LAPIN SOURIS

Extrait, 0 em 014 — 0 mgr 181

Sérum d'Epeire 0 em°,03 — 2 mgr 04

ARANEILYSINE 293

Dans les cas ci-dessus, l’action toxique des matières organiques du sérum est environ 11 fois moins intense pour le lapin, et 2,7 fois moins pour la souris, que celle des matières organiques de l’extrait du corps tout entier ; WarBuM fait remarquer qu'il est donc peu probable que l’épeiratoxine se forme dans le sang et qu'elle se forme plutôt dans un ou plusieurs organes abdominaux, d’où elle est versée dans la circulation.

B. Action hémolytique. — D'après les recherches de R. Lévy, l’araneilysine apparaît comme une toxine comparable aux hémolysines à deux composants, car, rendue inactive vis-à-vis des globules de bœuf par l’action de la chaleur ou des acides, elle peut être réactivée soit par l'addition d’araneilysine intacte assez diluée pour n'être plus active par elle-même, soit par l’addition d'œufs d’un Epeiride, Meta segmenta, œufs qui, employés seuls, ne sont pas hémolytiques. R. Lévy parle donc de sensibilisatrice d’Epeire, relativement résistante à la chaleur, ayant les caractères d’une albumine et de complément de Méta, sensible à la chaleur et détruit par les acides. Ce complément doit être rapproché de l’araneilysine dont i! affecte la localisation ; leur composition les rapprocherait tous deux des globulines. Le « complément d’Epeire » n'ayant pu être séparé, et d’autre part, la sensibilisatrice d'Epeire employée comme antigène donnant les mêmes anticorps que l’araneilysine intacte, l’auteur même fait remarquer qu'il convient de faire une réserve sur la réalité de l’existence du couple hémolytique proposé pour l’explication des faits.

WazguM considère l’araneilysine comme une hémolysine simple à action directe.

R. Lévy a recontré l’araneilysine chez 8 Epeirides : Epeira diade. mata, Clerck ; Ep. cornuta, Clerck ; Ep. quadrata, Clerck ; Ep. umbratica, Clerck ; Ep. redii, Scop ; Ep. labyrinthea, Hentz ; Zilla X-notata, Clerck ; Singa hamata, Clerck et chez un Théridiide, Theridium lineatum, Clerck.

L'auteur a trouvé aussi des compléments analogues à ceux de Meta, chez 6 Epeirides : Meta segmenta, Clerck ; Mangora acalypha, Walck ; Tetragnatha montana, E. Sim ; et chez trois Linyphia ; L. triangularis, Clerck ; L. montana, Clerck et L. hortensis, Sunder.

Les sensibilisatrices et les compléments paraissent dans tous les cas interchangeables.

Les Epeirides et les Théridiides constituent d’après ce qui précède, un groupe isolé des autres Aranéides au point de vue des propriétés hémolytiques.

Chez les Agélénides, la Tegeneria atrica est, d’après les recherches de R. Lévy, la seule espèce dont les œufs, et eux seuls, possèdent une hémolysine simple, différente par conséquent de l’araneilysine type. Elle s’en distingue aussi par la nature de ses effets toxiques : les troubles respiratoires qu’elle produit semblent moindres. Par contre, il y a excitation violente des centres nerveux, surtout des centres moteurs. L'animal

fait des bonds désordonnés. À l’autopsie, on ne constate que de la congestion pulmonaire et peut- Être une tendance plus grande du sang à Ja coagulation.

Avec la dose qui correspond à 0 œufs, le lapin meurt en une minute avec convulsions et un cri ; avec 12 œufs (pesant chacun r millig. 35), 1l développe la symptomatologie précédente, mais guérit.

Chez la souris, par injection intrapéritonéale, on observe une narcose progressive avec parésie et dyspnée ; la mort survient déjà pour la dose de 1/5 d'œuf:

Za toxicité et le pouvoir hémolytique des organes abdominaux semblent aiier de pair : ainsi, les œufs de Tegeneria atrica, qui sont hémolytiques, sont, comme nous venons de le voir, aussi très toxiques, tandis que les œufs non hémolytiques de Tegeneria parietina sont dépourvus de toxicité.

Les œufs d’un certain nombre d’araignées n'ont ni propriétés sensibilisantes, ni propriétés complémentaires. Parmi elles, on trouve le Pheridium denticulatum, Walck ; la Tegeneria agrestis, Walck ; la Tegeneria parielina, Fourcroy ; ce qui montre qu'entre les espèces d’un même genre, il peut exister de grandes différences au point de vue des propriétés hémolytiques. C’est un fait qui est à rapprocher de celui que nous avons observé relativement au mucus cutané, inoffensif chez la Rana temporaria, et au contraire très toxique chez l'espèce voisine, Rana esculenta.

La toxicité des œufs possédant une action hémolytique complémentaire est très variable ; c’est ainsi que les œufs de Meta segmentata sont très toxiques pour la souris par injection dans le péritoine, et ne le sont qu'à haute dose pour le lapin par la voie intraveineuse : ils produisent alors une intoxication, avec mort tardive et assez brusque ; que ceux de Tetragnata montana ne sont pas toxiques pour la souris; que ceux de Linyphia montana et L. triangularis, très toxiques pour la souris, ne le sont à aucune dose pour le lapin.

WazBum a fait des constatations analogues avec |’ epciralysine, qu'il considère comme identique à l’arachnolysine de Sacs.

Etudiant l’hémolyse in vitro, il trouve que l’epeiralysine dissout les globules des animaux suivants : rat, lapin, singe, poule, souris, bœuf, ote, agissant le plus fortement sur ceux du rat, et le plus faiblement sur ceux de l’oie. Les globules du pigeon sont peu sensibles ; ceux de cheval, porc, chien, cobaye et grenouille sont tout à fait réfractaires.

Avec l’hémolysine d’Araneus erythromela et d’A. amaurophyla, -de Latrodectus mactans. Houssay a, d'autre part, obtenu les résultats suivants :

très sensibles : lapin, rat blanc, bœuf, viscache. sensibles : chèvre, poule, homme, pigeon.

Hématies : habituellement résistants : porc, chien, cobaye. toujours résistants : mouton, cheval, grenouille, crapaud, Xenodon merremii, couleuvre.

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L'activité des hémolysine est telle, d’après Houssay, que r cmc. d’une solution d'œufs à 1/1000 dissout 1 cme. d’une émulsion à 5 % de globules de rat ou de lapin.

Wazeum a observé souvent ce phénomène déjà connu pour d’autres hémolysines, c’est-à-dire l’inactivité de très fortes doses ; ce résultat s'obtient surtout avec les extraits frais d'araignées qu'on vient de sacrifier ; il a été confirmé aussi par Houssay, lequel n’a jamais constaté d’augmentation du pouvoir hémolytique dans les jours qui suivent la préparation de l’araneiïlysine, et a montré en outre qu'une forte dose, correspondant à 100 œufs par exemple, au lieu de 2 à 5, empêche l’hémolyse.

EscoMEL (1918-1919) a constaté le pouvoir hémolytique des œufs de Glyptocranium et du Latrodectus mactans, pouvoir plus élevé pour le sang de l’homme que pour celui du cobaye. En partant d’un œuf par centimètre cube de suspension de globules à 5 %, il faut arriver jusqu’à 10 œufs pour obtenir une hémolyse appréciable. Ce même auteur a en outre constaté que le sang des cobayes qui ont été immunisés contre la toxine des œufs de Glyptocranium résiste aussi à son action hémolytique et coagulante ; il s’est formé pendant l’immunisation de l’antihémolysine et de l’antithrombine.

L’antihémolysine est spécifique ; elle n'empêche pas l’hémolyse par Je venin du Latrodectus mactans, et inversement. L’antithrombine est également spécifique.

ACTIVATION HÉMOLYTIQUE DES VENINS DE SERPENTS PAR LES OŒUFS D'ARAIGNÉES

D'après les recherches de R. Lévy, la plupart des œufs d’araignées, hémolytiques ou non, donnent avec le venin de cobra des mélanges hémolytiques. Ce fait est attribué par l’auteur a une action catalytique du venin de cobra sur les phosphatides du vitellus d’araignée, d’après la théorie de DELEZENNE.

Parmi les œufs éprouvés, les seuls qui ne donnent pas d’hémolysine sous l’influence du venin appartiennent à l’Epeira diademata, à la Meta segmentata et à la Linyphia triangularis, œufs qui contiennent de l’araneilysine ou des compléments voisins.

La résistance des œufs d’Epeire à l’action diastasique du venin de cobra n’est pas due à une propriété anticobra de ces œufs.

Les œufs de Tegeneria atrica qui contiennent, d’après Lévy, une hémolysine différente de l’araneilysine, se montrent sensibles à l’action du venin de cobra.

Cette différence dans la manière de se comporter vis-à-vis du venin justifie le groupement homogène représenté par les Epeirides et les Théridiides.

D'après les récentes recherches de Houssay (1916-1917), les œufs d’Araneus amaurophila, d’Araneus erythromela, de Latrodectus mactans et de Polybetes pythagorica, hémolytiques pour les trois premières espèces et inactifs pour la dernière, contiennent des susbstances solubles dans l’éther, indépendantes des araneïlysines, et qui, en présence des venins de Cobra, de Crotale et de Lachesis, produisent l’hémolyse des globules rouges, ceux de mouton par exemple, résistants à ces venins et à ces œufs employés séparément. j

L'indépendance de ces composés hémolytiques activants et de l’araneilysine est montrée par ce fait que ce sont précisément les œufs non hémolytiques du Polybetes qui sont les plus activants. D'ailleurs HoussAy pense que ce n'est pas là la seule propriété des extraits indépendante de leur pouvoir hémolytique : la teinte brune que prend l’hémoglobine des globules dissous ou résistants est observée aussi avec l’extrait éthéré des œufs ; tous les œufs hémolytiques ou non, de même que les extraits d’organes en général, sont capables de transformer la prothrombine en throm.bine active en présence des sels de calcium.

VACCINATION ET SÉROTHÉRAPIE

KoBErT (1901), dans ses expériences avec la toxine de Latrodectus erebus And., constate que le chien et le chat soumis à plusieurs injections faibles acquièrent une résistance manifeste aux doses mortelles Il vaccine également un chat contre la toxine d’Epeira.

SACHS (1902) montre que l’arachnolysine se comporte comme une toxine en préparant au moyen du cobaye, insensible d’ailleurs à l’action hémolytique, un sérum antihémolytique : o cc. oo25 de sérum de cobaye suffisent pour empêcher l’hémolyse de o cmc. 05 de sang de lapin, au contact de la dose minima d’hémolysine qui hémolyse complètement.

BrecLoxowskt (1907) immunise un lapin par des injections répétées d’arachnolysine (injections tous les 3 ou 4 jours), et éprouve de temps en temps les pouvoirs antihémolytique et antitoxique du sérum. A la 5° injection de 1/20 de cmc, le sérum empêche l’hémolyse de r cmc de sang de lapin, dilué à 5 %.

À la 6° injection, la dose minima antihémolytique est de 1/40 de cmc. ; la dose antitoxique minima contre deux fois la dose mortelle est de 1/2 cmc.

À la 8° injection, la dose antihémolytique est toujours 1/40 de cmc ; la dose minima antitoxique est de 1/30 de cmc.

Aüïnsi il y a, dès le début de la vaccination, manque de parallélisme entre la croissance des propriétés antitoxique et antihémolytique du sérum ; la première continue à croître alors que la seconde n’augmente plus.

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Au début, le sang du cobaye immunisé se montre normal au point de vue de la résistance à l’hémolyse par l’araneilysine, même quand le sérum a atteint son maximum d’action antihémolytique. Vers la fin, la résistance augmente, et il faut décupler la dose d’araneilysine pour obtenir un même degré d'hémolyse.

D’après WazBum (1915), l’épeiratoxine peut être considérée comme antigène, son injection donnant lieu à des anticorps spécifiques. Les sérums normaux de chèvre, mouton, cheval, bœuf, lapin, cobaye, pigeon ne neutralisent pas l’action de l’épeiratoxine. Le sang des moutons, chèvres, lapins et cobayes, auxquels on administrait depuis un mois une pâte d’épeires broyées et de biscuits pulvérisés, ne présentait pas une proportion appréciable d’antitoxine ; l’immunisation par la voie gastrointestinale ne donne donc aucun résultat d'ordre pratique.

Les sérums antitoxiques obtenus par la vaccination des animaux peuvent protéger les animaux neufs contre les araneiïlysines ; employés préventivement leur action ne s'étend pas au delà de 3 ou 4 jours ; employés curativement, ils ne sont effectifs et ne préviennent la mort des lapins que s'ils sont administrés par la voie intraveineuse quelque temps avant le début de la période convulsive ; sinon ils ne font que retarder l'issue fatale.

En immunisant des lapins avec un extrait d’Epeires préparé pendant les mois d'été, c’est-à-dire avec des individus non hémolytiques, WarBum a constaté ce fait très intéressant de la formation d’antihémolysine dans le sérum des animaux traités. Il semble donc que le pouvoir immunisant soit inhérent aux extraits d'Epeire et que le pouvoir toxique fasse seul défaut pendant une partie de l’année. Il semble bien aussi que les substancs immunisantes soient indépendantes des substances toxiques, ainsi que C. Pmisazrx l’a démontré pour le venin de vipère aspic.

Les expériences d’immunisation réalisées par R. Lévy en 1916, portent aussi sur des lapins, préparés de la manière suivante :

1° Avec des œufs d’Epeira diademata ;

2° Avec des œufs de Meta segmentata ;

3° Avec la sensibilisatrice d'Epeire (préparée à l’acide chlorhydrique et dialysée).

Les résultats relatifs aux trois catégories de sérums obtenus par ces substances employées comme antigènes sont résumés ainsi qu'il suit par l’auteur :

1° Le sérum obtenu par les injections d'œufs d’Epeira diademata agit contre tous les liquides où interviennent soit l’araneilysine intacte, soit la « sensibilisatrice d'Epeire ». Quantitativement, il semble être spécifique de ces deux substances ;

2° Le sérum obtenu par inoculations d’œufs de Meta est rigoureusement spécifique qualitativement et quantitativement des œufs de Meta segmentata ; L

3° Le sérum obtenu par la sensibilisatrice d’Epeire agit qualitative-

ment comme s'il avait été préparé avec l’araneilysine pure. Quantitativement, il n’est spécifique ni de l’une, ni de l’autre substance.

Quelles conséquences tirer de ces résultats au sujet des substances antigènes employées ?

D'abord en ce qui concerne le « complément d’Epeire » on ne le connaît qu'à l’état d’araneilysine diluée, de sorte que l’on ne sait jamais si l’un des sérums agit contre le complément ou contre l’araneilysine entière ; on ne sait donc pas non plus si ce complément peut donner des anticorps spécifiques.

Le « complément de Meta », bien qu'il se rapproche de l’araneilysine par toutes ses propriétés a cependant comme antigène une individualité bien tranchée : quel que soit le mélange dans lequel on essaie de le neutraliser, il ne peut l'être qu’au moyen du sérum préparé avec les œufs de Meta : dans ce cas la neutralisation est strictement quantitative.

La « sensibilisatrice d’'Epeire » a une individualité beaucoup moindre ; le sérum qu'elle donne agit aussi bien contre l’araneylisine que contre la sensibilisatrice pure. Ces deux dernières substances ne semblent pas garder leur individualité dans les divers mélanges ; le complément de Meta en garderait une beaucoup plus grande.

De sorte que s’il apparaît que l’araneilysine est une hémolysine à mécanisme complexe, la constitution sensibilisatrice+ complément ou l'existence du couple hémolytique, reste hypothétique.

R. Lévy a vu d’autre part, que le sérum normal de lapin a sur les diverses préparations hémolytiques employées une action retardatrice ou accélératrice, suivant le mélange et la quantité du sérum employé.

Ce fait est à rapprocher de l’action favorisante des sérums normaux sur l’action des œufs de Meta et de la « sensibilisatrice » sur le sang de rat.

Jamais l’addition de sérum neuf ne rend hémolytique un liquide qui ne l’est pas ; elle n’exerce parfois une action adjuvante ou En que lorsque le liquide est par lui-même hémolytique.

Houssay (1916), a de même immunisé des lapins avec des toxines d'araignées. Il a observé que le sérum anti-Latrodectus est rigoureusement spécifique ; les sérums anti-Araneus erythromela et anti-Araneus amaurophyla sont réciproquement actifs contre l’action des deux araneïlysines qui ont servi à les obtenir ; mais n’ont aucune action contre celle de Latrodectus.

Les mâles d’Araneus erythromela et les espèces non hémolytiques ne fournissent pas chez les lapins préparés, de sérum antihémolytique.

L'hémolyse n’est pas empêchée par les sérums antivenimeux.

Houssay a vu enfin que la neutralisation de l’hémolysine par l’antihémolysine s'établit d’une manière progressive.

EscomEz n’a pu immuniser des cobayes avec les extraits d'œufs hémolytiques de Latrodectus mactans ; à chaque nouvelle injection les sujels présentaient des œdèmes et des escarres, et à celle de 60 œufs

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mouraient en 3 jours au lieu de 5 à 6 qu'ils mettent lorsqu'ils reçoivent en une seule fois cette dose. Ces résultats sont donc en désaccord avec ceux de Houssay.

Mais par contre, EscomErz (en 1918), par le même emploi de doses faibles et croissantes d'extrait d'œufs de Glyptocranium est parvenu à vacciner le cobaye. Les injections, espacées d'une semaine, correspondant à D, 10, 15 œufs, les dernières à une centaine d'œufs ; elle ne déterminaient plus que de la douleur.

De tels cobayes préparés avec l'extrait d'œufs de Glyptocranium ne résistent pas à l’inoculation d'extrait d’œufs de Latrodectus mactans.