l’on pourrait en conclure que c’est la même substance qui produit les deux catégories d'effets. Or, les exemples suivants viennent éclairer la question: le chat est tué sûrement par l'injection intra-veineuse de o cc. 05 de sérum par kilogramme (o cc. 1 étant celle de ce même sérum tuant le même poids de lapin) ; et cependant cet animal résiste bien à l’action hémolytique : ses globules rouges ne laissent diffuser leur hémoglobine que dans des dilutions de sérum à 1 p. 100 ou à 1 p. 50, la diffusion étant d’ailleurs lente et faible.

Un second exemple est fourni par la marmotte : MM. Camus et GLEY ont en effet constaté 1° que cet animal se montre, comme le chat, très sensible à l’action toxique du sérum d’Anguille ; des doses de o cc. 1 à o cc. 2 par kilogr. dans les veines, déterminent la mort en 5 à 6 m. ; la dose de o cc. o2 par kilogr. (10 fois moindre que celle qui tue le lapin) a entraîné en quelques heures la mort d’un sujet ; 2° que ses globules sont aussi résistants, sinon plus, que ceux du hérisson au sérum d’Anguille : il faut des dilutions de sérum comprises entre 1 p. bo et 1 p. 20 pour que, dans les solutions isotoniques de sel marin, l’hémoglobine diffuse un peu au bout de 15 à 20 heures.

Et, ce qu'il y a de particulier dans ce cas, c'est que la marmotte est peu sensible à l’action générale du sérum de chien, tandis que visà-vis de ses globules ce sérum est presque aussi toxique que le sérum d’Anguille.

Ces faits doivent rendre circonspects dans l'interprétation des mécanismes de l’immunité ; ils montrent que la substance neurotoxique du sérum est distincte de sa substance hémolytique.

Causes pouvant modifier le pouvoir hémolytique. — Le pouvoir hémolytique ne tient pas à la réaction très alcaline du sérum car il persiste après neutralisation par l'acide chlorhydrique. La leucine, la tyrosine, la bile n’ont aucune action sur lui (Camus et GLex). Il en est de même, d’après Gencou, de la décalcification par l’oxalate de soude et de la filtration sur sac de collodion.

Action favorisante. — Les faibles doses de chlorure de calcium Tavorisent l’hémolyse ; il y a donc parallélisme avec ce qui se passe avec la même substance pour la coagulation du sang, mais non en ce qui concerne la décalcification (GENGou).

Action empêéchante. — GExcou a également montré que le citrate de soude et la substitution du saccharose au sel marin dans la solution où l’on dilue le sérum empêchent l’hémolyse en s’opposant à la fixation du sérum sur les globules. Cette fixation se produit au contraire si on ajoute au milieu sucré des sels, surtout les alcalino-terreux..

Mécanisme de l'hémolyse par le sérum d’Anguille. — Hans Sacs a considéré les venins des crapauds et des araignées comme des « hémotoxines pures », c’est-à-dire comme ce que nous appelons des hémolysines directes ; et il tend à ranger le sérum d’Anguille dans cette catévorie. Cette opinion est aussi celle de Noc : « la substance toxique du sérum d’Anguille semble être simple. On n'a pu jusqu'ici la scinder en un anticorps et un complément ».

De ces opinions les expériences précises de MM. Camus et GLEY ont montré la réalité : on ne peut pas attribuer à deux substances distinctes, suivant les idées d'Enrricn et celles de Borpet-GENGoOU, l’action hémolytique du sérum d’Anguille.

Les résultats sur lesquels ils s'appuient pour démontrer l'unicité de nature de l’hémolysine sont les suivantes :

1° Le sérum d'Anguille, qui hémolyse rapidement le sang du lapin, agit aussi rapidement sur les globules lavés ; l’hémolyse est donc indépendante du plasma sanguin ;

2° Le sérum chauffé à 58°, et qui a perdu ainsi son pouvoir hémolytique, ne peut être réactivé par addition de sérum neuf (ou d’alexine) ; les globules de lapin mis en contact avec du sérum d’Anguille chauffé

ne devient pas le complément ; et ce sérum n'est pas hémolytique par la raison que son alexine serait plus active que celle des autres sérums.

3° Le sérum d’Anguille chauffé ne contient pas non plus de sensibilisatrice : les globules de lapin qu'on y fait séjourner ne sont pas sensibilisés, car l’addition de sérum neuf de cobaye ou de lapin ne les détruit pas ; c'est ce qu'a montré FrouIN par la dialyse : tandis que les sérums hémolytiques d'animaux préparés, de même que les sérums normalement hémolytiques, perdent leur pouvoir par filtration sur sac de collodion, le sérum d’Anguille le conserve et se distingue encore par là des autres érums normalement hémolytiques.

Influence de la peptone sur l'action toxique du sérum d’Anguille

MM. Crerc et LospErR ont montré que la peptone en injections intraveineuses atténue d’une manière remarquable la toxicité du sérum d’Anguille. Cette action semble s'exercer d'une manière complète quand l’intoxication suit une marche relativement lente. Avec des doses massives, la mort n'est survenue qu'au bout de plusieurs heures, tandis que les animaux témoins succombaient en moins de 10 minutes. Les lapins préparés présentent encore de la dyspnée, du myosis, de la tachycardie ; mais loin d’avoir des convulsions comme les témoins, ils présentent de la torpeur, de la somnolence qui, suivant les cas, rétrocèdent ou aboutissent à la mort. L'action de la peptone demande un certain temps pour s'établir, car si l’on pratique simultanément l'injection de peptone et celle de sérum d’Anguille, l’atténuation de la toxicité est presque nulle. De même, cette action est assez fugace et ne dure que quelques jours.

Toxicité des Larves d’Anguilles

En 1900, E. Burra, au cours de ses recherches sur la toxicité du sang de la Lamproie fluviatile (Petromyzon planerti), a constaté que le sang des larves de cette espèce (Ammocætes branchialis) est aussi toxique que celui des adultes. Cette constatation suggéra à G. Buczra (1919), d’essayer s'il en est de même pour la larve d’Anguille, c’est-à-dire pour la jeune anguille encore transparente, appelée cieche en Italie, pteballe sur nos côtes, et qu'on recueille en abondance en certaines saisons.

L'auteur étudie d’abord l’action hémolytique et l’action sur la coagulabilité du sang in vitro, de l’extrait aqueux du corps de cieche. En même temps, pour établir des comparaisons, il expérimente aussi sur le sérum, les extraits aqueux de peau et de muscles d’Anguille, enfin, avec le liquide filant provenant de cieches ou d’Anguilles, lorsqu'on enferme ces animaux dans un récipient contenant une petite quantité d’eau pure ou d’eau salée physiologique. Ses recherches l’amènent aux conclusions suivantes :

1° Pour l’action hémolytique. —— L'extrait aqueux du corps entier de

cieche a une action hémolytique sur le sang défibriné de bœuf, action analogue à celle du sérum d’Anguille. L'analogie est confirmée par le fait que les mêmes facteurs (chauffage, putréfaction), qui modifient l’action de l’un modifient aussi l’action de l’autre.

Cette action est vraisemblablement due au sang, car les muscles privés de sang (et l’auteur a employé ceux de l’Anguille adulte saignée et exprimée pour en retirer tout le sang), ne possèdent aucune action hémolytique.

L’extrait aqueux de peau d’Anguille et le mucus cutané même, soit des larves soit des adultes, ont une action analogue à celle de l'extrait du corps des larves, et par conséquent à celle du sérum d’Anguille. Les même facteurs (chauffage, putréfaction), qui agissent sur l’action hémolytique des uns agissent aussi sur l’action hémolytique des autres. On obtient les mêmes résultats en plongeant les jeunes larves dans le sang défibriné de bœuf : ainsi le mucus cutané d’Anguille possède des propriétés hémolysantes qui se manifestent déjà chez les larves. Ce fait est à rapprocher de celui que nous avons observé sur les larves de Batraciens (Salamandres, Alytes...), qui possèdent un mucus cutané aussi actif que celui des adultes.

Il est probable, d’après les faits précédents, que les substances hémolytiques du corps des larves ont des rapports avec celles de la peau et du mucus qu'elle sécrète.

2° Pour l’action coagulante. — L'’extrait aqueux du corps de cieche, comme le sérum d'Anguille, accélère in vitro la coagulation du sang de chien.

L'extrait aqueux de. peau d'’anguille, comme le mucus des larves et des adultes, présente cette même action.

Les facteurs qui altèrent l’action coagulante dans les deux cas, comme l’action hémolytique, sont les mêmes. L'auteur suppose donc que l’action accélératrice sur la coagulation, aussi bien que l’action hémolytique, sont dües à une même substance.

Les propriétés hémolytiques du sang des jeunes anguilles encore transparentes ont été aussi observées par E. GLEx au cours de ses importantes recherches sur le sérum des Anguilles adultes. En coupant la tête d’un grand nombre de jeunes Anguilles, l’auteur a pu obtenir quelques gouttelettes de sang et constater le pouvoir hémolytique in vitro sur les globules rouges de lapin.

3° Action toxique générale des extraits des jeunes Anguilles. — Dans un second travail (1919), G. Buerra a mis en évidence l’action toxique générale des extraits des larves, ainsi que les rapports qui existent entre les propriétés du sang et du mucus cutané des larves et des adultes.

Action sur la Grenouille. — L’extrait ohtenu avec une larve dans 1 cc. d’eau salée physiologique, inoculé dans le sac dorsal ou la cavité abdominale de la grenouille, tue celle-ci en 5 à 6 heures. On voit dimi-

nuer rapidement la sensibilité générale, apparaître de la parésie, puis de la paralysie débutant par les membres postérieurs, un léger degré d’exophtalmie et de mydriase, puis une sorte de léthargie flasque simulant la mort. Souvent on constate de larges ecchymoses dans les muscles. La mort survient par arrêt de la respiration précédant celui du cœur.

Action sur le Lapin. — L'extrait préparé à raison de 2 cc. d’eau salée par larve, tue le lapin en 12 à 24 heures, à la dose de 5 larves par kilog de lapin, inoculée dans le péritoine. Les symptômes observés correspondent à ceux qu'on note chez la grenouille : parésie, paralysie à début postérieur, légère mydriase ; il se produit en outre de l’hypothermie, et à l’autopsie on constate des congestions viscérales.

Action sur le Chien par injection intra-veineuse. -— L'extrait correspondant à 12 sujets dans 5 cc. d’eau isalée physiologique, soit environ © gr. o3 de cieche par kilog de chien, entraîne la mort de celui-ci en l’espace de quelques heures. Les tracés accusent un abaissement de la pression artérielle, plus prolongé et plus marqué avec les fortes doses rapidement injectées qu'avec les doses moyennes lentement introduites. Cet abaissement ne se produit pas après une deuxième inoculation. Il est quelquelois précédé d’une légère élévation de la pression. En même temps, se produit un ralentissement des mouvements respiratoires et un affaiblissement des battements du cœur. La sensibilté générale est diminuée, bien que la cornée reste sensible jusque vers la fin, la pupille est légèrement dilatée, il y a de l’hypersécrétion salivaire, des contractions fibrillaires des muscles sans convulsions véritables.

La respiration et le cœur s'arrêtent simultanément, ce dernier en diastole.

À l’autopsie, on constate une hyperhémie viscérale surtout accentuée au niveau de l'intestin ; le sang est laqué et incoagulable.

L'action de la chaleur atténue la toxicité, qui ne disparaît que par le chauffage à 100° prolongé pendant 30 minutes.

Rapports entre les propriétés du sang d'Anguille ou de sa larve avec la sécrélion cutanée muqueuse de l’une ou de l’autre. — Les extraits de peau d'Anguille dans l’eau salée physiologique font périr la grenouille avec les mêmes symptômes que déterminent les extraits des larves, sauf qu'on ne note pas d’ecchymoses sur les membres thoraciques ou abdominaux. Sur le lapin, les extraits de peau d’Anguille inoculés dans les veines produisent la même action aussi ; mais l’hypothermie est un peu plus précoce et rapide ; on ne note pas d’hémolyse ni d’hyperhémie viscérale, et l’arrêt du cœur à lieu en systole.

Sur le chien, les tracés montrent la même chute initiale de la pression carotidienne, le même affaiblissement des contractions cardiaques. La mort survient rapidement en 15 m. avec l’extrait correspondant à 20 gr de peau d’Anguille, le cœur et la respiration s'arrêtent en même

temps. À l’autopsie, le sang du cœur est liquide, et il existe une hyperhémie viscérale intense.

Le mucus des Anguilles et des larves produit sur la grenouille, le lapin et le chien, les mêmes symptômes que les extraits de la peau ; les effets sont seulement plus intenses, plus marqués aussi avec le mucus de l’adulte qu'avec celui de la larve ; mais cette différence de degré peut tenir à la concentration qu'il est impossible d’égaliser, car les propriétés filantes dues à la mucine sont tout à fait indépendantes des propriétés toxiques, ainsi que nous l'avons déjà indiqué pour le mucus cutané des Batraciens.

Le lapin, outre les phénomènes paralvtiques, présente quelquefois des convulsions.

Le chien meurt par arrêt simultané du cœur et de la respiration. Le cœur s'arrête en diastole, rempli de sang liquide et laqué, non coagulable au bout de 24 heures.

Aïnsi, l’extrait aqueux du corps des larves, celui de la peau, îe mucus cutané des larves et des adultes présentent une action toxique générale analogue entre elles et à celle du sérum d’Anguille.

D'après G. Buczra, la substance toxique serait la même dans tous les cas, de même aussi que la substance hémolvtique.

Immunité naturelle contre le sérum d’'Anguille

Hérisson. — Les doses qui suffisent à tuer le cobaye, le lapin ou le chien semblent sans action notable sur le hérisson : avec la dose de o cc. 9, on observe un peu de dyspnée, d'abattement ; l’animal ne se met pas en boule quand on l’excite, et ne meurt qu'en une douzaine d'heures. Avec une dose encore supérieure, 1 CC. 1, introduite dans la veine jugulaire, la dyspnée survient en quelques minutes, puis l'animal se raïdit, la respiration s'arrête, et la mort survient en moins d’une demi-heure. Le cœur bat encore au moment où la respiration s'arrête.

Ainsi les sujets ne meurent qu'avec une dose {o à 5o fois plus forte que celle qui foudroie le cobaye, et ils peuvent survivre plusieurs heures. À l’autopsie, et en particulier à l'examen du sang, on trouve que les globules ne sont pas dissous.

Le hérisson résiste donc à l’action toxique générale et à l’action hémolytique du sérum d’Anguille.

MM. Camus et GLey ont, en outre, observé que le hérisson résiste moins bien aux petites doses répétées, telles que celles qu’on emploie dans la vaccination, qu'aux doses massives. Le sujet dépérit et meurt assez rapidement, en quelques jours, après une perte de poids notable.

À quel mécanisme faut-il rapporter la résistance des globules du hérisson au sérum d’Anguille? Est-ce aux globules eux-mêmes ou à une substance antiglobulicide de leur plasma

Cette dernière serait-elle mise en évidence par le chauffage à 58°

pendant 15 minutes, comme la substance antitoxique contre le venin de Vipère, ainsi que l’ont établi Prisazix et BERTRAND ?

En répétant cette expérience, qui détruit la toxicité et l’action globulicide du sérum de hérisson, MM. Camus et GLEY n'ont pas constaté que le sérum soit devenu sensiblement antiglobulicide, et ils concluent à la résistance propre des globules, c’est-à-dire à une immunité cytologique ou histogène de BEHRING.

Les mêmes auteurs signalent, en outre, comme étant réfractaires au sérum d'Anguille, la chauve-souris, le pigeon, la poule, la tortue grecque, la grenouille, le crapaud, dont les globules éprouvés comme ceux des autres espèces résistent au sérum dilué à 1/100. Chez aucune de ces espèces, le sérum n'est antiglobulicide.

Les globules des lapins nouveau-nés se comportent comme les précédents vis-à-vis du sérum d’Anguille ; ils résistent à son action globulicide jusqu'au moment où le jeune sujet ouvre les yeux, soit du 15° au 0° jour ; puis cette résistance décroit graduellement pour enfin disparaître. Le sérum de ces jeunes lapereaux ne s’est montré à aucun moment antiglobulicide.

ScoroxE et BurFa ont montré, en 1900, que parmi les Poissons, les Cyprins dorés et les Tanches résistent à des doses de sérum d’Anguille capables de tuer plusieurs chiens pesant 10 kilogrammes.

Un autre fait très remarquable, c’est que le pouvoir antiglobulicide peut apparaître chez les jeunes issus d’une mère artificiellement immunisée : c’est là une superposition de l’immunité artificielle ou humorale avec l’immunité cytologique ou naturelle. Nous avons montré, à propos des Serpents, que l’immunité naturelle des couleuvres vis-à-vis de la Salamandrine, relève à la fois de ces deux processus.

Immunité acquise : Vaccination

Immunisation par le sérum frais. — En 1897, MM. Hérrcourr et Cu. Ricner montrent que l’inoculation sous-cutanée de sérum d’Anguille chez le chien donne lieu, dans le sérum de cet animal, à l’apparition d’ « une antitoxine immunisante ». Le sérum de chien, ainsi traité, protège effectivement le lapin contre l’action toxique du sérum d’Anguille.

De plus, le mélange, in vitro, de sérum d’Anguille et de sérum antitoxique peut être impunément injecté dans les veines du lapin. Les auteurs en concluent que l’antitoxine agit sur la toxine à la façon d’une substance chimique neutralisante, suivant les idées d’Enrrien et de BEHRING.

C. MacztEr1 (1897), de son côté, faisait dans la même année des expériences analogues à celles de MM. HÉérrcourr et Ricuer. Il réussissait à immuniser des lapins par des injections intraveineuses de petites doses graduellement croissantes de sérum. Il commençait par 1/10 de la dose mortelle et augmentait cette quantité de 1/10 tous les jours. Lorsque la

dose mortelle était atteinte, il injectait les jours suivant une fois et demie la dose mortelle, puis 2, puis 3, et constatait que le lapin peut arriver à supporter 20 fois la dose mortelle de sérum. Le sérum des lapins ainsi préparés, injecté dans le péritoine, protège le cobaye contre les effets de l'injection péritonéale de sérum d’Anguille.

Mais WEHRMANN (1897) a immunisé aussi des lapins par injections répétées de petites doses dans les veines.

MM. L. Camus et L. GLEY (1898) ont vacciné également des lapins et des cobayes par le même procédé. Ils ont ensuite cherché si par d’autres moyens on ne réussirait pas à conférer cette même immunité in vivo et in vitro.

Tu. Temsrovrren (1899) reprenant l’immunisation par le sérum frais arrive aux conclusions suivantes : 1° les lapins, les chiens, les chèvres et les pigeons se laissent facilement immuniser contre le sérum d’Anguille ; il est infiniment plus difficile d’immuniser les cobayes ;

2° Dans le sang des animaux immunisés apparaît une antitoxine qui neutralise in vitro l’action hémolysante de la toxine sur les globules du lapin, et, injectée dans le sang avec la toxine, l'empêche d'exercer son action nuisible ;

3° Cette antitoxine apparaît très tôt dans le sang : déjà après 2 à 4 injections, chez le lapin elle est à ce moment à son maximum ; sa valeur en général n’est pas grande ; elle diminue progressivement quand on prolonge l’immunisation, bien que la résistance des sujets contre la toxine augmente ;

h° La résistance des globules du lapin augmente également, ce qui prouve qu'elle n’est pas due à une action protectrice de l’antitoxine, car, réciproquement, quand la valeur antitoxique est grande, la résistance globulaire peut se montrer diminuée.

Immunisation par le sérum chauffé. — En 1896, C. Paisazix à établi les propriétés immunisantes que possède le sérum d’Anguille, chauffé à 58° pendant 15 minutes, vis-à-vis du venin de Vipère.

MM. Cawus et GLey, en 1898, essayèrent si le sérum chauffé vaccinait contre sa propre action. Leurs premières recherches n'étaient guère fsvorables à l'existence indépendante d’une antitoxine dans le sérum d’Anguille, car ils considéraient surtout son action par rapport aux globules en employant des doses trop faibles de sérum. Ils reconnurent, toutefois, et déjà, que si « on répète à de courts intervalles de 1 ou 2 jours les injections de sérum chauffé, on obtient une immunisation plus franche le sérum, dans ce cas, acquiert la propriété antiglobulicide ».

Ce fait était considéré par les auteurs comme une exception.

Les occasions qu’ils eurent par la suite, au cours de leurs nombreuses expériences de revenir sur la question les amenèrent à penser que leur première opinion avait été un peu trop absolue. Ils donnèrent même une

preuve indirecte de la coexistence et de l'indépendance dans le sérum d'Anguille de la substance hémolytique et de la substance antihémol;tique, par la comparaison de l’action de la chaleur sur ce sérum et sur celui du chien. Ces deux sérums sont très hémolytiques pour les globules de lapin et de cobaye ; le chauffage, qui fait disparaître l’action hémolytique du sérum de chien, n’y révèle aucune action antihémolytique ; tandis que le sérum chauffé d’Anguille est capable d'empêcher l’action hémolytique du sérum de chien sur les globules du cobaye : 3 ou 4 gouttes de sérum chauffé d’anguille empêchent l’action de 1 goutte de sérum de chien.

La chaleur ne peut donc, à elle seule, transformer l'hémolysine en antihémolysine, et il n’y a pas lieu de penser qu’elle puisse faire pour le sérum d'Anguille ce qu'elle ne fait pas pour celui de chien.

L'antihémolysine contenue dans un volume déterminé de sérum ne suffit évidemment pas à neutraliser l’hémolysine qui s’y trouve aussi ; car il est certain que s’il en était ainsi, on n'aurait jamais décelé d’hémolyse ; il est donc nécessaire d'employer pour la mettre en évidence dans un sérum chauffé, une plus grande quantité que celle du sérum hémolytique ; cette action antihémolytique n'est jamais non plus aussi intense que celle du sérum des animaux immunisés.

Enfin, il peut arriver également que les différences ou les résultats douteux puissent tenir aux variations individuelles normales ou pathologiques survenant dans le sérum, comme on sait qu'elles surviennent fréquemment dans les venins.

Le sérum des animaux qui ont été accoutumés par le sérum entier est à la fois antitoxique, antimyotique et antihémolytique, tandis que si l’immunisation a été faite avec le sérum chauffé, les globules n'ont acquis aucune résistance propre au sérum d’Anguille.

Immunisation par le sérum de Hérisson. — C. Paisarix et BERTRAND ont vu que le sérum de hérisson immunise les animaux contre le venin de Vipère, et ont fait remarquer qu'il importe de détruire préalablement l’action toxique de ce sérum par un chauffage à 58-60°.

MM. Camus et GLey ont recherché s’il subsisterait aussi après ce traitement une substance immunisante contre l’action toxique du sérum d'Anguille. Leurs expériences sont en petit nombre, et ils ont vu qu'il faut au moins 8 à ro cc. de sérum chauffé pour que l’action immunisante se dessine chez le cobaye quand on emploie la dose foudroyante de sérum d'Anguille (soit environ o ce. 05 pour un sujet de 500 grammes).

Ces essais montrent que l’action immunisante du sérum de hérisson, bien que réelle, n’est pas très intense, comme Paisazix et BERTRAND l'ont d’ailleurs observé vis-à-vis du venin de Vipère.

Immunisation par le sérum antivenimeux. — MM. Gzex et Camus n’ont fait qu'un petit nombre d'expériences avec le sérum de l’Institut Pasteur de Lille, préparé par A. CALMETTE, et qui est surtout un sérum