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Le sang est-il coagulé ou reste-t-il fluide chez les animaux qui succombent au venin ? Il semble qu'il suffit d'ouvrir le cœur et les gros vaisseaux pour répondre à cette question. Cependant, c’est un des points qui ont été le plus controversés dans la physiologie de l’envenimation. Les opinions contraires ont été exprimées, chaque observateur s'appuyant sur des faits exacts, mais qu'il généralisait d’une façon prématurée, ou déduisant de l’action in vitro des conclusions sur ce qui se passe in vivo.

Dans cet exposé, où la question théorique est encore en voie de renouvellement, nous rapporterons les faits à peu près dans leur ordre chrono. logique et résumerons ensuite l’état actuel résultant des connaissances acquises sur l’action des venins dans le phénomène de coagulation soit in vivo, soit in vitro.

Historique. — Les premières observations relatives à la coagulation par les venins ont été faites à propos du venin des Vipéridés et particulièrement de ceux de la Vipère aspic et du Crotale.

Déjà, en 1737, Georrroy et HüNauLD avaient constaté que, chez le pigeon, l’oie, le coq d’Inde, le chat et le chien morts de la morsure de la Vipère aspic, il n’y a point de coagulation dans le sang, mais au contraire tous les signes de fluidité. Mean, quelques années après (1750), fit le premier des expériences sur le sujet : en réunissant une demi-once de sang des animaux précédents à 5 à 6 gouttes de venin de Vipère, il ne put observer de changement ni dans la couleur, ni dans la consistance du sang, et en conclut que le venin de Vipère n’a aucune action sur le sang de l’animal mordu. FONTANA (1781) répète l’expérience de Meap, et au moment où le sang se mélange au venin, il l’examine au microscope; il n’observe « aucun mouvement d'aucune espèce ; il ne voit se faire aucune dissolution du sang, aucun coagulum ; les globules restaient figurés comme ils le sont ordinairement, le sang se maintint également coloré ». Mais il se garda bien d'adopter la conclusion de Mean : « Nous ne savons que peu ou rien, dit-il, du moins avec certitude et sans risquer de nous tromper, au delà de ce que l'expérience seule démontre. » Aussi pour résoudre la question opéra-t-il d’une autre manière : au moyen d’une petite seringue en verre, à extrémité capillaire et recourbée, il introduisait une forte dose de venin, mélangé d’eau, dans le tronc de la jugulaire de forts lapins en y pénétrant par une branche latérale : les lapins mouraient d’une manière foudroyante en moins de deux minutes avec des convulsions. Chez tous les lapins ainsi traités, il trouva le sang coagulé et noir dans ie cœur et dans les gros vaisseaux; les coronaires étaient gonflées et livides, et des taches hémorrhagiques existaient sur le cœur. L’exactitude de ces résultats demeure absolue ; mais oubliant le principe qu'il avait formulé, Fonrana admet que le venin agit de la même manière, et coagule le sang de tous les animaux.

Cette opinion de Fonrana fut longtemps adoptée sans controverse ; mais moins d’un siècle plus tard, des expériences furent reprises, à intervalles plus ou moins éloignés, avec divers venins et en différentes contrées.

En :854, Brainarr, en Amérique, montre que chez les animaux qui meurent rapidement de la morsure du Crotale, on trouve à l’autopsie le sang coagulé, mais si la survie se maintient quelque temps, le sang au contraire reste liquide dans les vaisseaux, constatation fort importante, car elle implique dès ce moment l’un des facteurs du phénomène, à savoir la dose de venin qui parvient à un moment donné dans la circulation.

Quelques années après, en 1860, Weir-Mrrenezz confirme les observations de BRaINARD à propos du venin de Crolale, tandis que Harror», à Melbourne, vers 1867, signale l’incoagulabilité qui suit l’inoculation du venin de quelques Colubridés d'Australie (Pseudechis, Notechis.….).

En 1886, Weir-Mrrenezz et RercHerT, dans leur important travail sur le venin de Crolalus adamanteus montrent les propriétés anticoagulantes in vitro de ce venin ainsi que du venin d’un autre Crotalidé d'Amérique, l'Ancistrodon piscivorus ; d'autre part, ils signalent aussi l'accroissement de coagulabilité in vivo consécutif à l’inoculation d’une forte dose de venin.

Dans son important ouvrage sur les Thanatophides de l'Inde, paru en 1874, FAYRER rapporte des cas cliniques et des faits d'expérience. Il observe que généralement les venins des Vipéridés (Daboia, Echis carinatus, Lachesis monticola) déterminent l’incoagulabilité du sang chez l’homme et les mammifères, tandis que les venins des Colubridés Protéoglyphes (Naja tripudians, Naja bungarus, Bungarus cæruleus, quelques Hydrophiinés), n'influent pas sur la coagulation. Dans aucun cas, BRUNTON et FAyRER (1875) n'observent de coagulation intravasculaire chez le poulet inoculé avec Je venin de Daboia. Ils constatent ensuite la fluidité du sang chez les hommes morts de la morsure du Cobra, comme chez ceux qui succombent tardivement à celle des Vipéridés. ÿ

Simultanément, en Europe, Pancerr et Gasco (1875), qui comparent les venins de Cerastes cornulus et de Naja haje, n'observerit aucune différence dans la coagulabilité du sang des animaux inoculés.

À quelques années de là, en 1883, A.-J. Warz, examinant le sang de l’homme et des animaux morts de la morsure du Cobra, trouve le sang fluide chez le premier, coagulé chez les seconds, et constate, d’autre part, « que l: sang des animaux succombant au venin de Daboia russelli ne coagule jamais, hormis les cas dans lesquels la mort survient instantanément avec des convulsions, ou encore quand elle se produit après un long épuisement » Wazz confirme ainsi les résultats contraires obtenus par F4ayrERr avec le venin des Vipéridés et celui des Colubridés des Indes.

En Europe, Frokrisrow (1888) confirme pour les venins de Vipera Ammodytes et V. berus l’action coagulante établie par Fonrana pour V. aspis, tandis que ALBERTONI (1888) soutient que ce venin, injecté dans les veines, rend le sang incoagulable. A. Mosso arrive au même résultat : dans ses expériences faites sur le chien, il constate que le sang des animaux tués par le venin de Vipère, a perdu la faculté de coaguler. Pas plus que celle de Fonra, cette conclusion ne peut être étendue à tous les Mammifères : sous l'influence du venin directement introduit dans les veines, le sang du lapin subit une coagulation intra-vasculaire, alors que dans les mêmes conditions le sang du chien devient incoagulable. I] y a là des différences qui, toutes conditions étant égales, tiennent, suivant les expériences ct l'interprétation de C. Puisa- LIx, à des varialions physiologiques de l’espèce.

Dans ses expériences sur le venin des espèces de l’Amérique du Sud, DE LACERDA (1838-1885) mentionne que chez les animaux morts par Je venin de Bothrops jararaca (Lachesis lanceolatus) on trouve le sang fluide. Chez ceux qui meurent par le venin de Crolalus terrificus, ou bien le sang perd sa coagulabilité (chien), ou bien la conserve (oiseaux, petits mammifères). Lacerpa attribue l’incoagulabilité du sang à l’altération des globules par une action fermentative des venins.

En 1884, Rourri, à propos de l’autopsie d'un homme ayant succombhé à la morsure de Vipera aspis, nota l’incoagulation du sang. HerpeNscHIL», en 1886, observe que l'injection de venins coagulants dans les veines produit une augmentation fugace de la coagulabilité (phase positive), puis bientôt et peu à peu de l’incoagulabilité (phase négative). Il admet que les leucocytes

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ont perdu la faculté de laisser exsuder leur fibrin-ferment, bien que le plasma ne soit pas modifié et puisse recevoir le fibrin-ferment de leucocytes normaux mis en contact avec lui.

En 1893, C.-J. Marin, à Sydney, reprend l’étude des venins des Colubridés d’Australie, commencée par Harror», et apporte des données importantes au sujet de la coagulation du sang.

Il constate que les fortes doses de venin de Pseudechis porphyriacus et de Notechis sculatus, injectées dans les veines de chiens, de chats et de lapins (o milligr. 15 ou plus par kilogramme) augmentent la coagulabilité du sang jusqu’à produire une thrombose vasculaire, plus ou moins étendue suivant la dose. À dose faible, la coagulabilité est aussi accrue, mais pendant un temps très court (2 minutes), temps après lequel on n'’observe plus que l’incoagulabilité. Le phénomène présente donc, ainsi que l’a déjà signalé HernenscuiLr pour les venins des Vipéridés, deux phases : l’une, positive de coagulation ; l’autre, négative d’incoagulabilité. Cette dernière correspond, d’après l’auteur, à la période de destruction des globules.

Le venin des C. Protéroglyphes d'Australie se comporte ainsi vis-à-vis de la coagulation, comme le venin des Vipéridés.

C.-J. MARTIN à vu aussi ce fait intéressant, à savoir qu’une dose de venin qui, injectée la première serait coagulante, devient inefficace si on l’inocule après une dose faible qui a déjà produit l’incoagulabilité.

En ce qui concerne les modifications produites in vivo, C.-J. MARTIN suppose que la phase positive est due à la production de nucléo-protéides aux dépens des éléments figurés de l’endothélium vasculaire. Mais il abandonnera plus tard cette opinion à la suite d’une étude plus détaillée sur la coagulation par divers venins.

En 1895-1898, CunninGHam confirme que l'injection de petites doses de venin de Daboia, de même que la morsure chez l’homme, rendent le sang incoagulable, fait confirmé plus tard par RoGERs (1903-1904), par ARTHUs, RacxAT (1912) ; il observe aussi le pouvoir anticoagulant in vitro du venin de Cobra : le sang, qu'on reçoit dans une solution concentrée de venin, reste fluide d’une façon permanente ou se prend en une masse molle et gélatineuse de laquelle il ne sourd aucun sérum. KanrHAcKk, vers le même moment (1896), confirme ces observations de CunniNGnam. En outre, il étend l’examen de la coagulation du sang aux sujets vaccinés ; il ne trouve pas d’action inhibitrice du venin de Cobra sur la coagulation à la dose qui suffit exactement à rendre incoagulable le sang normal. I] voit également que l'addition suffisante de sérum antivenimeux neutralise les effets hémolytiques et anticoagulants du venin de Cobra sur le sang in vitro.

En 1898, Srepnens et Myers, à l’instigation de Kanruacx, continuent ces recherches et confirment l’action anticoagulante in vitro du venin de Cobra. Les auteurs opèrent comme il suit : le sang est conduit directement des artères dans la solution venimeuse d'essai, et les résultats sont observés à certains intervalles. Les auteurs constatent que si, dans r cc. de la solution venimeuse, mélangée à r cc. de sang de cobaye, il y a plus de 10 milligrammes de venin de Cobra, le sang devient noir et ne coagule pas. Les doses variant de 1 à 5 milligrammes retardent seulement la coagulation, qui se produit anormalcment, en donnant un caillot mou et noir, duquel il ne s'échappe aucun sérum. Avec les doses inférieures à un demi-milligramme, la coagulation se produit et le caillot laisse exsuder un sérum coloré ; enfin, la dose de o milligr. 002 est complètement inactive.

Avec les doses de o milligr. 1 et o milligr. 2 de venin pour 1 cc. de sang, les auteurs observèrent le pouvoir anti-inhibiteur du sérum anticobra et arrivent aux conclusions suivantes

1° Le venin de Cobra retarde ou empêche la coagulation du sang in vitro ;

2° Cette action inhibitrice est neutralisée in vitro par le sérum antivenimeux spécifique ;

3° Le sérum antivenimeux mélangé au sang normal en retarde la coagulation ;

4° Pour une certaine dose (o milligr. 1), la mesure de la neutralisation in vitro, utilisant la coagulation comme réaction d'essai, représente aussi la mesure de la neutralisation in vivo chez le cobaye ;

5° La neutralisation du venin par l’antivenin in vitro n’est ni d'ordre vital, ni d'ordre cellulaire, mais d'ordre chimique.

En 1899, C. Prisarix étudie comparativement l’action du venin de Vipère aspic sur le chien et le lapin ; chez un chien pesant 4 à 5 kilogrammes, la dose de : milligr. 5 de venin de Vipère introduite dans la veine jugulaire détermine l’incoagulabilité déjà 5 à 6 minutes après l'injection. La dose moitié moindre inoculée dans la veine de l'oreille d’un lapin de 1.500 à 2.000 grammes, foudroie l’animal en une minute par coagulation intravasculaire à peu près généralisée (veine cave, veine porte, cavités cardiaques, aorte, artère pulmonaire). Dans quelques cas, on ne trouve pas de caillot dans la veine sus-hépatique. Il arrive aussi que le sang qui s'écoule du ventricule droit reste incoagulable pendant une demi-heure à une heure ; il semble, d’après cela, que la réaction anticoagulante se produit dès le début, mais insuffisamment pour empêcher la coagulation. Aussi chez les animaux qui, par suite de vaccination incomplète, survivent de deux à vingt heures, le sang recueilli dans le cœur reste pendant quelque temps incoagulable. Il est à remarquer que dans ces derniers cas les globules rouges ont été fortement détruits, comme en témoignent l’hémoglobinurie et les selles sanguinolentes qui accompagnent l'envenimation. .

Ce dernier fait est contraire à la théorie de GC. DELEZENNE, qui explique la différence observée chez le chien et le lapin par une sensibilité plus grande des globules rouges du lapin à l’action destructive du venin.

Cet auteur émet en effet (1899) une théorie de l’action coagulante sur le sang par diverses substances qu'il applique aussi à l’action des venins d'après DELEzENNr, la destruction des globules blancs et des globules rouges, sous l'influence de certaines substances (peptone, venins), mettrait en liberté des substances coagulantes et anticoagulantes dont l'influence sur la coagulation serait réglée par le foie (qui retiendrait la substance coagulante), et varierait suivant que les globules rouges sont plus ou moins attaqués et détruits. A l’appui de cette théorie, G. DELEZENNE apporte des faits intéressants, mais qui ne semblent pas pouvoir être généralisés.

C. Prisazix, qui compare aussi le venin de Vipère aux autres substances incoagulantes (peptone, extraits de sangsue), arrive à cette conclusion qu'’'aucune de ces substances injectées préventivement dans les veines ne peut empêcher les effets des autres sur la coagulation ; il faut en conclure, dit l’auteur, que ces substances agissent sur le sang par un mécanisme différent, ou bien que, si le processus physiologique est le même, les effets en sont complètement modifiés par l'intervention de phénomènes antagonistes.

En 1902, il reprend la question du venin de Vipère sur la coagulation du sang de chien et de lapin, et recherche ce qui se passe in vitro quand on aspire directement des veines au moyen d’une seringue contenant de l’eau salée à 1 pour 1.000 un égal volume du sang de ces deux animaux : à l’inverse du sang de lapin, le sang de chien devient noir, ne rougit plus par agitation et reste complètement fluide et homogène. Le sang de lapin reste rouge et se sépare en deux couches : une inférieure, de teinte foncée, où se réunissent les globules et quelques flocons de coagulum, et une supérieure légèrement teintée en jaune. Pendant plus de deux heures, les globules

rouges restent capables de fixer l'oxygène quand on les agite au contact de l’air, puis ils deviennent plus sombres, comme ceux du chien. À ces différences macroscopiques correspondent des différences microscopiques : les globules rouges du chien disparaissent par l’action du venin et leur hémoglobine se transforme au moins partiellement en méthémoglobine ; les globules blancs résistent longtemps. Avec le sang de lapin, au contraire, on observe que les globules blancs disparaissent les premiers, les globules rouges résistant encore, alors que les Jleucocytes ont déjà disparu ; puis ils se dissoivent à leur tour, et leur hémoglobine s’est transformée en méthémoglobine.

Le venin de Vipère exerce donc une action directe sur la coagulation du sang, et le sens de cette action paraît bien être en rapport avec la résistance relative des deux espèces de globules. Les choses se passent, en effet, comme si la destruction des hématies, avec transformation de l’hémoglobine en méthémoglobine, mettait en liberté des substances anticoagulantes. Si ce phénomène est tardif et consécutif à l’action de la leucolyse, comme il arrive chez le lapin, l’action de la thrombine peut s'exercer jusqu’au moment où les substances antagonistes viennent en entraver les effets.

C’est à l’échidnase du venin de Vipère que Pnaisarix attribue la transformation de l’hémoglobine en méthémoglobine et la mise en liberté des substances anticoagulantes.

En rgo1, Laws fait une importante découverte : il montre que le plasma liquide, auquel on ajoute 1 à 2 pour 100 de citrate de soude, peut être coagulé in vitro par une petite quantité de venin de Daboia. On sait qu’un plasma ainsi décalcifié peut être aussi coagulé par l’addition d’une certaine quantité de chlorure de calcium (CaCl). Le venin de Daboiïa produit donc ie même effet que ce dernier sel. Dans ce cas, ni le fibrinogène, ni la paraglobuline ne manquent, mais il n’y a pas de fibrin-ferment actif en raison de l'absence de sel activant dans le mélange. Ainsi la fonction remplie par le venin introduit est celle d’un fibrin-ferment préformé.

La faible quantité de venin qui suffit à coaguler le plasma citraté montre d’ailleurs que ce fibrin-ferment ne supplée pas les proferments (prothrombine ou thrombogène) vis-à-vis du chlorure de calcium.

En 1902-1903, LamB et Hanna, à Bombay, font, au sujet de l’action in vivo du venin de Daboia, les mêmes constatations que A.-J. Wazz pour ce même venin et que C.-J. Martin pour le venin de Pseudechis.

La mort, quand elle survient rapidement, à la suite d’une injection, est loujours due à une thrombose intravasculaire étendue, et les doses qui produisent la coagulation sont respectivement de o milligr. 1 par kilogramme pour le lapin, par injection intraveineuse, et de o milligr. 4 pour le pigeon par injection sous-cutanée.

Lorsque la dose de venin n'est pas excessive, la thrombose peut être limitée à la veine porte, au cœur droit et aux artères pulmonaires ; dans ce cas, le reste du sang dans l'appareil circulatoire est fluide ou ne coagule que lardivement, en donnant un caillot mou et gélatineux.

Si la dose est insuffisante à produire la thrombose, c’est la phase d’incoagulabilité que l’on observe, parfois tout à fait complète, et cette fluidité est probablement l’un des facteurs importants des symptômes qui se produisent. Les auteurs ont constaté aussi qu’une dose forte coagulante, injectée après qu'une dose faible incoagulante a produit son effet, n’amène pas la coagulation. Le venin de Daboiïa se comporte donc, à cet égard, exactement comme celui de Pseudechis.

Quant au venin de Cobra, que les auteurs étudient comparativement avec le précédent, l'injection dans les veines du lapin ne produit jamais de thrombose, mais au contraire une diminution de coagulabilité d'autant plus marquée que la dose employée est plus forte.

En 1903-1904, Lams donne des détails plus circonstanciés sur l’action du venin de Daboia et celui d’autres Vipéridés et de Colubridés Protéroglyphes, sur la coagulation du sang in vivo et in vitro.

Il montre que les venins de Lachesis gramineus, de Crotalus adarmnanteus, de Pseudechis porphyriacus, de Diemenia tezxtilis et d’Acanthophis antarcticus sont très coagulants in vivo, même à faible dose, celui de Bungarus fasciatus l’étant à haute dose ; et qu'avec tous la mort des animaux inoculés survient par thrombose avec convulsions. Quand la dose injectée n'est pas mortelle, c’est l’incoagulabilité qu’on observe.

In vitro, le venin de Daboia coagule les plasmas décalcifiés, et l’auteur montre qu’un excès de citrate amoiïindrit la coagulation ; il voit également que l’action coagulante du venin est plus rapide et plus prononcée avec le plasma citraté qu'avec le plasma oxalaté. Le venin d’Echis carinatus se comporte comme celui de Daboia. LamB pense que la cause ultime de l’action coagulante”du venin de Daboiïa est sans rapport avec la destruction globulaire et réside plutôt dans quelque réaction encore obscure entre le venin d’une part et les nucléo-protéides ou le fibrin-ferment d’autre part.

Comparativement à l’action du venin de Daboia sur la coagulation du sang in vitro, LAMB (en 1903) a étudié celle du venin de Cobra en employant la même technique : l’action sur le sang ou le plasma décalcifié par le citrate de soude.

Aux sangs citratés incoagulables, Lam ajoute des quantités variables de venin de Cobra : il constate que les doses fortes de 20 et même 30 milligrammes de venin, employé seul, ne produisent pas la coagulation de : cc. de sang citraté ; de plus, les doses de o milligr. 4 et même de o milligr. 1 de venin l’empêchent, quand on ajoute la quantité de chlorure de calcium qui la produit à elle seule.

Ce pouvoir empêchant s'exerce aussi vis-à-vis du liquide d’hydrocèle : celui-ci coagule normalement au contact du plasma citraté ; mais le contact pendant 10 minutes du venin avec ce plasma prévient toute coagulation.

Avec les plasmas citratés, les résultats sont pratiquement les mêmes qu'avec le sang : r milligramme de venin empêche la coagulation de 2 cc. de plasma. LauB constate également que le chauffage à 55° pendant une demiheure diminue sans le détruire le pouvoir anticoagulant du venin de Cobra.

En ce qui concerne le venin de Daboia comme agent anticoagulant, Lams ne put observer aucun effet inhibiteur de la coagulation sur le sang ou le plasma in vitro. Le venin de Daboia à doses modérées ou faibles est cependant, comme ceux de Pseudechis, de Notechis et d’Echis, un anticoagulant énergique in vivo. Toutes les doses essayées, même les très petites, comme o milligr. 000.009, n’ont donné aucune diminution de la coagulabilité, de sorte que la phase négative d’incougulabilité in vivo produite par le venin de Daboia relève d’un processus tout à fait différent de celui que l’on observe avec une dose forle de venin de Cobra, soit in vivo, soit in vitro.

Las a, de plus, constaté ce fait intéressant, à savoir que la présence d'une grande quantité de venin de Cobra dans le plasma citraté n'empêche à aucun degré l’action coagulante du venin de Daboia ; l’action antagoniste apparente de ces venins sur la coagulation ne se neutralise pas par leur mélange in vitro.

Lams montre aussi que la neutralisation du pouvoir anticoagulant par les antivenins est spécifique comme celle du pouvoir toxique : c’est ainsi que le sérum anticobra n'empêche pas la coagulation par le venin de Daboia, qui est prévenue par le sérum spécifique ; de même, pour le venin d’Hoplocephalus curtus (Notechis sculalus), faits qui ont été confirmés par ARTHUS et ses élèves (RACHATT, STAWSKA).

Dans son important travail sur les venins des Colubridés et des Vipéridés

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et leurs antidotes, paru en 1903, L. RocErs constate que les venins de Naja tripudians et d’'Enhydrina bengalensis, et surtout le premier, empêchent la coagulation in vilro. Il observe aussi que les venins coagulants in vivo (Vipera russelli, Bitis arietans, Trimeresurus anamattensis, Bungarus fascialus) peuvent empêcher la coagulation lorsqu'ils sont injectés à faibles doses. Leur pouvoir coagulant est d’ailleurs variable, et suit l’ordre décroissant indiqué ci-dessus.

En 1904, Noc, sous l'inspiration de CaLmerTE, fait des observations analogues à celles de LamB en opérant sur le venin de diverses Vipères du genre Lachesis. IL exuploie les plasmas de lapin ou de cheval, rendus préalablement incoagulables par addition de sels variés ou d’extrait de sangsue. Les solutions employées étaient le citrade de soude à 1 pour 100, l’oxalate de potasse à 0,2 pour 100, le chlorure de sodium à 4 pour 100 et le fluorure de sodium à 0,3 pour 100. Le plasma contenant l’une des solutions précédentes coagulait en 15 à 2o minutes quand la dose de r cc. était mélangée à o cc. 4 à o cc. 6 d'une solution de chlorure de calcium à 0,5 pour 100. Noc trouva que la coagulation survient rapidement quand, à la place de la solution de chlorure de calcium, on ajoute une petite quantité de venin de Lachesis lanceolatus. D'après l’auteur, les venins de presque tous les Vipéridés par lui essayés sont plus ou moins coagulants et, à ce point de vue, se rangent dans l’ordre décroissant suivant : L. lanceolalus, L. neuwidi, L. jararaca, L. jararacuçu, L. riukiuanus (syn. : L. flavoviridis), Daboia russelli.

Les venins de deux espèces d’Ancistrodon (A. contortrix et A. piscivorus) sont tout à fait inactifs.

Les venins des C. Protéroglyphes ordinaires, Naja tripudians, N. nigricollis, Bungarus cœruleus) ne coagulent jamais le sang in vitro, non plus que ce sang mélangé d'extrait de sangsue ou les plasmas décalcifiés.

Noc constate aussi l'influence de la dose de venin sur la coagulation ce sont les doses de 1 à 2 milligrammes qui coagulent le plus rapidement 1 ©Cc. de plasma citraté ; la coagulation est même plus rapide qu'avec le chlorure de calcium.

Au delà de cette dnse, soit par exemple 4 milligrammes pour le venin de Lachesis ou 7 milligrammes de venin de Daboïa, le coagulum formé d’abord se ramollit et finalement se dissout comme on l’observe expérimentalement sur un cube d’albumine soumis à la digestion tryptique. Cette action inhibitrice des fortes doses de venin est düe, d’après Noc et CALMETTE, à l’action protéolytique du venin.

Quant au mécanisme de l’action coagulante, comme le venin produit sur les plasmas une coagulation plus rapide que le chlorure de calcium, Noc pense qu'il agit en activant la mise en liberté de la thrombine. I1 n'exclut cependant pas la possibilité que le venin contienne de la thrombine.

La rapidité avec laquelle se fait la coagulation, comparée à la lenteur de l’hémolyse par le venin de Lachesis (plusieurs heures), rend peu probable, d’après Noc, l'influence de la destruction globulaire dans la coagulation.

Relativement au mécanisme de l’action anticoagulante du venin de Cobra et de celui des Colubridés en général, Noc et CaLmeTTE pensent qu'elle est due à la destruction de la thrombine par le venin, tandis que le venin des Vipéridés attaquerait plutôt la fibrine elle-même.

La chaleur affaiblit, puis détruit le pouvoir coagulant du venin de Lachesis ; à la température de 58°, l’atténuation est déjà manifeste ; à 8o°, la disparition du pouvoir coagulant est complète.

Les expériences de Noc confirment la plupart des résultats obtenus avec d’autres venins par les auteurs qui l’ont précédé ; toutefois, en ce qui concerne les effets opposés des venins sur la coagulation in vitro, l’auteur observe que ces effets peuvent s’annuler : c’est ainsi que r milligramme de venin

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de Cobra ou d’Ancistrodon piscivorus empêche l’action coagulante sur les plasmas décalcifiés de r milligramme de venin de Lachesis.

Vers la même époque, Morawrrz reprend l'étude de l’action des venins sur la coagulation, en tenant compte des données plus récentes acquises sur les détails du phénomène. D'après ces données, on admet que le processus de coagulation, dont on n'avait jusque là considéré que l’action ultime, s'effectue er deux temps, dont le premier seul nécessite la présence du calcium. Dans un premier temps, la thrombine, ou fibrin-ferment, se forme par l’action de deux substances, la sérozime, ou thrombogène, et la cilozime, ou thrombokinase. Dans la seconde phase, la thrombine coagule le fibrinogène, qui donne de la fibrine.

Morawrrz constate que le venin de Cobra n'empêche pas in vitro l’action coagulante de la thrombine déjà formée, mais qu'il agit comme une antikinase empêchant la citozime d'agir sur la sérozime en présence du calcium pour former de la thrombine.

L'auteur pense démontrer qu'avec un excès de citozime ou kinase il se forme de la thrombine, et non avec un excès de sérozime ; mais il n’en donne pas de preuve certaine, et établit seulement que, en réalité, le venin de Cobra empêche la première phase de la coagulation, c’est-à-dire la formition de la thrombine.

Ces résultats ont été confirmés et complétés par MerrauBy, HiRSsCHFEL» et KznGer, Houssay et SORDELLI.

Morawirz observe de plus que par l’addition du mélange venin + sérum antivenimeux à la thrombokinase, celle-ci ne conserve pas son action activante initiale. Le sérum antitoxique, qui n’agit pas sur la thrombine, paraît donc gêner l’action activante de la citozime sur le sérozime.

L'auteur étudie aussi l’action anticoagulante du venin de Cobra in vivo sur le chien et le lapin, aux doses élevées de 7 milligr. 5 pour le premier et de 10 milligrammes pour le second. Il observe que le sang des animaux ainsi inoculés ne coagule qu’en dehors de l’organisme, soit par addition d'extraits d'organes (kinases), soit par dilution dans l’eau, soit par neutralisation par l’acide acélique dilué, ou quand il s'écoule dans le péritoine, mais ne coagule pas par addition de chlorure de calcium et ne contient pas d’antithrombine.

De ces faits, et du fait que l’action in vivo nécessite pour se produire la même quantité de venin que l’action in vitro, Morawrrz déduit que dans les deux cas l'effet incoagulant dépend de la même action antikiniasique. 1} n'observe pas de phase positive initiale.

En 1905, C.-J. Marx étend aux Vipéridés, Echis carinatus et Vipera russelli, ses études sur les venins, en même temps qu'il complète avec la technique de Lams ses premières observations sur les venins des Colubridés d'Australie. Pseudechis porphyriacus et Notechis scutalus. Dans ce travail clair et précis, il établit que la coagulation est due à une thrombine. Le venin de ces quatre espèces est inégalement coagulant : celui de Notechis est de beaucoup le plus actif ; celui de Vipera russelli le moins. Le venin de Pseudechis a un pouvoir égal à la moitié, celui d’Echis aux deux tiers de celui de Notechis. Quant à ce dernier, on en aura une idée en considérant que 2 cc. de plasma oxalaté de chien sont coagulés en 1 minute à la température de 40° par r goutte (o cc. o17) d’une solution de venin à r pour 1.000, et en une dizaine d'heures avec une solution venimeuse 1.000 fois plus faible.

C.-J. Marin fait remarquer que le mécanisme de la coagulation du plasma décalcifié est indépendante des ions calcium, car les venins précédents coagulent aussi rapidement 10 que 0,2 pour 100 de plasma oxalaté, et l’action est la même sur les plasmas oxalatés, citratés, fluorés, magnésiés que sur le liquide d’hydrocèle et les solutions de fibrinogène de cheval préparées suivant la méthode de HAMMARSTEN.

Le ferment coagulant n’est pas détruit pendant le processus ; en effet, après qu’une certaine portion de plasma (5 cc.) est coagulée par une goutle de solution de venin à 1 pour 1.000, celui-ci peut être libéré et coaguler une autre portion de plasma. Cette opération peut être répétée trois ou quatre fois, mais on ne peut la pousser jusqu’à la limite de la dose minima calculée, car chaque coagulum de fibrine entraîne mécaniquement une certaine quantité de ferment.

La chaleur détruit le ferment coagulant en 10-15 minutes à la température de 55° et plus lentement à la température ordinaire ; l’action est d’autant plus rapide que le venin est plus dilué.

Ce ferment dialyse légèrement et une solution de venin à 1 pour 1.000, qu'on fait passer sur une couche de gélatine à 8 pour 100, ne possède plus, après filtration, que le 1/200 de son pouvoir initial.

C.-J. MARTIN reconnaît aussi que les thrombines des venins sont spécifiques des diverses espèces, comme leurs antivenins : ainsi o cc. r de sérum anti-Notechis peut neutraliser 10.000 doses de venin, qui seraient coagulantes pour r cc. de plasma ; ce même sérum agit aussi, quoique d’une façon moindre, sur le pouvoir coagulant du venin de Pseudechis, mais il est inactif sur le venin d'Echis. L'auteur étudie aussi les rapports entre la vitesse de coagulation et la dose de venin employée, et confirme Ja faible influence que possèdent les variations de concentration du fibrinogène.

En 1909, MerranBy reprend l’étude de la coagulation du sang et soulève la question de savoir si les venins coagulants contiennent de la thrombine ou de la thrombokinase (citozime), ou quelque substance spéciale qui possède les propriétés de ces deux substances. Des premières expériences de C.-J. Mar- TIN sur la coagulation in vivo par le venin de Pseudechis, il résulte que ce venin possède des propriétés analogues à celles qu’on attribue à la kinase dans la théorie récente de la coagulation. D'autre part, d’après celles qui ont trait à la coagulation in vitro des plasmas oxalatés, il apparaît comme évident que le venin contient de la thrombine. Pour résoudre la question, l’auteur fait des expériences variées sur le plasma d'oiseau, le fibrinogène et la prothrombine (sérozime) avec les venins de Notechis scutatus et d’Echis carinalus.

Dans ces expériences, le fibrinogène est extrait du plasma d'oiseau par dilution dans un grand volume d’eau distillée légèrement acidulée. La kinase est obtenue en faisant un extrait aqueux de testicule. Comme thrombine, l’auteur emploie le liquide obtenu après coagulation du fibrinogène par la kinase et le chlorure de calcium, mélange duquel la fibrine se sépare. Une solution de prothrombine reste après la coagulation du fibrinogène par la thrombine. Deux points sont à signaler : 1° c’est d’abord le pouvoir coagulant très élevé des venins sur le plasma d'oiseau ; celui de Notechis surtout, qui, à la dose de o milligr. 003, coagule en 4 minutes 2 cc. de plasma dilué ; 2° c'est que l’emploi d’une dose 20 fois plus grande de venin ajouté réduit seuiement à r minute le temps de coagulation. Une augmentation correspondante de la quantité de thrombine réduirait de quelques minutes à quelques secondes ce même temps par action directe des éléments en contact; le changement observé, qui présume une action intermédiaire, est comparable à celui qu'on obtient en ajoutant des quantités variables de kinase au plasma. Ce résultat indique que le venin de Notechis contient une kinase plutôt qu'une thrombine. L'action du venin d’Echis est la même, mais environ 20 fois moindre.

La coagulation du plasma par le venin ne fournit que des indications générales sans résoudre la question posée par MELLansy sur la nature de la substance coagulante, car les plasmas sont des substances complexes. Aussi, l’auteur essaie-t-il l’action sur le fibrinogène pour les venins de Notechis et d’Echis : ceux-ci coagulent tous deux, bien qu’à un degré différent, le fibri-

nogène, ce qui semble prouver qu'ils contiennent une thrombine, qui est le principe actif de la coagulation. Mais, dit Mercax8y, un fait démontre que le venin agit aussi comme une kinase, c’est l’accroissement que présente le pouvoir coagulant dans les minutes qui suivent la préparation du mélange. Les venins se comportent ainsi physiologiquement comme s'ils étaient un mélange de kinase et de calcium.

Mais, d’après la dose minime de venin qui suffit parfois (Notechis) à produire la coagulation, on peut se demander quelle est l'origine du calcium. dont la présence semble nécessaire au processus, et quels rapports exacts il présente avec la kinase. L'auteur cherche à fixer ces points : il constate que l'addition de chlorure de calcium aux venins accroît beaucoup leur action coagulante sur le fibrinogène : elle double celle du venin de Notechis et fail plus que tripler celle du venin d’Echis. L’addition de ce même sel à la solution de venin et de prothrombine accroît aussi le pouvoir coagulant du venin.

Ainsi, bien que les venins soient capables à eux seuls de provoquer la transformation de la prothrombine en thrombine, leur action est très amplifiée par l’action des sels de calcium. Ces faits sont susceptibles de deux interprétations : ou bien une portion seulement de la kinase du venin est combinée avec le calcium, l’autre nécessitant l’apport extérieur de calcium, ou bien le calcium combiné à la molécule de la kinase est en quantité trop faible pour agir sur les solutions de prothrombine quand le venin n'est employé qu'à faible dose. Cette dernière hypothèse paraît être pour l’auteur la plus viaisemblable.

Si l'agent coagulant des venins est bien une kinase unie étroitement au calcium, l’activité d'un tel corps doit être influencée par l’oxalate de potassium. En essayant cet agent, on obtient des résultats différents avec le plasma et le fibrinogène : l’oxalate diminue l’action coagulante du venin sur Île plasma et, contre toute attente, favorise au contraire la coagulation du fibrinogène par le venin.

Sur quel principe, fibrinogène, prothromb'ne ou venin, s'exerce cette action paradoxale de l’oxalate de potassium ? L'addition d'oxalate au mélange de prothrombine et de venin accélère la transformation de la prothrombine en thrombine et, par là, favorise la coagulation avec le venin de Notechis et, au contraire, la retarde légèrement avec celui d’Echis. D'après ces résultats, il est peu probable que l'oxalate agisse sur le fibrinogène. Pour savoir s'il agit sur le venin ou sur la prothrombine ou sur les deux ensemble, l’oxalate est d’abord ajouté au venin seul ; puis, après quelque temps de contact, le mélange est ajouté aux solutions de fibrinogène et de prothrombine : dans les deux cas, il faut moins d’oxalate pour que la coagulation se produise l’action adjuvante de l’oxalale s'exerce donc sur le venin.

MELrax8y essaye également l'influence d’autres sels : chlorure de potassimp, sulfale de potassium, chlorure de calcium, en maintenant leur mélang2 avec le venin à 30° pendant un certain temps avant que leur activité soil essayée. On observe alors avec le chlorure de calcium le même effet paradoxal qu'avec l’oxalate ; il augmente le pouvoir coagulant du venin de Notechis et diminue celui du venin d’Echis. Le chlorure de potassium nuit au pouvoir coagulant des deux venins, et celui du sulfate est sans action.

L'activité des solutions salines de venin s’accroît avec le temps quand on les maintient pendant trois heures à la température de 30°.

D'après ces résultats, Merransy considère que l’addition de venin à une solution de fibrinogène et de prothrombine donnant lieu à la production de thrombine, les venins agissent ainsi comme un mélange de kinasse et de calcium. Pour expliquer l'influence activante paradoxale de l’oxalate, MELLANBY

pere

suppose que les sels de calcium nécessaires pour l’action kinasique des venins font partie intégrante des protéines du fibrinogène ou sont fixés par elles.

Il applique les conclusions précédentes à l’explication de l’action in vivo : l'accélération initiale de la coagulation du sang dans les vaisseaux est due à ce que la kinase des venins provoque la formation de thrombine, de laquelle résulte la précipitation du fibrinogène en fibrine. Quand l'injection de venin est lente, c’est l’incoagulabilité qu'on observe (phase négative), la fibrine serait fixée par les tissus au fur et à mesure de sa formation, de telle sorte qu'il n’y à pas coagulation dans la lumière des vaisseaux. Le fibrinogène disparaît, et ainsi le sang ne coagule pas.

MELLanBy a, de plus, confirmé les vues de Morawrrz sur le venin de Cobra, que ce dernier auteur considère comme une antikinase. Il a observé qu'après un certain temps de contact du fibrinogène avec le venin, la coagulation de ce dernier par la thrombine se produit avec une accélération marquée ; mais un excès de venin agissant sur le fibrinogène en retarde la coagulation. L’addition de venin de Cobra au venin de Notechis ne modifie pas le pouvoir coagulant de ce dernier.

Les conclusions de MELrANBy, en ce qui concerne la nature kinasique de la substance active des venins coagulants, ont été, à quelques années de là (1913), discutées et réfutées par BarraT. Cet auteur a donc recherché si le ferment coagulant d’Echis carinatus doit être assimilé à une thrombine, comme l'indique C.-J. MARTIN, ou à une thrombokinase, comme l’admet MELLangy : l'injection intraveineuse de thrombine chez le lapin amène la formation d’une importante coagulation intravasculaire, d’où résulte l’incoagulabilité ultérieure du sang. (La solution de thrombine était obtenue en exprimant le liquide d’un caillot de fibrinogène du lapin, coagulé par une suspension laquée de globules rouges, additionnée de chlorure de calcium.) L'injection de thrombokinase (suspension laquée de globules rouges) en quantité équivalente à l'injection précédente, pour la coagulation in vitro, n'amène que rarement et en petite quantité des coagulations intravasculaires, et le sang, bien qu'il coagule un peu tardivement, fournit d'ordinaire une quantité normale de fibrine. L’injection au lapin d’une solution de peptone de Vitte, que l’auteur considère comme une solution de thrombokinase, produit des effets analogues. (Le retard de la coagulation qui se produit dans ce cas n’est pas pris en considération.)

In vitro, la thrombine et la thrombokinase diffèrent encore par leur résistance différente à la chaleur ; la première est détruite par le chauffage pendant 5 minutes à 60°, alors que la seconde résiste.

Comparée à l’une ou à l’autre de ces substances, le venin d’Echis se rapproche plutôt de la thrombine que de la thrombokinase. Mais les objections de BarraT ne paraissent pas décisives aux auteurs qui se sont occupés plus tard de la même question.

En 1909 aussi, V. Brazis et B. RaxGez PEsran4, à l’Institut antiophidique de Butantan (Brésil), ont étudié l’action sur la coagulation des venins des espèces locales de Crotales et de Lachesis.

Au cours des autopsies nombreuses des animaux inoculés ou mordus, ils constatent presque toujours l’incoagulabilité avec les venins de Lachesis atrox, L. neuwiedi, L. lanceolatus, L. jararacuçu, L. alternatus, Crotalus terrificus, Lachesis mutus (sauf un cas avec ce dernier venin, où ils ont observé la coagulation, et dans un autre avec le venin des C. terrificus, où le sang était coagulé dans le cœur). Ils montrent qu'il n'existe pas de relation entre l’action protéolytique et l’action anticoagulante in vivo : ainsi les venins incoagulants de C. terrificus et de Lachesis ilapetiningæ ne sont pas protéolytiques ; il n'existe pas non plus de parallélisme entre les pouvoirs coagulant et toxique, et ces venins n'entrainent généralement pas la mort par thrombose. Les

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auteurs étudient comparativement l’action in vitro des mêmes venins sur Île sang de lapin, de cheval et de pigeon additionné de citrate de soude à 1 % et de chlorure de sodium à 4 %. Ils notent le temps que 1 milligramme des divers venins met à coaguler 1 cc. de sang. Le résultat obtenu avec le sang de lapin a été le suivant : L. atrox, 5 secondes ; L. jararacuçu, 15 secondes ; L. alternatus, 5o secondes ; L. neuwiedi et C. terrificus, 60 secondes, L. lanceolatus et L. itapetiningæ, 120 secondes.

J.-F. Gowez a vérifié plus tard que ces résultats ne sont pas constants et que le venin de C. terrificus coagule moins fortement le sang que celui des Lachesis.

D'après Braziz et Pesraxa, les venins de L. mutus et d'Elaps frontalis se comportent comme celui de Cobra et rendent le sang incoagulable. (Le venin de L. mutus est rangé parmi les venins coagulants par CALMETTE.)

Le venin de C. terrificus ne coagule pas le sang de pigeon ; Houssay, en 1919, a obtenu cette coagulation avec de fortes doses de venin. Les venins perdent leur action coagulante quand on les chauffe à 110° ; ceux de L. jararacuçu et de C. terrificus ne perdent pas leur action par le chauffage à 100° ; celui de L. alternatus, qui perd sa toxicité à 65°, conserve à cette température son pouvoir coagulant. Le sérum antivenimeux, à la dose de r cc., n'empêche pas l’action coagulante de 1 milligramme de venin sur 1 cc. de plasma si le mélange est immédiat ; mais si le mélange avec le venin seul dure seulement 10 minutes, le pouvoir coagulant est aboli. Cette action est spécifique : ainsi le sérum antilachesis n'empêche pas la coagulation par le venin de C. terrificus. Le sang citraté des animaux immunisés ne coagule pas par addition de venin.

Un élève de Brazir, N. MarRTINS, a montré en 1916 que les venins des C. Opisthoglyphes, Phylodrias schotti et Erythrolamprus esculapii, ne coagulent pas les plasmas citratés.

L'étude de l’action des venins sur la coagulation du sang a été reprise par Arraus depuis 1910, soit seul, soit en collaboration avec ses élèves, SILBER- Mivz, B. Srawska, NADINE, à propos de l’action comparée des venins. Quelques venins déterminent une thrombose vasculaire s’ils sont rapidement injectés à doses convenables dans les veines du lapin : o milligr. or (Notechis scutatus), o milligr. 10 (Pseudechis), o milligr. 25 (Daboia), o milligr. 50 (Crotalus terrificus), r milligramme (Lachesis lanceolatus et Vipera aspis). À doses moindres, il se produit une brève phase positive d'augmentation de la coagulabilité, suivie d’une phase négative d’incoagulabilité. Les venins de Naja tripudians. de Naja bungarus, de Bungarus fasciatus et de Crotalus adamanteus, et surtout les trois premiers, produisent une diminution moins marquée de la coagulabilité.

Par les injections sous-cutanées répétées de petites doses de venins coagulants (C. terrificus, Notechis scutatus, V. russelli), des lapins peuvent se trouver immunisés contre l’action coagulante. Le procédé a été employé par ArRTaus pour étudier les autres accidents de l’envenimation : c'est ainsi qu'ayant évité la thrombose, l’auteur a pu montrer l’action curarisante du venin de Notechis, le plus coagulant de tous. Cette immunisation n'est pas spécifique.

In vitro, les venins de L. lanceolatus. C. terrificus et C. adamanteus coagulent les plasmas non spontanément coagulables et agissent comme s'ils contenaient de la thrombine ; mais l’action du venin de C. adamanteus est moins énergique que celle des deux autres. En ce qui concerne le venin de Vipera russelli, l’action semble plus complexe : contrairement à ce qu'ont vu LamB, Noc, Houssay, il ne coagulerait pas à lui seul les liquides fibrinogènes, tels que le sang de peptone, les plasmas décalcifiés, et nécessiterait l’action adjuvante du chlorure de calcium : il ne contiendrait donc pas de

thrombine. Ce venin, d’après Arruus, ne contient pas non plus de prothrombine transformable en thrombine par l’action des sels de calcium, car il ne coagule pas les solutions de fibrinogène, mais il accélère la transformation de la prothrombine en thrombine dans les plasmas décalcifiés, traités par le chlorure de calcium. Cette propriété du venin n’explique d’ailleurs pas, comm? le reconnaît ArTHus, son action coagulante in vivo, car le sang circulant ne contient pas de prothrombine ; elle n’explique que partiellement l’action coagulante in vitro, car le venin peut sans doute exercer sur le sang, au moment de la prise, une action équivalente à celle qu’il exerce in vivo. Le venin de Daboia se comporte comme les extraits d'organes (poumon, foie, rein), qui, ne contenant ni thrombine, ni prothrombine, coagulent néanmoins les plasmas décalcifiés quand on ajoute à ceux-ci du chlorure de calcium.

Relativement à la coagulation de ces plasmas en présence de calcium, ARTHUS confirme l’action opposée des venins de Daboia et de Cobra, signalée d’abord par Laws ; le premier de ces venins accélère la coagulation, le deuxième la retarde.

De même que, suivant Artaus, le venin de Daboia ne contient pas de thrombine, celui de Cobra ne contient pas d’antithrombine, car ajouté aux liqueurs fibrinogénées non spontanément coagulables, il n’en modifie pas !e temps de coagulation, quand on détermine celle-ci par addition de thrombine ou de venin coagulant (L. lanceolatus, C. terrificus). Par contre, le venin de Cobra, inoculé dans les veines du lapin, y détermine l'apparition d’antithrombine, comme tout venin ou toute substance protéotoxique injecté dans les veines. Si, en effet, on reçoit dans une solution de citrate de soude le sang d’un tel lapin et qu'on ajoute à ce liquide de la thrombine, la coagulation en est retardée. Le venin de Cobra est donc doublement anticoagulant 1° par l’antikinase qu'il renferme normalement, et qui retarde la transformation par la thrombokinase de la prothrombine en thrombine ; 2° par ia formation d’antithrombine, que fait apparaître dans le sang l'injection du venin.

Les venins de Naja haje, Naja bungarus et de Bungarus cœruleus sont, sous ce rapport, équivalents à celui de Cobra. Arraus confirme les résultats de Lams sur la spécificité des sérums antivenimeux ; ces .sérums neutralisent le pouvoir coagulant ou anticoagulant des venins comme les autres effets de ceux-ci, et la neutralisation est instantanée : les venins de L. lanceolatus et de C. terrificus perdent ainsi leur pouvoir coagulant sur le sang et les plasmas, si on leur ajoute les sérums correspondants. La neutralisation est fonctionnelle, et le pouvoir coagulant simplement masqué ; on peut le faire réapparaître en ajoutant de l’eau au mélange. L’acide chlorhydrique ne dissocie pas le mélange.

Le sérum anticobra ne neutralise pas l’action des venins coagulants.

ArTaus signale quelques exceptions à sa conception de la spécificité absolue : les sérums antibothropique et anticrotalique neutralisent légèrement l’action coagulante in vitro du venin de C. adamanteus ; le sérum anticrotalique neutralise l’action coagulante in vivo du venin de Pseudechis, mais non les autres propriétés de ce venin.

In vivo, les sérums neutralisent spécifiquement l’action anticoagulante le sérum anticobra neutralise seulement le venin de Cobra et non celui de C. adamanteus. Les sérums neutralisent aussi spécifiquement l’action ceagulante : le sérum anticrotalique neutralise l’action du venin de . terrificus, mais non celle des venins de L. lanceolatus, Notechis scutatus et de Vipera russelli ; le sérum antibothropique neutralise l’action du venin de L. lanceolatus, non celle de C. terrificus. Le sérum anticobra, non plus que le sérum normal, n’empêchent l’action coagulante in-vivo du venin de L. lanceolatus.

L'étude de l’action du venin de Bilis-arielans (Puff Adder) a été de nouveau étudiée en 1913 par BeausEan à Lille, dans le laboratoire de A. CALMETTE

L'auteur a observé que, suivant le procédé employé pour rendre le sang non spontanément coagulable, les résultats sont différents :

Vis-à-vis du sang de cobaye, citraté à 1 %, oxalaté à 0,2 %, fluoré à 0,3 %, magnésié à 10 %, (Sof Mg?) et chloruré à 5 %,, il est nettement coagulant, mais seulement aux doses faibles de 0,1 à 1 milligramme par centimètre cube de sang. Au-dessus d'une dose déterminée qui varie, suivant le sang employé, il perd cette propriété et, de plus, empêche la coagulation des plasmas oxalatés et citratés par le chlorure de calcium, des plasmas magnésiés et chlorurés par l’eau distillée. C’est, d’après l’auteur, l’action protéolytique du venin, qui, à ces fortes doses, attaque le fibrinogène du plasma et rend impossible la coagulation. Chauffé à 80°, le venin perd son pouvoir coagulant sur le sang citraté. Vis-à-vis du sang rendu incoagulable par l'extrait de têtes de sangsues, le venin de Bitis ne manifeste aucune action coagulante aux doses qui coagulaient les sangs décalcifiés. Mis au contact du plasma normal recueilli en tubes paraffinés, alors que ce plasma transporté ensuite dans des tubes ordinaires coagule presque instantanément, celui qui est en contact avec le venin reste liquide avec la dose de o milligr. 5 de venin pour 1 cc. de plasma. Au-dessous de la dose de o milligr. 5, le plasma coagule et d'autant plus vite que la dose de venin est plus faible.

Cette action anticoagulante in vitro est comparable à celle que l’auteur a obtenue in vivo par inoculation de venin, (doses non indiquées).

Ainsi, d’après BEauyeAN, le venin de Bitis coagule à faibles doses les sangs décalcifiés et, aux mêmes doses, ne coagule pas le sang à l'extrait de têtes de sangsues, et empêche Ja coagulation du plasma normal.

D.-T. Mrrcnezz, qui, en Afrique du Sud, a étudié en 1916 les effets du venin de Bitis arietans et de Causus rhombealus sur les animaux domestiques, a constaté une diminution marquée de la coagulabilité chez les animaux mordus par les Bitis et aucune chez ceux mordus par les Causus.

En 1914, Massoz reprend la question de la coagulation du sérum de cheval par les venins des deux types jusqu'ici étudiés : Vipéridés et Colubridés (Crotale, Cobra), en faisant intervenir le chauffage préalable du venin. L'auteur arrive aux conclusions suivantes : le venin de Cobra présente, suivant les quantités mises en œuvre, deux actions opposées : à doses faibles et croissantes, il retarde la coagulation ; puis celte coagulation s’affaiblit pour des doses plus élevées (plus de r milligramme par cc.), et, au delà, peut être remplacée par une action coagulante. Il semble, d’après ce résultat inverse de celui que la plupart des auteurs signalent, soit in vivo, soit in vitro avec le venin de Cobra non chauffé que ce venin contient deux diastases à action contraire, l'une anticoagulante, agissant à faible dose, surtout à la température de 65°, l’autre coagulante à forte dose avec son maximum d'effet à une température plus basse (45°). L'action coagulante persiste seule à 65° quand le milieu devient nettement alcalin. Nous devons rappeler, à propos de cette action coagulante du venin chauffé, que Fayrer et A.-J. Wazz l'avaient observée avec le venin non chauffé chez les animaux morts de la morsure ou de l’inoculation du venin de Cobra.

Le venin de Crotale dans les mêmes conditions d'expérience s’est toujours montré anticoagulant.

HirscureL» et KLINGER, en 1919, reprennent l'étude de l’action du venin de Cobra sur la citozine ou thrombokinase, action inaugurée par Morawrrz et confirmée par MerLansy. L'activité coagulante de la plupart des cytozymes (extrait alcoolique de cœur, de foie, extrait aqueux de plaquettes, lécithine afga, oléate de soude), est affaiblie ou détruite par l'addition de doses infimes de venin de Cobra. Comme ces substances sont des lipoïdes ou des corps