TOME II

tre plus ou moins complètement par ïe chauffage. Laws signale dès 1903, que le pouvoir anticoagulant du venin de Cobra est très atténué par le chauffage à 75° pendant 50 minutes.

Plus récemment, Massoz (1914) a vu que de fortes doses de ce venin chauffées vers 65° ont non-seulement perdu l’action anticoagulante, mais deviennent même coagulantes.

Influence de la filtration

Le filtre de gélatine retient la plus grande partie des substances coagulantes des venins de Pseudechis, d'Echis, de Notechis, de Daboia (C.-J. MARTIN).

Le filtre de porcelaine et le filtre Berkfeld retiennent aussi la plus grande partie des principes coagulants, car le temps de coagulation par le filtrat du venin de Lachesis alternatus devient 17 fois plus grand que le temps normal (Houssay).

Influence de la dialyse

Le ferment coagulant des venins ne traverse que très difficilement la membrane de parchemin des dialyseurs. C’est un fait observé déjà en 1905 par C.-J. Marrix sur les divers venins par lui étudiés. Houssayx, SorvELLI et NEGRETE ont confirmé ces résultats pour les venins de L. alter-

natus et de L. neuwidii, qui perdent par la dialyse toute action sur les

plasmas citratés de lapin.

Influence de la dilution

Le fait que la vitesse de coagulation n’est pas en rapport direct avec la

dose de venin employée, fait déjà prévoir que la dilution du plasma ne

favorise pas la coagulation. Houssay (1919), a observé que lorsque le plasma pur de cheval coagule en 55 secondes, celui qui est dilué au huitième ne coagule plus qu’en 1320 secondes sous l'influence de la même dose de venin de Lachesis alternatus. Quant à la dilution du venin, C.-J. MARTIN (1905), avait déjà montré que les venins de Pseudechis, de Note-

chis, d'Echis et de Daboia perdent d'autant plus rapidement leur pouvoir

coagulant à la température ordinaire qu'ils sont plus dilués.

Influence de l'absorption

Houssay, Sorpezzr et NEGRETE, ont signalé le pouvoir absorbant du noir animal, du kaolin et d’autres substances pour les substances coagu lantes et toxiques des venins de L. alternatus, neuwiedi, jararacuçu et de C. terrificus.

Influence des sels

Tous les sels à concentration élevée gênent la coagulation des plasmas purs, oxalatés ou citratés et du sang de peptone. Dans certains cas, elle est même empêchée ; c’est ainsi que le sang qui contient 1 % d'oxalate de

sodium ou de fluorure d’ammonium, 10 % de sulfate d'ammonium ou de chlorure de sodium, ne coagule pas si on ajoute une solution de venin de Lachesis alternatus ; à ces concentrations élevées, les substances coagulantes sont précipitées.

Avec une concentration moindre, l’addition de venin coagulant produit un précipité blanc, qui bientôt devient grumeleux, avec formation de flocons de fibrine, ou coagulation en masse. Le phénomène paraît être dû à la précipitation des sels calciques insolubles, servant comme agents thromboplastiques, comme l’a indiqué Nozr pour l’oxalate de soude.

L'action d’un sel déterminé peut ainsi être double ; le chlorure de calcium à 1 % retarde la coagulation, alors qu'il l’accélère en solution plus étendue à 1 pour 1.000 ou pour 10.000. Le citrate serait le moins empêchant des sels usuellement employés, car à la concentration de 1 % c’est celui qui permet par addition de venin la coagulation la plus rapide.

Influence des alcalis et des acides

Les alcalis concentrés agissent sur le plasma de manière à gêner la précipitation de la fibrine non seulement par le venin, mais par la thrombine. En dilution faible leur action est plutôt favorisante. Ils agissent également sur le venin pour en détruire le pouvoir coagulant.

.. Les acides possèdent cette même propriété, mais contrairement aux alcalis n’ont pas d’action sur le plasma (Houssay).

Influence de l'alcool

Mis au contact du venin sec pendant 24 heures, l’alcool absolu n'’altère pas le pouvoir coagulant du venin de Lachesis (Noc, Houssay) ; l’alcool dilué n’altère que très peu les substances coagulantes ; ajouté aux solutions venimeuses, il donne fréquemment des solutions colloïdales, que la centrifugation ne parvient pas à clarifier.

Influence des substances destruclives du venin

Les hypochlorites alcalins et alcalino-terreux, le permanganate de potasse qui ont sur le venin une action oxydante, atténuant puis détruisant la neurotoxine, détruisent aussi l’action coagulante.

Ces actions ne s’exercent pas sur le plasma (Houssay).

Influence du sérum normal

D'après Houssay, Sornezzt et NEGRETE, l’addition de sérum normal au plasma paraît en général gêner la production de fibrine sous l’action du venin. Mais le contact préalable du venin avec le sérum augmente le pouvoir coagulant. L'addition de sérum au fibrinogène, peu altéré par une forte dose de venin, peut produire une précipitation presque immédiate de la fibrine.

Action neutralisante des sérums antivenimeurx

En 1896, KanrHacx a montré que l’addition au venin d’une quantité suffisante de sérum antivenimeux neutralise non seulement les effets hémolytique et toxique, mais encore l'effet anticoagulant du venin de Cobra sur le sang in vitro. Srepnens et Myers en 1898, ont confirmé ce fait.

D'après ArTaus (1911), l’action des sérums antivenimeux sur les venins serait, à de rares exceptions près, zoologiquement spécifique ; ils neutralisent le pouvoir coagulant ou anticoagulant comme les autres effets de ceux-ci. La neutralisation est instantanée et spécifique.

Houssay, NEGRETE et SORDELLI, en 1919, étendent ces résultats à un effets de ceux-ci. La neutralisation est instantanée.

Ces auteurs confirment l’action neutralisante, mais font une réserve pour la spécificité absolue : c’est ainsi que les sérums monovalents anti- Lachesis alternatus et anti-Crotalus terrificus neutralisent fortement l’action coagulante du venin de L. alternatus ; à un degré moindre, mais encore élevé les venins des autres espèces américaines de Lachesis et celui de C. terrificus ; à un degré très faible les venins de Vipera russelli et «’Ancistrodon blomhoffi, et pas du tout ceux des venins de Pseudechis et de Notechis. |

Le sérum anticobra n’a pas plus d'action sur les venins de Lachesis et de Crotale que le sérum normal ; il en est de même du sérum Welcome (anti-Cobra et anti-Daboia), qui est hautement spécifique et n’a pas d’action sur les venins de Lachesis, de Crotale, de Pseudechis et de Notechis.

Les autres sérums thérapeutiques (antityphique, antidiphtérique, antichlolérique, antipesteux, antitétanique, antistreptococcique, n’ont aucun pouvoir neutralisant sur les venins, et ne peuvent qu'’occasionnellement retarder la coagulation.

Les sérums antiophidiques n’ont aucune action sur la thrombine ; ils peuvent seulement parfois contrarier son action comme le sérum normal. Ils ne neutralisent pas d’une façon parallèle les pouvoirs coagulant et toxique.

Dans le mélange neutre venin et sérum antivenimeux, on peut faire réapparaître la propriété coagulante soit par le chauffage à 8o°, qui détruit l’antitoxine (Houssay), soit par simple dilution dans l’eau distillée, qui ne détruirait pas le venin.

Houssay n'admet pas cette interprétation, « car, dit-il, si l’action coagulante du venin est bien neutralisante, celle d’altérer le fibrinogène ne l’est pas, et celui-ci se transforme au bout d’un certain temps ( 10 à 60 minutes), en une sorte de fibrine liquide coagulable par dilution ».

Sur le prétendu antagonisme entre les venins coagulants et les anticoagulants

En 1904, Noc, CALMETTE (1907) admettent que les effets opposés des venins peuvent s’annuler par leur mélange in vitro : 1 milligr. de venin

de Cobra empêcherait l’action coagulante de 1 milligr. de venin de Lachesis.

Lams, dès 1904, s'élève contre cette assertion, et constate que Ja présence du venin de Cobra (5 milligr.) dans 2 cc. de plasma citraté de cheval n'empêche à aucun degré l’action coagulante du venin de Daboia introduit une demi-heure après dans le mélange.

MELLANBY (1909), observe les mêmes résultats en mélangeant le venin de Cobra à celui de Notechis.

Houssay, SoRDELLI et NEGRETE (nov. 1918), confirment les résultats de Laws et de MELLANBY : avec le mélange de venins de Cobra et de L. alternatus sur le plasma, la coagulation de ce dernier se produit dans le même temps qu'avec le venin de Lachesis employé seul.

Les auteurs font remarquer que c’est une nouvelle preuve que le venin de Cobra n'’altère pas le fibrinogène.

Il y a cependant une exception ; si le venin anticoagulant est en même temps protéolytique (C. adamanteus, L. flavoviridis), et si la dose de venin coagulant est telle qu’elle produit son effet au bout de quelques minutes, alors elle peut dans cet intervalle modifier le fibrinogène, et déterminer un certain retard dans la coagulation. Aïnsi le venin de L. flavoviridis, qui altère rapidement le plasma, le rend incoagulable même par addition de venin de L. alternatus ; si les deux venins sont préalablement mélangés, l’action coagulante se produit, mais avec un léger retard.

Aïnsi les résultats bruts qui peuvent faire penser à une action antagoniste sont dûs à l’action du venin anticoagulant sur le fibrinogène ; s’il l’altère, (C. adamanteus, L. flavoviridis), ïl y a retard de la coagulation ; s’il ne l’altère pas (Cobra), le venin n’empêche pas la coagulation.

Il n’y a donc pas d’antagonisme réel entre les venins coagulants et les anticoagulants. Ces derniers agissent sur la première phase de la coagulation et particulièrement sur la thrombokinase ; tandis que les venins coagulants agissent sur la seconde phase à la manière d’une thrombine.

Bibliographie ALBERTONI et STEFANI. — Manuele di Fisologia, 1888. ArRTHus et Pacës. — Nouvelle théorie chimique de la coagulation du sang. Arch. de Physiol., 1890, p. 7309.

ARTHUS (M.). — Les travaux récents sur la coagulation du sang. In Collection Sciencia, Paris, 1899.

ArRTHUS (M.). — De la spécificité des sérums antivenimeux. Sérum antico-

braïque et venins d’'Hamadryas et de Krait (Bungarus cœruleus). Arch. Int. de Physiologie, 1912, XI, fasc. III, p. 265-284.

ArRTHUS (M.). — Physiologie comparée des intoxications par les venins des Serpents. Id. p. 285-316.

ArnTHUs (M.). — De la spécifité des sérums antivenimeux. Sérums anticobraïque, antibothropique, anticrobalique; venins de Lachesis lanceolatus, de Crotalus terrificus et de Crotalus adamanteus. id. 317-338.

ArTuus (M.) et Srawsxa (Mlle B.). — De la vitesse de réaction des antivenins sur les venins. 1d. p. 339-356.

ARTHUS (M.). — Etudes sur les venins des Serpents. III. Venins coagulants et

anaphylaxie. Propriétés des venins des Serpents. Dose anaphylactisante. Arch. Int. de Physiol., 1912, XII, fasc. III, p. 369-394.

ARTHUS (M.). — Venin, antivenin. C. R. Soc. Biol., 1914, LXXVI, p. 268.

ARTHUS (M.). — L'antithrombine engendrée dans les intoxications protéiques est-elle exclusivement d’origine hépatique? C. R. Loc. Biol., LXXXII, 1919, P. 416.

ARTHUS (M.). — Venin de Daboia et extraits d'organes, id. p. 1156.

ArTaus (M.). — Actions antagonistes du venin de Daboia et du venin de Cobra sur la coagulation des plasmas oxalatés ou citratés. Id. p. 1158.

BARRAT (J.-0.-W.). — The nature of the coagulant of the venom of « Echis carinatus », a small Indian Viper. P. Z. S. of London, 1913, LXXXVII, P. 177-190.

BARRAT (J.-0.-W.). — Thrombin and calcium chloride in relation to coagulation. Bioch. Journ., 1915, IX, p. 511-545.

BEAUJEAN (R.). — Note sur le venin de Bitis Arietans. Bull. Soc. Path. exot. 1929, VI, p. 50.

BornDET (J.) et DELANGE. — Analyse et synthèse du processus de coagulation

du sang. Bull. Soc. Roy. de Med. et d'Hist. nat. de Bruxelles, 1914, LXXIT, p. 87-91.

Bonper (J.). — Recherches sur la coagulation du sang (sérozyme et prosérozyme. C. R. Soc. Biol. 1919, LXXXII, p. 896.

Borper (J.). — Mode d'union du sérozyme et du cytozyme, id. p. g21.

BoRpET (J.). — Formation du sérozyme en l'absence de fibrinogène, id. p. 1139

BraNaRD. — On the nature and cure of the bite of Serpents and the wound of poisoned arrow. Smithsonian report. 1854.

Braziz (V.) et RanGrz PEsrana (B.). — Nova contribuçao ao estudo do enve-

namente Ophidico. VI. Accâo coagulante. Revista med de Sao-Paulo, 1009, AU} n°712, D. or.

BraziL (V.). — La défense contre l'Ophidisme. Sao-Paulo, 1914.

BRUNTON (I.) et Fayrer (J.). — On the nature and physiological action of the poison of naja tripudians and other Indian venomous snakes. P. R. S. of London, 1873, XXI, p 371, et 1874, XXII.

CALMETTE (A.). — Les venins, 1907, p. 205.

Camus (J.), CEsarr et Jouan (C.). — Recherches sur le venin de Crotalus adamanteus. An. Inst. Past., 1916, n° 4, p. 180.

ConTEJEAN (Ch.). — Nouvelles recherches sur l'influence des injections intravasculaires de peptone sur la coagulabilité du sang chez le chien. Arch. de Physiol. 1896, 5° sér., VII, p. 245-257.

CunniNGnam (D.-D.). — Scient. Mem. by the Med. ofjic. of the Army of India, 1895, Part IX; 1898, Part XI.

DELEzZENNE (C.). — Formation d’une substance anticoagulante par le foie en présence de la peptone. Arch. de Physiol., 1806, 5° sér., VIII, p. 655. DELEzENNE (C.). — Rôle respectif du foie et des leucocytes dans l’action des

agents anticoagulants du groupe de la peptone. 1d., 1898, X, p. 568.

Decezenne (C.). — Erythrocytes et actions anticoagulantes, C. R. Soc. Biol., 899, LI, p. 857.

DELEZENNE (C.). — Propriétés protéolytiques et coagulantes des venins. Lect. Acad. Med., 6 déc. 1910.

Doxon (M.). — Rapports du foie avec la coagulation du sang. Journ. de Physiol. et de Path. gén., 1912, XIV, p. 229.

Doyon (M.). — Antithrombine des organes. Action de la peptone. C. R. Soc. Biol., 1919, LXXXII, p. 570.

Ezxror (R.-H.), Srzcar (W.-C.), CARMICHAEL (G.-S.). — On the action of the

venom of Bungarus cœruleus, the Common Krait, Proc. of the R. Soc. 1904, LXXIV, p. 108.

Fayrer (J.). — Experiments on the influence of snake poison on the blood of animals. Ind. Med. Gaz., 1869, IV, p. 2409.

FAyrErR (J.). — The Thanatophidia of India, London, 1872, et P. R. S. cf London, XXI, XXII, 1873-74, p. 64, roo, 151, 165.

Feskrisrow (A.-E.). — Eine Vorlanfige mittelung über die Wirkung des Schlangengiftes auf den Thicrischen organismus. Mem. de l’Ac. imp. des Sc. nat. de St-Pétersb., 1888, XXXVI, n° 4.

FonranaA (F.). — Traité sur le venin de la Vipère, 2 vol. in-4°, 178r, p. 309.

Georrroy et Hunauzr. — Mém. de l’Ac. des Sc. de Paris, 1737.

GrarTIA (A.). — L'action du contact sur la coagulation du sang. Journ. de Physiol. et de Path. gén., 1918, XVIII, n° 5, p. 772-787.

GraTiA (A.). — À propos de la coagulation du plasma oxalaté par le staphy-

locoque (transformation du prosérozyme en sérozyme). C. R. Soc. Biol., 1079, LXAXIT, p. 1247.

Harrorp (G.-B.). — On the condition of the blood after death from snake bite, as probably due to the further study of zymotic deseases and of cholera especially. Melbourne, 24 p. in-8°, 1867. Un résumé en français dans CR A c-Tdes Sc x868, KLNE, p:Crr45.

Harrorp (G.-B.). — Further observations on the condition of the blood after from snake bite. Brit. Med. Jour., 1867, II, p. 563. Hewexscuip. — Untersuchungen über die wirkung des giftes der Brillen

und der Klappen chlange. Inaug. Diss., Dorpat, 1886.

Hrrsrezo et KzNGER. — Zur frage der Cobra inactiverung des serums. Biolh. Zeitsch., 1915, 7o, p. 399.

Houssayx (B.-A.) et SorneLzLt (A.). — Action del veleno de Cobra sobre el proceso de la coagulation sanguinea (in vitro). An. de la Soc. quimica Argent, 1917, V, p. 141-195.

Houssay (B.-A.) et Sorperri (A.). — Action in vitro des venins sur la coagulation du sang. C. R. Soc. Biol., 1918, LXXXI, p. r2. Houssay (B.-A.) et Sorpezrt (A.). — Estudios sobre los venenos de Serpientes.

V. Influencia de los venenos de Serpientes sobre la coagulation de la sangre, Revista del Inst. Bact. del Dep. Nal de Higiene, Buenos-Aires, GTS UT, D. AGO:

Houssay (B.-A.), SorpeLzr (A.) et NEGRETE (J.). — Estudios sobre los venenos de Serpientes. V.-Influencia de los venenos de Serpientes sobre la coagulation de la sangre. II. Accion de los venenos coagulantes. 1d., p. 565-

Houssay (B.-A.) et Sorpezzr (A.). — Action des venins des Serpents sur la coagulation du sang in vivo. C. R. Soc. Biol. 1919, LXXXIT, p. 1029.

Houssay (B.-A.) et SoRDELLI (A.). — Influencia de los venenos de Serpientes sobre coagulation de la sangre. II, Action in vivo, Rev. del Inst. Bact. etc., Buenos-Aires, 1919, II, 38 p.

Houssay (B.-A.), SorpezLt (A.) et NEGRETE (J.). — Action de los venenos coagulantes, Id., 52 p.

Houssay (B.-A.) et SorpeLzzr (A.). — Action des venins sur la coagulation

sanguine. Journ. de Physiol. et de Path. gén., 1919, XVIII, p. 781-871. C'est un résumé des travaux antérieurs.

KanrHack. — System of Medicine, edited by T. Clifford Allbuss, London, 1896,

LacerpA (J.-B. de). — Investigacôes experimentaes sobre a accâo do veneno da Bothrops jararaca. Archivos do museo nacional de Rio de Janeiro,

re (J.-B. de). — Investigacôes experimentaes sobre o veneno do Crotalus horridus, id. p. 31.

LacerpAa (J.-B. de). — Sobre a accào de veneno do Crotalus. Annaes brasilieuses de Medicina, 1883, XXXV, p. 5.

LauB (G.) et Haxxa. — Some observations on the poison of Russel Viper.

Jour. of Path. and Bact., 1902, VIII, p. 1, et Scient. mem. by Offic. of the Med. Sanit. Dep. of Gov. of India, 1903, n° 3.

Lau (G.). — Indian med. Gaz., 1901, XXXVI, p. 443.

LauB (G.). — On the action of the venoms of the Cobra and of Daboia on the red corpuscles and the blood plasma. Scient. mem. by Offices of the Med. and sanit. Dép. of Gov. of India, 1903, n°4.

LamB (G.). — Specificity of antivenomous sera. Id. 1903, n° 5.

LauB (G.). — Some observations on the poison of the Banded Krait (Bungarus fasciatus). Id. 1904, n° 10, 32 p. in-8°.

LauB (G.). — Specificity of antivenomous sera with special reference to a serum prepared with the venom of Daboia russelli. Zd. 1905, n° 16.

MARTIN (C.-J.). — On some effects upon the blood produced by the injection

of the venom of the Australian Black snake. (Pseudechis porphyriacus). Journ. of Physiol. 1893, XV, p. 380.

MARTIN (C.-J.). — On the physiological action of the venom of the Australian Black snake. Roy. Soc. N. S. W. Proceed., 1895. MARTIN (C.-J.), — An explanation of the marked difference in the effects

produced by subcutanous and intraveinous injection of venom of Australian snakes. /d., 1896, in Lancet 1905. II, p. 1292.

ManTiN (C.-J.). — Observations upon fibrin-ferment in the venom of snakes and the time-relations of their action. Journ. of Physiol. 1905, XXXIF, P. 207-219.

MARTIN (N.). — Das opistoglyphas brasileiras e o seu veneno. Tesis de Rio de Janeiro, 1916.

Massoz (L.). — Effets des venins sur la coagulation du sérum de cheval

par le chauffage. Différenciation des venins des Vipéridés et des Colubridés. C. R. Ac. des Sc., 1914, CLVIII, p. 1030.

MEan. — Observationes de veneno viperæ, 1750.

MeEzLauByx (J.). — The coagulation of blood. Part. IL The action of snake venoms, pelone and Leech extract. Journ. of Physiol. 1909, XXXVIII, Pp. 44.

Mrrcuezz (W. Weir)., — Rescarches upon the venom of Rattlesnake. Smith. Contr. to knowledge, 1861, XII, Washington.

Mrrouezz (W. Weir) et ReicuerT. —- Researches upon the venoms of poiso- | nous serpents. /d. 1886, n° 647.

Mircuezz (W. Weir) et STEWART. — À contribution to the study of the action

of the venom of the Crolalus adamanteus upon the blood. Trans. College of Physicians-Philad., 3 d. XIX, 1897, p. 105.

MrrcneLzz (D.-T.). — The effects of snake venoms on domestic animals, and the preparation of antivenomous serum. South Afric. Journ. of Science, April, 1916.

Morawrrz (P.). — Ueber die gerinnungshemmende Wirkung der Kobragiftes. Deutsch Arch. f. Klin. Med. 1994, LXXX, p. 340.

Morawitrz (P.). — Die chemie der Blutgerinnung. Ergelnisse der Physiologie,

Mosso (A.). — Un venin dans le sang des Murénides. Arch. Ital. de Biol. 1888, X ID. ru.

Noc (F.). — Sur quelques propriétés physiologiques des différents venins des Serpents. IT. Pouvoir coagulant. Ann. Inst. Past., 1904, XVIII, p. 387-406.

Nozr (P.). — La solution de fibrinogène réactif de la coagulation du sang. C.

R. Soc. Biol., 1919, CXXXII, p. 915.

Pancert et Gasco. — Atlti della R. Acc. delle Scienze Fis. et math. di Napoli,

PickeRiING. — Journ. of Physioology, XVII, n°% x et 2.

Prisazix (C.). — Venins et coagulabilité du sang, C. R. Soc. Biol., 1899, LI, p. 834.

Puisazix (C.). — Relations entre le venin de Vipère, la peptone et l’extrait

de sangsue au point de vue de leur influence sur la coagulabilité du sang, id., p. 865.

Paisazix (C.). — Sur la coagulation du sang chez la Vipère, id. p. 88r.

Paisazix (C.). — Action du venin de Vipère sur le sang de chien et de lapin, Pull du Mus., x002, n° 8, p: 530, C. R. Soc. Biol., 1902, LIV, p. ro67.

Racnar (N.). — Le venin de la Vipère de Russel de l'Inde. Thèse de Lausanne, 1912.

Racorzi (V.). — Ueber die Wirkung des giftes der Naja tripudians, Wirchows Arch: 1895, GXXIE; p. 267.

Ricuarps (V.). — Snake poisoning antidotes. The nature of snake poisoning ands its action on the blood. Indian An. med. Sciences, 1872-73, XV,

Rocers (L.). — On the physiological action and antidotes of Colubrine and Viperine snake venoms. Proc. Roy Soc. London, 1903, CXCVII, p. 123.

Rourrr (G.). — Recherches anatomiques sur un cas de mort par morsure de Vipère. Arch. Ilal. de Biol., 1884, V, p. 57.

SAMMARTINO (S.). — Serpientes venenosas de la Republica Argentina. Tesis Veterin. B. À. x917.

SILBERMINZ. — Le sang des animaux intoxiqués par le venin de Cobra. Thèse méd. Lausanne, 1910.

STAWSKA (Mile B.). — Etudes sur le venin de Cobra. Thèse méd. Lausanne,

Srepnexs et Myers. — The action of Cobra poison on the blood. A contri-

bution to the study of passive immunity. Journ. of. Path. and Bact.. 1898, V. p. 279 ; id. 1899 ; et rgoo, VI, p. 275, 415.

Wazz (A.-J.). — Indian snake poisons, their nature and effects, London, 1883, p° 15, 42, 76:

WoLmEer. — Arch. f. Exp. Path. und Pharm., XXXI, p. r.

Historique. -— La fonction salivaire présumée des glandes veni. meuses des serpents a entraîné de bonne heure la comparaison entre le venin et les ferments des sucs digestifs ; c’est ainsi que, en 1843, LUCIEN Bonaparte considère la substance active du venin de Vipera berus comme une ptyaline, et qu'il la désigne sous le nom de Vipérine ; que Werr-Mrr- CHELL, en 1860, assimile pareillement la substance active du venin de Crotale, la Crotaline, à la ptyaline et à la pepsine.

C’est aussi l’opinion de Vraup-Granp-Marais (1863-1869), qui considère la substance active du venin de Cobra, la Vajine ou Elaphine comme équivalente aux deux précédentes, et propose de les réunir sous le nom commun d'Echidnine ou Echidnase. Mais aucune expérience précise ne déterminait la nature du pouvoir digestif du venin.

Les premiers essais dans cette voie sont dûs à pe LaACERpA qui, en 1884, opérant avec la venin d’un Bothrops (probablement Lachesis lanceolatus), constate que ce venin émulsionne les graisses, coagule le lait, dissout la fibrine et le blanc d'œuf coagulé, mais ne saccharifie pas l’amidon.

L'hypothèse de l’action diastasique des venins a été reprise en 1889 par Roussy, puis étayée et développée par un certain nombre d'auteurs, qui ont employé à cette étude les procédés de la technique moderne. Ces auteurs ont distingué dans les venins divers ferments dont l’action explique un certain nombre de phénomènes observés soit in vivo, soit in vitro.

Action coagulante sur le sang

Nous avons vu que certains venins, la plupart de ceux des Vipéridés et des Colubridés Protéroglyphes d'Australie, contiennent une proportion élevée de fibrin-ferment auquel est due la coagulation du sang, soit in vivo, soit in vitro.

D'après Massor, l’action anticoagulante du venin de Cobra serait due aussi à un ferment, antagoniste du premier.

Contrairement aux autres venins étudiés, les fortes doses de venin de Cobra favorisent la coagulation thermique du sérum normal de cheval; ils la gènent à dose moyenne (2 milligr. par exemple pour 2 cc. de sérum). Il paraît aussi seul précipiter les solutions en eau distillée de sérum de cheval ou d’hématies hémolysées.

L'étude spéciale que nous avons donnée de la coagulation du sang par les venins nous dispense d’un plus long développement.

Action coagulante sur le lait

De Lacerpa a observé le premier l’action coagulante du venin de Bothrops (Lachesis) sur le lait. Houssay et NeGRETTE ont confirmé le fait et l'ont étendu aux venins de Crotale, d'Elaps et d’Ancistrodon. L'action

est analogue à celle de la présure ; elle est plus facile avec le lait cru qu'avec le lait bouilli.

Cette action est favorisée par les acides faibles, par les sels alcalinoterreux (y compris ceux de magnésium et de manganèse), et aussi, bien qu'à un moindre degré, par les chlorures. Les décalcifiants (oxalates, citrates, fluorures) l’empêchent ; les sulfates et les phosphates la diminuent. La filtration, l'agitation avec le noir animal, le chauffage à 70° détruisent le pouvoir coagulant ; le sérum de cheval le réduit un peu ; les sérums antivenimeux le neutralisent en général spécifiquement ; cependant le sérum Welcome (anticobra et antidaboiïa) n’a aucune action sur le faible pouvoir coagulant de l’un ou l’autre venin.

Action diastasique

Les expériences de LacErpA, faites tout au début de l’ère bactériologique, ne présentent pas au point de vue de leur technique les garanties suffisantes à éliminer les actions microbiennes ; aussi les conclusions qui s’en dégagent demandent-elles vérification.

En 1893, MM. Prisarix et BERTRAND mettent en évidence, dans le venin de Vipère aspic, la présence d’une substance diastasique, et la désignent sous le nom d'’échidnase. Cette substance digère les tissus au con. tact desquels le venin est inoculé, et détermine une action phlogogène plus ou moins étendue. Son existence confirme l'hypothèse émise par Roussy en 1889 sur la nature diastasique de quelques principes actifs des venins.

WEHRMANN en 1894, et un peu plus tard Lauxoy (1902), reprennent l'étude ébauchée par DE LAcERDA ; ils constatent tous deux que le venin n'hydrolyse ni l’amidon, ni l’inuline. Le saccharose est légèrement interverti par les venins de Cobra et de Vipère. Les glucosides : amygdaline, coniférine, salycine, arbutine, la digitale, ne sont pas modifiés ; les venins employés ne contiennent donc pas d’émulsine.

Ces résultats ont été confirmés et étendus par Houssay et NEGRETTE aux venins de diverses espèces de Lachesis, de Crotales, d’Ancistrodon, d'Elaps, au Pseudechis, au Notechis pour l’amidon et la phloridzine ; mais ces venins n'intervertissent pas le saccharose.

Les mêmes auteurs ont reconnu que les extraits d'organes des Serpents possèdent les propriétés diastasiques des venins, mais à un faible degré par rapport à ceux-ci ; il ont en plus le pouvoir amylolytique. La plupart agissent sur la lécithine, surtout ceux de pancréas, de foie, de glande à venin, de muscles, de rein, de cœur. Ils n’ont pu mettre en évidence aucune action protéolytique en milieu neutre ou alcalin. L’estomac seul contient de la pepsine et de la présure. Les extraits d'organes contrarient l’action présurante du venin.

D'après Lauoy, le venin de Cobra n’a aucune action catalytique sur les ferments solubles, émulsine, amylase et pancréatine ; il inhibe légèrement celle de la pepsine.

D'autre part, DELEZENNE, en 1902, montre que le venin contient une

kinase capable, comme l’entérokinase, d'activer le suc pancréatique ; il permet à ce suc d’hydrolyser énergiquement l’albumine ; c’est ainsi que la quantité de 0,5 à 1 milligr. de venin de Lachesis, ajouté à 1 cc. de suc pancréatique, digère complètement o gr. à d’albumine en 10-12 heures ; les faibles doses de o milligr. 2 à o milligr. o125 suffisent à digérer la même quantité d’albumine en 24-72 heures. Le venin de Cobra est un peu moins actif ; la dose nécessaire n’est jamais inférieure à o milligr. 5 ; elle est cinq fois plus forte pour le venin de Vipera berus.

Le chauffage à 100° pendant 15 m. détruit le pouvoir kinasique du venin.

Action protéolytique

En 1902-1903, L. Launoy emploie à l’étude de cette action la méthode de Beckmann, dans laquelle on insolubilise les albuminoïdes non digérés, en portant à sec le liquide qui les contient, après addition d’aldéhyde formique. On effectue ainsi la séparation des produits de digestion. Le dosage est fait d’après la méthode de Kjeldahl.

En faisant agir une macération glycérinée de glandes à venin de Vipère aspic sur une solution de caséine dans l’eau de chaux, ou sur des dilutions de sérum de bœuf, il a constaté qu’une légère fraction des albuminoïdes est rendue soluble, mais n’est que rarement peptonisée ; il se forme des albumoses à réaction biurétique, précipitables par l'acide nitrique, le chlorure de sodium et le sulfate d’ammoniaque.

Les protéines et les fibrines coagulées ne sont pas attaquées par les solutions filtrées de venin de Cobra. Il n'existe pas de tyrosinase dans les deux venins essayés.

Les expériences de DELEZENNE ont d’autre part montré que le venin de Lachesis digère complètement la gélatine, qui ne peut plus être soli difiée.

FLexNer et Nocucar, dans le but d'expliquer le ramollissement rapide des muscles envenimés, mis en évidence par les tracés de Werr-MircnELzz et REICHERT, entreprirent (1902), une série d'expériences pour rechercher la présence d’un ferment protéolytique. La modification du tissu musculaire apparaît dans les 30 minutes à quelques heures ; elle est donc indépendante des actions microbiennes, et apparaît surtout comme d'ordre chimique. |

Les auteurs essayèrent l’action des venins de Crotale et de Cobra sur plusieurs substances protéiques en solutions salines stériles, préparées en filtrant au filtre Chamberland, le venin dissous. Dans quelques expériences, la solution était conservée sous une couche de toluol.

La solution à 10 % de gélatine, mélangée avec des solutions contenant 10 milligr. de venin (sec) de Crotale ou de Cobra, est liquéfiée en 16 heures avec le premier venin, en 2 jours avec le second. La fibrine, portée à la température de coagulation (60° à 62°), n’est pas attaquée,

non plus que l’albumine de l’œuf coagulée. D'autre part, la fibrine fraîche retirée du chien, du lapin et du cobaye, est facilement et plus rapidement désagrégée par le venin que dans les tubes témoins. Les venins chauffés à 75° pendant 30 minutes perdent leur pouvoir liquéfiant, et l'addition de sérum antivenimeux ne change pas les résultats.

Des tranches minces de muscle de pigeon et de cobaye sont soumises en tubes à essai à l’action de solutions à 2 % de venins de Cobra, de Crotale et de Mocassin (les solutions de venin stérilisées par filtration au filtre Chamberland) ; dans une 2° série de tubes, le muscle est plongé dans le sérum stérile du même animal; dans une 3° série, le muscle se trouve seul, à la même température de 36°. Dans les tubes témoins, aucun changement n'était survenu au bout de 6 heures ; dans les tubes à venin le muscle au bout de 2 heures était déjà gonflé, de couleur grisâtre ; les fibres étaient séparées. Au bout de 3 heures, une simple agitation du tube achevait la dissociation, qui était complète au bout de 6 heures. Le sérum de Crotale n’a pas d'action liquéfiante sur la gélatine. FLexner et Nocucxi concluent de ces faits que ce venin contient une substance capable de modifier la protéine, et qui produit in vivo les modifications qu’on observe sur les muscles des animaux envenimés.

Noc (1904), sous la direction de A. CALMETTE, a fait de très intéressantes expériences sur l’action protéolytique de différents venins sur la fibrine et la gélatine.

Après avoir établi l’action du processus protéolytique dans la digestion du plasma coagulé par le venin et l’incoagulabilité du sang qui en esi la conséquence, il étudie l’action sur la fibrine isolée du sang de cheval et de lapin ; il opère à la température de 37° et en milieu toluolé. Ses résultats sont résumés dans le tableau suivant :

1 CC. d’une solution à 1 % de venin de :

Ancistrodon piscivorus digère 3 centigr. de fibrine en 2 heures Ancistrodon contortrix — — — 2 heures Lachesis lanceolatus — — — 2 heures Lachesis flavoviridis — — — 3 heures Vipera russelli — — — 24 heures Naja tripudians \ n’attaquent que très légèrement la fibrine

Naja nigricollis en 24 heures.

Bungarus cœrulens

Les résultats sont presque identiques avec la gélatine: si à une solution de gélatine à 20 % et thymolée à 0,2 %, on mélange 1 milligr. de chaque venin, et qu’on expose à l’étuve à 37°, on observe, en suivant d'heure en heure les effets par le refroidissement des tubes à 15°, que dans tous les tubes contenant le venin, la gélatine reste liquide.

Noc étudie comparativement le pouvoir anticoagulant de ces venins sur le sang in vitro ; et trouve un parallélisme parfait entre les propriétés protéolytiques et anticoagulantes, d'où il conclut que les phénomènes

d'incoagulabilité sont liés à l'action protéolytique du venin sur la fibrine : le chauffage à So° pendant 30 minutes en tube scellé détruit en même temps les deux propriétés. Il est difficile d'isoler la substance protéolytique ou anticoagulante des venins de la substance hémolysante ; l’alcool et les sels précipitent presque toutes les substances albuminoïdes en solution aqueuse ; on retrouve toutes les propriétés du venin dans le précipité redissous dans l’eau salée à 7 pour 1.000. Le sérum antivenimeux, préparé par CALMETTE, n'empêche pas l’action anticoagulante des venins in vitro, car il est préparé avec du venin chauffé ayant perdu tout pouvoir coagulant, mais il est fortement antihémolytique.

Lorsque le sérum est obtenu avec des venins non chauffés de Vipéridés, filtrés simplement à la bougie Chamberland, il peut neutraliser l’action protéolytique du venin sur la fibrine et la gélatine.

D'après BEAUIEAN (1913), le venin de Bitis arietans est très protéolytique vis-à-vis de la fibrine et de la gélatine.

Houssay et NEGRETE (1918), ont repris l'étude des actions fermentatives des venins. En ce qui concerne l’action protéolytique, ils ont cons. taté qu'elle n’est ni aussi générale, ni aussi forte que celle de la trypsine, elle est cependant manifeste avec les venins de Lachesis, d’Ancistrodon et de Crotalus adamanteus; moindre avec ceux de L. jararacusu et de Cr. terrificus ; excessivement faible avec ceux de Cobra et d'Elaps.

Les venins ne dissolvent pas les protéines solides, sauf la fibrine au contact de l’eau salée. Quelques venins qui, à dose convenable, coagulent le fibrinogène, le rendent incoagulable à dose plus élevée, et peuvent ensuite l’altérer profondément.

Les venins protéolytiques changent l'état des protéines du sérum sanguin puis les digèrent. Ils retardent généralement et peuvent empèêcher la coagulation thermique.

Ces venins forment aux dépens des protéines dissoutes des substances biurétiques dialysables et une très petite quantité d'acides aminés. Ils transforment la caséine dissoute, de telle sorte qu'elle ne précipite plus par l’acide acétique. Après avoir subi l’action des venins, la gélatine n'est plus apte à solidifier, ce qui confirme les observations des précédents auteurs.

La spécificité non rigoureuse des antisérums a été observée vis-à-vis de ces actions dans les mêmes conditions que pour les autres actions des venins.

M. J. Orrro confirme (1919), les résultats de Houssay et NEGRETE avec les mêmes espèces de serpents, les effets protéolytiques sont mis en évidence par les variations de la conductibilité électrique. La protéolyse quand elle existe, ne paraît produire que très peu d'acides aminés.

Action lipolytique

DE LacerpA, à signalé l’action émulsionnante du venin de Bothrops sur les corps gras.

NEUBERG et ROSENBERG (1907), essayant cette action sur la lécithine, l'huile d'olive et l'huile de ricin, ont montré qu'elle est faible, et qu’elle peut être accélérée par addition de sulfate de manganèse. La preuve de l'existence d’un ferment lipolytique dans le venin exige un dosage quantitatif très strict, car les matériaux mis en usage pour cet essai, principalement les substances lipoïdes, ont une acidité propre. La réaction est si faible (comme celle d’ailleurs du venin sur les corps gras neutres), que le degré d’acidité après lipolyse ne dépasse pas de 1/10 sa valeur primitive ; elle peut atteindre 1/3 de cette valeur quand on emploie le sulfate de manganèse (Mn So‘) comme activateur. Le dédoublement de la lécithine par le venin est beaucoup plus sensible ; l’acidité peut devenir 5 fois plus grande dans le cas du venin de Cobra, et double dans celui du venin de Mocassin. L'action lipolytique du venin de Crotale sur la lécithine n’a pas été essayée.

D'après les auteurs, la ricine et la crotine (à un degré toutefois beau coup moindre), possèdent la même propriété de dédoubler les corps gras, plus marquée que celle du venin de Crotale. Le venin d’Abeille aurait aussi une certaine action lipolytique.

Les recherches toutes récentes de Houssay et NEGRETE (1918) donnent des résultats conformes aux précédents, et s'étendent à un plus grand nombre de venins. En ce qui concerne l’action sur les graisses neutres (huile d'olive et de ricin), les auteurs observent que le venin de Cobra a une très légère action, et celui d’Elaps une action plus marquée, tous les autres essayés s'étant montrés inactifs.

Les venins d'espèces appartenant aux genres Lachesis, Crotalus, Elaps, Ancistrodon, Pseudechis, Notechis, Naja.…, dédoublent la lécithine avec apparition d’un fort pouvoir hémolytique. L'action saponifiante est favorisée par la présence de sels de calcium et de sérum normal ; elle est neutralisée par le sérum antivenimeux correspondant. Le chauffage à 50°, à 100° détruit le plus souvent le pouvoir lécithinasique (Lachesis, Ancistrodon) ; parfois ce pouvoir résiste (Elaps, Crotale...) ; avec les venins de Pseudechis, Notechis, Naja et Daboia, le pouvoir faiblit fortement à un moment donné puis augmente de nouveau pour s'atténuer enfin progressivement.

DELEzENNE et LEepeBT ont, en 1911, confirmé et la faible action sur les corps gras neutres, et l’action lécithinasique du ferment du venin de Cobra, qui est capable de dédoubler les phosphatides du sérum de cheval et du vitellus de poule pour former aux dépens de la lécithine une hémolysine très active, la lysocithine, chimiquement définie comme éther palmitophosphoglycérique de la choline, et avec le vitellus seul une toxine d'activité plus grande et différente de la neurotoxine du venin. Poursuivant sur les venins d'autres serpents ces premières recherches, DELE- ZENNE ajoute qu'ils se présentent dans l’ordre suivant au point de vue de leur activité lécithinasique décroissante : venins secs de Naja tripudians,

N. haje, Sepedon (Colub. Protéroglyphes), Cerastes cornutus. Vipera aspis, Bitis arietans (Vipéridés).

Il met en évidence le rôle du zinc dans l’activité du ferment. Le zinc,

que JAviILLIER, en 1908, a montré être un des éléments constants des organismes végétaux, se trouve aussi, d'après DELEZENNE, dans l'organisme des animaux, et serait plus particulièrement abondant dans le venin des serpents, où l’ordre indiqué plus haut marquerait sa teneur décroissante. C'est ainsi que dans le venin des C. Protéroglyphes, il forme de 5,6 à 3,1 pour 1.000 du poids sec, et dans celui des Vipéridés 2,3 à 1,1, suivant les espèces, alors que la teneur de l’hémoglobine en fer n’est que de 3,3 pour 1.000.

Des éthers phosphorés autres que la lécithine subissent de la part des venins une telle hydrolyse : ce sont les acides nucléiques formés de quatre molécules d'acide phosphorique unies entre elles en chaîne, et unies chacune d'autre part par l'intermédiaire d’une molécule sucrée à une base purique ou pyrimidique. Contrairement aux nucléases des tissus, les ferments des venins, en séparant l’acide phosphorique, laissent couplés le sucre et la base qui lui est attachée. Tous les venins essayés ont la même action sur les acides nucléiques, mais l'intensité en est d’autant plus marquée que la toxicité générale et la teneur en zinc est plus grande ; une faible variation de teneur en zinc entre deux échantillons d'un même venin entraîne une variation d'activité de même sens (DELEZENNE et MorEL).

De plus, les essais pratiqués par DELEZENNE pour augmenter l’activité fermentaire des venins, par addition de zinc colloïdal, d'oxyde ou de sel n'ont eu aucun succès. Le zinc actif doit être combiné vraisemblablement aux protéoses, et son rôle paraît analogue à celui qui a été attribué au manganèse dans les oxydases.

De toutes les actions physico-chimiques dues aux venins, celles qui sont produites par les ferments sont particulièrement intéressantes.

Les proportions relatives de ces divers ferments et leur quantité absolue varient avec l’espèce venimeuse, et dans un venin déterminé avec des circonstances encore peu connues.

La mesure dans laquelle ils participent à la toxicité générale, mesurée in vivo, n'est pas encore bien déterminée pour la plupart ; ils se manifestent surtout par l’action locale, plus ou moins phlogogène, l’hémolyse, la lipolyse et la coagulation.

D'après les recherches récentes (1919) de DeLEzENNE et Morez, les venins de serpents qui dédoublent la lécithine, hydrolysent les acides nucléiques avec mise en liberté de phosphate monosodique. L'augmentation de l'acidité à la phtaléine, par laquelle on peut caractériser la vitesse de la transformation, est d’abord très rapide ,puis de plus en plus lente. De faibles doses de venin permettent d'obtenir la même acidité finale que de fortes doses, mais demandent un temps d’action plus prolongé. Son

action, nulle à o°, maxima à 50° environ, décroît à température plus

élevée, et se perd par le chauffage préalable à 100° ; elle peut être inhibée par addition de sérum antivenimeux spécifique. À concentration égale de matière à transformer, la quantité de celle qui est transformée en un temps donné est sensiblement proportionnelle à la racine carrée des quantités de venin (loi de Schutz-Borissov). Tous les venins de Colubridés Protéroglyphes et de Vipéridés ont la même action sur les acides nucléiques, mais l'intensité de cette action est d’autant plus marquée que la toxicité générale est plus grande : les venins des Protéroglyphes sont à. ce titre plus hydrolysants que ceux des Vipéridés.

Bibliographie

ArTaus (M.). — L’antithrombine engendrée dans les intoxications protéiques est-elle exclusivement d'origine hépatique? C. R. Soc. Biol., LXXXIT, 1919, P. 416.

BEAUJEAN (R.). — Bull. Soc. path. exot. 1913, IV, p. 50 (loc. cit.).

BONAPARTE (L.). — Gaz. tosc. delle Sc. medico-fisice (Loc. cit.).

DELEzENNE (C.). — Sur l’action kinasique des venins, C. R. Ac. des Sc. 1912, CXXXV, p. 329.

DELEzENNE (C.). — Diastases protéolytiques et coagulantes des venins, Bull. Ac. Méd., 6 déc. r9r0.

DeLezenNE (C.). — Le zinc, constituant cellulaire de l’organisme animal. £a

présence et son rôle dans le venin des Serpents. Thèse Doct. ès-sc., 1919. In. Ann. Inst. Past., XXXIII, févr. 1919, p. 68-136.

DeLezEnne (C.) et Morer, (H.). — Action catalytique des venins des Serpents sur les acides nucléiques, C. R. Ac. des Sc., CLXVIII, 1919, p. :44.

FLExNER (S.) et Nocucur (H.). — The constitution of snake venom and snake sera. Univ. of Pens. Med. Bull., 1902-03, XV, p. 345-362.

Houssay (B.-A.) et NeGRETE (J.). — Accion de los venenos de Serpientes sobre los hidrocarbonados, las grasas y la leche, Rev. del. Inst. bact. (Buenos- Aires), 1918, 1, p. 173-194.

Houssay (B.-A.3. et NEGRETE (J.). — Experimentos sobre las propriedates diastasicas de los extractos de organos de Lachesis alternatus, id. I, août 1918, p. 451-460.

Houssay (B.-A.) et NEGRETE (J.). — Estudios sobre venenos de Serpientes. III. Accion de los venenos de Serpientes sobre la substancias proteinas. IV. Datos complementarios sobre algunas acciones de los venenos de Serpientes. Id. I, avril et août 1918, p. 341-373 et 461-470.

Lacerpa (J.-B. de). — Leçons sur le venin des Serpents du Brésil. C. R. Soc. Biol., 25 juin 188.

Lauxoy (L.). — Action de quelques venins sur les glucosides. Action du venim de Cobra sur l'émulsine. C. R. Soc. Biol. 1902, LIV, p. 669.

Launoy. — De l’action amylolytique des glandes salivaires chez les Ophidiens, Bull. du Mus., 1902, p. 88.

Lauxoy (L.). — Sur l’action protéolytique des venins. C. R. Ac. des Sc., 1902, CXXXV, p. 4or, Thèse Doct. ès sc., Paris 1903, n° 1138.