TOME

Mrrcuezz (S. Wei). — Researches upon the venom of the Rattle snake. Smith Cont. to knowl. Philad., 1860, et Am. Med. Chir. Rev., 1861, V, p. 209-311.

NeuBERG et RosENBERG. — Lipolyse, Agglutination, Hæmolyse. Berl. Klin Woch., 1907, XLIV, p. 54.

Noc (F.). — Sur quelques propriétés physiologiques de différents venins de Serpents. An. Inst. Past. 1904, XVIII, p. 387-406; $ III Protéolyse.

Orero (Maria Julia). — Sobre la accion proteolitica de los venenos de Ser-

: pientes. Rev. del Inst. Bact. Buenos-Aires, Juin 1919, 6 p.

Prisazix (C.). — Nouveaux procédés de séparation de l’échidnase et de l’échidno-vaccin du venin de Vipère. Cong. int. de Méd. de Moscou, août 1897.

Paisazix (C.). — Nouvelles observations sur l’échidnase. C. R. Soc. Biol., 1899, LI, p. 658 ; C. R. Ac. des Sc.; 1899; CXXIX, p. rx:

Scorr (J.). — The influence of the Cobra venom on the proteid metabolism. Proc. Roy. Soc. Lond., 1905, LXXVI, p. 166-178.

Viaup GRAND Marais (A.). — Etudes médicales sur les Serpents de la Vendée et de la Loire-Inférieure, 2° édit. Paris, Baillère, 1867-69

WEHRMANN. — Sur l’action diastasique des venins. An. Inst. Post., 1898, XI, p. 510.

Borper a montré en 1899 que, par des injections répétées de sérum d'une autre espèce dans le péritoine d’un lapin, le sérum de cet animal acquiert la propriété de former un coagulum ou un précipité, quand il est mélangé avec le sérum d’un animal de la même espèce. Le même résultat est obtenu avec une substance protéique.

La réaction de précipitation est hautement spécifique, mais ne l’est pas absolument. Outre les précipitines spécifiques pour de nombreux sérums de différentes espèces, y compris le sérum humain, des précipitines ont été trouvées pour d'autres substances protéiques telles que la caséine du lait, les albumines pathologiques de l'urine, l’albumine cristallisée de l'œuf, pour la globuline pure du sérum du mouton et du bœuf, de la peptone de Vitte, des protéines des muscles.

En 1900, Myers montre qu'une précipitine préparée par des injec-

tions d’albumine d'œuf n’a pas d'action sur les autres protéides, la séro-

globuline du mouton et du lapin et la peptone de Vitte. Il trouve cependant que la précipitine obtenue avec la séro-globuline du mouton forme un faible coagulum avec la séro-globuline de bœuf et réciproquement. Linossier et LEMOINE (1902) montrent que les précipitines sont relativement spécifiques, et deux faits indiquent qu'il en est bien ainsi

1° La quantité minima de précipitine nécessaire pour donner un précipité est moindre dans Je cas du sérum correspondant que dans ie cas des autrès sérums ; 2° le précipité obtenu est beaucoup plus volumineux avec le sérum correspondant qu'avec les autres sérums.

Nurraz observa que la réaction est plus intense quand l'animal récepteur et celui qui fournit le sérum inoculé sont très éloignés dans l'échelle zoologique. UnLEeNauTH, WAssERMANN et ScHüTzE ont appliqué la spécificité de la précipitine au sang humain en médecine légale pour identifier la source d'une sang inconnu. Tout récemment la réaction de précipitation a été préconisée par WassermanN pour déceler l'adultération de saucisses et de certains mets prohibés pour l'alimentation de l’homme. D'après Nocucnr, on peut produire des précipitines même chez certains Invertébrés, tels que les Crustacés.

Mais c’est LauB qui, le premier, en 1902, étudia la formation de précipitines avec le venin des serpents, et qui appliqua cette réaction à distinguer les différentes protéines de ces venins.

Il immunise des lapins par des injections, répétées pendant 4 ou > mois, de venin de Cobra, et obtient un sérum très précipitant quand on le mélange au venin de Cobra.

Pour essayer le pouvoir précipitant du sérum du lapin préparé, il mélange 2 ou 3 parties de sérum avec 1 partie d'une solution venimeuse,

7ÙS8 SERPENTS

dont la concentration varie de 0,1 à o,0001 pour 100, et note la quantité de précipité formé après 18 à 24 heures. (La solution à 1 % de venin ne peut être employée pour l'essai, car à cette concentration elle donne un précipité plus ou moins abondant avec le sérum normal de lapin, dans les proportions de 4 parties de sérum pour 1 de venin).

Laug attire l'attention sur deux faits importants : 1° le sérum est actif pour les protéides du venin de Cobra qui sont incoagulables par la chaleur; effectivement: une solution de venin étant divisée en 2 parties, si on chauffe l’une à 75° pendant une demi-heure, qu'on la filtre pour séparer les protéines coagulées, et qu'on traite ensuite les deux solutions par le sérum, on n'observe pas de différence entre les précipités obtenus.

2° Le chauffage du sérum à 59° ne modifie pas l’action de la pré: cipitine. En effet, vis-à-vis d'une solution de venin de Cobra à 0,1 p. 100 le sérum chauffé et le sérum non chauffé donnent le même précipité.

LamuB a obtenu exactement les mêmes résultats avec le venin de Daboia, cependant si différent de celui de Cobra, tandis qu'il ne se produit aucun précipité avec les venins de Bungarus fasciatus, de Notechis sculalus et d'Echis carinatus.

Les expériences de LamB montrent donc que les protéides de deux serpents zoologiquement éloignés peuvent être identiques, d’où il résulte ° que ces protéides précipitables n’ont aucun rapport avec les composés toxiques du venin; 2° que tous les Vipéridés, non plus que tous les Colubridés ne se ressemblent pas relativement à l'existence de ces protéides.

Myers avait trouvé que les précipitines s’épuisent au cours de leur action, ce qu'il considérait comme une forte présomption én faveur de l’action chimique de ces corps. LauB a confirmé ce fait, et a vu que la précipiline du venin de Cobra est complètement usée au cours de son action, et qu’en mesurant avec quelle proportion de sérum et de venin d'une teneur connue, cette usure arrive, ou peut donner une expression numérique de la teneur du sérum en précipitine. Avec le sérum du lapin préparé par lui, la neutralisation complète arrive quand 6 parties de sérum sont mélangées avec 1 partie d’une solution de venin de Cobra à 0,09 p. 100; donc 1 cc. de ce sérum est neutralisé par o millig. o83 de venin en ce qui concerne la précipitine.

L'auteur espère avoir trouvé ainsi un moyen d'étalonnage plus pratique que celui de l’inoculation aux animaux, car il se présente sous forme d’une réaction chimique visible à l’œil nu. Dans un second travail sur le même sujet fait en 1904, Lams étend l'essai de la précipitine à des venins provenant des deux principaux groupes de serpents venimeux, C. Protéroglyphes et Vipéridés.

Le sérum antivenimeux était préparé par des injections TÉDétÉeS de venin de Cobra pur dans le péritoine d'un lapin. Avec ce sérum anticobra, il obtient les résultats résumés dans le tableau suivant

1° PROTÉROGLYPHES :

Elapinés. Hydrophiinés.

Naja tripudians, réaction forte. Enhydrina valakadien, réaction faible.

Naja bungarus, réaction nulle.

Bungarus cœruleus, réaction nul-

le.

Fhngarus fasciatus, réaction nule.

Notechis scutatus, réaction nulle.

2% VIPÉRIDÉS :

Viperines. Crotalinés.

Vipera russelli, réaction forte. Lachesis gramineus, réaction faible Echis carinatus, réaction nulle Crotalus adamanteus, réaction nulle

Il est donc évident que la réaction de précipitation n'a aucun rapport avec la philogénie, non plus qu'avec la constitution toxicologique ou physiologique du venin, et qu'elle est très variable. LamB montra aussi qu'elle est complètement indépendante de la valeur antitorique du sérum ; c’est ainsi que trois antivenins de haute valeur antitoxique n'accusèrent aucun pouvoir précipitant. Il pense que la raison de l’absence de préciptation tient à ce que les ânes et les chevaux qu'on emploie pour la préparation des antivenins ne se prêtent pas à la production de précipitines.

FLexner et Nocucur étaient en même temps engagés dans la même question. Ils emploient les venins atténués par l'acide chlorhydrique faible, par l'acide chlorhydrique et la pepsine, ou par une faible solution de trichlorure d'iode. L'épreuve était réalisée dans des tubes à essai contenant o cc. > de sérum antivenimeux et o cc. » d’une solution de venin à D p. 1000.

Les auteurs font les constatations suivantes

1° Les précipitines se forment soit avec, soit indépendamment des principes immunisants du venin ; 2° il n'y a aucune relation entre Je pouvoir protecteur ou antitoxique du sérum et la quantité de précipitine qu'il contient ; 3° les précipitines peuvent se produire chez les animaux préparés, même lorsque les venins modifiés ne déterminent pas la formation de substances immunisantes ; 4° les précipitines produites avec les divers venins de Cobra, de Crotale, de Daboia sont fortement, mais non absolument spécifiques.

Ce sont là des résultats qui concordent avec ceux de Las, et qui ont été récemment confirmés par Houssay et NEGRETE.

En 1904 également, Nurraz résume dans une monographie très complète les connaissances du moment sur la question des précipitines ; cette étude, dédiée à Enrricn et à MErcnNiKorr, renferme dans son introduction des considérations générales sur la théorie d'Enrricn, ainsi que des notions sur les divers antigènes et leurs anticorps : antitoxines, hémolysines, agglutinines, etc. NurraL traite spécialement des précipitines et de leur préparation. Après avoir considéré la nature de la substance précipitogène et du corps précipitant, Nurraz admet la spécificité des précipitines. Les faits mis en lumière lui ont permis d'établir des rapports entre un très grand nombre de sérums: de l'homme, de singes, d'oiseaux, de poissons, etc... Un des derniers chapitres est consacré à la médecine légale et à l'hygiène ; l’auteur y expose sa méthode, qui permet d’apprécier quantitativement le pouvoir précipitant des sérums spécifiques. Il donne la bibliographie complète de la question, et c'est principalement à ce titre que nous le mentionnons.

En 1907, Isxizaka montre que le sérum antivenimeux monovalent de Lachesis flavoviridis donne un abondant précipité avec le venin correspondant, alors qu'avec le venin de Vipère il n’en donne qu'un très léger ou même aucun.

CALMETTE et Massor,, en 1909, reprennent l'étude des précipitines du sérum anticobra vis-à-vis du venin de Cobra. Contrairement à l'opinion exprimée par Lame, le sérum antivenimeux précipite le venin de Cobra ; mais, pour cela, il doit être employé dans les proportions exactement nécessaires pour le neutraliser, c'est-à-dire telles que le mélange sérum + venin devienne atoxique.

L'excès de chacun des réactifs empêche la précipitation, qui demande environ une heure à la température ordinaire pour se produire.

La réaction peut donc être utilisée in vitro pour un titrage préliminaire et approximatif du sérum.

Le venin, débarrassé des albumines coagulables par chauffage pendant 3 minutes à 76-78°, suivi de filtration, est précipité comme le venin non chauffé.

Le précipité venin+sérum séparé par centrifugation, lavé et desséché, se redissout dans l’eau acidulée d'acide chlorhydrique ou dans un léger excès de venin. Il est insoluble dans l’eau salée physiologique ou dans un excès de sérum.

Sa solution en milieu chlorhydrique est atoxique pour la souris ; mais chauffé pendant 1 heure à 72°, elle récupère presque complètement le venin qu'elle contenait (83 à 94 %) par destruction de l'antitoxine.

Le poids du précipité sec est plus de 4o fois le poids du venin primitif.

La digestion tryptique libère un peu de venin du mélange venin +sérum ; la digestion par la papaïne en libère une quantité encore moindre ; mais les liquides de digestion traités ensuite à 72° par l'acide

chlorhydrique libèrent au total, toujours par destruction de l’antitoxine, autant de venin que le précipité primitif.

Le venin ainsi régénéré est à nouveau neutralisable par le sérum spécifique.

Aïnsi, entre le sérum antivenimeux et le venin correspondant, la combinaison chimique formée est instable, et ses composants peuvent encore être dissociés par destruction de l’antitoxine plus de deux mois après la formation du mélange neutre.

Houssay et NEGRETE (1917) ont trouvé dans chaque sérum antivenimeux un élément précipitant spécifique pour le venin du serpent qui a servi à la préparation. Bien que le pouvoir antitoxique et le pouvoir précipitant soient loin d'aller toujours de pair, il est fréquent que les sérums très actifs à l’un des points de vue le soient à l’autre ; contrairement à CALMETTE et Massor, ils ne considèrent pas que le pouvoir précipitani puisse servir en général à titrer les sérums antitoxiques. Ils constatent aussi que la spécificité, au point de vue de l’action précipitante, n’est pas rigoureusement absolue, car elle s'exerce, quoique moins intense, avec les venins d'espèces voisines et du même continent (Amérique du Sud) ; elle est très faible, ou même n'apparaît pas dans d’autres conditions.

Le venin de Lachesis alternatus, avec lequel les essais ont surtout été réalisés, perd à 72° son pouvoir toxique en même temps que le pouvoir précipitant, ce qui ne permet pas de dissocier à cette température le complexe venin-sérum avec récupération du venin, comme on le fait avec le venin de Cobra, en opérant en présence de l'acide chlorhydrique. Le pouvoir précipitant des sérums est déjà perdu par le chauffage à 65°.

Les auteurs ont vu, en outre, que les sérums antivenimeux, qui précipitent le venin d’une espèce donnée, ne précipitent pas le sérum de la même espèce et n’en neutralisent pas la toxicité. Au contraire, les sérums préparés pour précipiter le sérum sanguin d’une espèce donnée en précipitent aussi le venin, comme l'avait vu Lam pour le venin de Cobra.

Bibliographie

CaLMETTE et Massor. — Les précipitines du sérum antivenimeux vis-à-vis du venin de Cobra, Ann. Inst. Past., 1909, XXIIT, p. 155-165.

Houssay (B.-A.) et NeGRETTE (J.). — Proprieades precipitantes especificas de los sueros antiofidios. Rev. del Inst. Bact. (Buenos-Aires), I, 1910, P. 3-19.

Huwrer (A.). — Notes on precipitins for snake venoms and snake sera, Proc. Physiol. Soc. Lond., 1905, LXI, 20 p.

Isaizaka. — Studien über Habuschlangen gift, Zeits. f. exp. Path. und Therap., 1907, IV, p. 88.

LauB (G.). — On the precipitin of Cobra venom: a mean of distinguishing between the proteids of different snake poisons, Lancet 1902, CLXIIH, p. 431-435.

Myers (W.). — The standardization of antivenomous serum, Lancet, 1900, I, p. 1433-1434.

Nurraz (G.-H.-F.). — Blood immunity and blood relationship the precipitin in test for blood, Univ. Press. Cambridge, 1904, p. 329, 444 p.

WELSCH AND CHAPMAN. — On the main source of « Precipitable » substance and on the role of the homologous Proteid in precipitin reactions, P. R. S. of London, 1909, S. B., LXXVIII, p. 297-313.

La facilité avec laquelle les blessures venimeuses s’infectent a été remarquée par la plupart des observateurs ; elle est surtout manifeste avec le venin des Vipéridés, et constitue l’un des principaux dangers de l’envenimation.

La cause de cette diminution de la résistance des tissus envenimés aux infections n’a été élucidée qu'en 1893, époque à laquelle Wiczrau-H. Wezcn et C.-B. Ewinc montrèrent que le venin annihile le pouvoir bactériolytique du sang : des cultures de bacilles de l’anthrax et du choléra, introduites respectivement dans du sérum normal et dans du sérum de lapin envenimé mortellement, sont partiellement stérilisées par le premier, et pas du tout par le second.

C’est à la perte de la propriété bactéricide normale de leur sérum que les animaux envenimés devraient de servir aisément de milieu de culture aux bacilles des infections.

Une étude complète du même phénomène fut réalisée par FLEXNER et Nocucur sur le chien, le lapin et un Batracien Urodèle, le Necturus, avec les venins de Cobra, d’Ancistrodon et de Crotale. Ils employaient le bacille typhique, le coli et l’anthracis, et procédaient de la manière suivante

1° [ls retiraient le sang de l'artère fémorale des animaux envenimés et le recueillaient dans des ampoules stériles de Nuttal.

2° Ils retiraient de même le sang d'animaux normaux dans des ampoules de Nuttal contenant une solution de venin.

3° Ils mélangeaient le venin en solution stérile (chauffé 4 jours de suite à 56°-60° pendant 30 minutes chaque fois) avec le sérum séparé.

Les effets bactéricides des sérums normaux furent d’abord établis le sérum de lapin est très bactéricide pour les bacilles typhique, anthracis et coli ; le sérum de chien très destructeur pour le b. typhique, celui de Necturus très destructeur pour les b. typhique et coli, mais sans action marquée vis-à-vis de l’anthracis. Les résultats obtenus par les auteurs sont les suivants :

1° Sur le sérum envenimé in vivo. — C'est le venin de Cobra qui est le plus actif. Le sang de lapins ayant reçu 10 milligrammes de venin et prélevé 57 minutes après, au moment de l’agonie, a subi une grande réduction de son pouvoir bactéricide : les trois espèces de bacilles s’y muitiplient facilement, alors qu'ils étaient complètement détruits (sauf dans quelques expériences où le coli qui, après une diminution considérabl dans les six premières heures, recommençait à proliférer). Les mêmes résultats ont été obtenus avec le venin de Crotale.

2° Sang mélangé au venin in vitro. — Le sang de lapin passait directement de la fémorale dans l’ampoule de Nuttal contenant la solution de

venin. Dans chaque expérience, 6 milligrammes de venin sont mélangés à 20-50 cc. de sang. La coagulation n'étant pas assez rapide, ou ne <e produisant pas, le sérum était obtenu par centrifugation ; il contenait toujours de l’hémoglobine. Les résultats sont concordants et montrent que le sang envenimé a perdu son pouvoir bactéricide. On peut objecter que l'accroissement de la valeur nutritive du sérum, due à l'hémoglobine, peut être la cause des effets obtenus ; mais si, à titre de contrôle, on ajoute au sérum 6 milligrammes de peptone pour 0 cc. de sérum, on constate que l'accroissement de la valeur nutritive réduit l'effet bactéri. cide, beaucoup moins toutefois qu'on ne le constate dans l'effet parallèle du venin.

Les changements nutritifs sont sans importance sur le phénomène, d'après ce que l’on constate in vivo et d’après les expériences suivantes, où le venin est directement ajouté au sérum séparé.

3° Sérum mélangé au venin in vitro. — Les auteurs emploient les sérums de lapin et de chien

1 CC. de sérum de lapin est mélangé avec 1 milligramme de venin de Crotale et 1 cc. de sérum de chien avec 6 milligrammes de venin d’Ancistrodon ; le pouvoir bactéricide de ces sérums est complètement aboli. Celui du sérum de chien contre le b. typhique, à partir de la dose de o millig. o pour 1 cc. de sérum (la dose de o millig. o2 de venin est inefficace dans les mêmes conditions).

FLexxer et NoGucat ont constaté que o millig. 1 à o millig. 6 de venin d'Ancistrodon contortrix ajoutés à 1 cc. de sérum de Necturus, n'enlèvent qu'une partie de son pouvoir bactéricide contre les bacilles coli et typhique ; mais son inaction était très remarquable comparativement aux autres sérums employés.

Les auteurs ont étudié l’action de la chaleur sur le venin au point de vue de ses propriétés bactéricides. A cet effet, du venin de Cobra et d’Ancistrodon étaient chauffés à des températures variant de 75 à 90°, respectivement pendant 30 et 19 minutes, puis mélangés avec le sang ou avec le sérum ; le venin chauffé agit exactement comme le venin non chauffé, sauf dans le cas du venin de Crotale dont l’action est un peu diminuée à 9o°.

FLexxer et Nocucnr attribuent les propriétés antibactéricides des venins divers à la fixation ou l'inactivation de compléments bactériolytiques, et non à quelques altérations perceptibles sur la partie des corps intermédiaires (ambocepteurs) de ces sérums.

Noc, en 1905, fit des observations intéressantes sur les propriétés antibactériolytiques et anticytasiques du venin de Cobra. Il constata que les actions bactériolvtiques des sérums frais de lapin, de cheval, de cobaye, de rat et d'horime sont complètement annihilées par ce venin, et que ce phénomène est dù à la fixation du complément par le venin. Il emploie la réaction hémolytique pour établir l'absence de complément dans le

sérum envenimé. Le sérum normal de rat est hémolytique pour les glo-

bules rouges de cheval, et cette réaction est utilisée comme test. Il pré-

pare 6 mélanges différents

1° Sérum normal de rat 0 c.c. 5.

2° Sérum normal de rat 0 c.c. 5 + 0 milligr. 5 venin cobra ; 15 m. après 1 c.c. antivenin.

s° Sérum normal de rat Ü c.c. 5 + 1 millig. venin cobra; 15 m. après 2 c.c. antiven'n.

4° Venin de cobra 1 miliig.

5° Antivenin 1 c.c.

6° Sérum normal de rat 0 c.c. 5 + 1 c.c. antlivenin.

Deux gouttes de sang défibriné de cheval sont introduites dans chaque tube, et la température maintenue à 37 dans l’étuve : L’hémolyse est complète en quelques minutes dans les tubes 1 et 6 ; elle est complète en 1 heure dans le tube 4 ; aucune hémolyse dans les tubes 2 et 3, ce qui montre que les doses de o millig. 5 et 1 milligramme de venin de Cobra détruisent l’alexine en 15 minutes ; le venin lui-même est neutralisé par l’antivenin après avoir déjà produit son effet destructeur sur l’alexine.

Noc et CALMETTE considèrent ce fait comme dùû à la fixation du complément par l’ambocepteur du venin.

MorGENroTH et Kaya, en 1908, constatent que le complément du sérum de cobaye est détruit en quelques heures au contact du venin de Cobra, soit à 37°, soit à la température ordinaire, mais pas aussi bien à o°.

Un tel sérum est impuissant à activer le venin de Cobra pour hémolyser les hématies de chèvre, bien que la réunion de sérums, de venin de Cobra et de globules réalisent les conditions de l’hémolyse. Simultanément, la fonction complémentaire du sérum pour l’ambocepteur hémolytique anti-chèvre (du lapin immunisé) a considérablement diminué.

Les auteurs considèrent que, dans ce cas, la destruction du complément est due à l’action de certains corps diastasiques dans le venin. La fonction anticomplémentaire du venin de Cobra est détruite à l’ébullition.

Nocucur pense qu'il est possible que la disparition du complément soit due à l’action du ferment protéolytique déjà décrit par FLEXNER et Nocucnr, ainsi que par Noc ; mais il n’y a encore rien de démontré quant à ce mécanisme.

Bibliographie

FLExXNER AND NoGucur. Snake venom in relation to hœmolysis, bactériolysis and toxicity, Jour. of Exp. Med., 1902, VI, p. 277.

MorGexrorTH et Kaya. — Ueber eine komplementzerstürende Wirkung des Kobragiftes, 1908.

Noc (G.). — Propriétés bactériolytiques et anticytasiques du venin de Cobra, Ann. Inst. Past., 1905, XIX, p. 209-224.

Wercx (W.) and EwixG (C.-B.). — The action of the rattle snake venom upon the bactericidal propertes of the blood, Trans. of the first Pan-Am. Med. Cong. Washington, 1893, I, p. 354-355.

(Sang, Œufs)

Historique. -— Les premières constatations relatives à la toxicité des humeurs et des tissus des Serpents venimeux ont été faites en 1893-1894 par C. Puisarix et G. BERTRAND à propos du sang de la Vipère aspic et de deux couleuvres indigènes, la Couleuvre vipérine et la Couleuvre à collier. Ces auteurs ont vu que le cobaye qui a reçu o cc. 5 à 2 cc. de sang ou de sérum dans le péritoine, ou 2 à 3 cc. sous la peau, meurt après avoir présenté les mêmes symptômes que s'il eût été inoculé avec du venin de Vipère.

Les auteurs pensèrent que l’action toxique du sang était due à la présence du venin qui y aurait pénétré par le mécanisme de la sécrétion interne. Cette hypothèse, qui était vraisemblable pour la Vipère, le semblait beaucoup moins pour les Couleuvres, dont on soupçonnait à peine la toxicité salivaire ; mais la mise en évidence expérimentale de la nature venimeuse de la glande parotidienne, à l'exclusion de celle de toutes les autres glandes du corps, confirma l'opinion des auteurs. Ce résultat, quoique établissant un rapport manifeste entre la toxicité du sang et celle des glandes venimeuses ne suffisait pas à décider le sens dans lequel s'effectuait la pénétration du venin, s’il était emprunté par le sang aux glandes ou par ces dernières au sang.

Aussi les auteurs cherchèrent-ils par d’autres moyens à vérifier leur hypothèse : si le venin du sang provient de celui des glandes, en enlevant ces dernières, la toxicité du sang doit diminuer ; c’est ce qui arriva en effet : pendant les dix premiers jours, il ne se produit aucun changement notable ; ce n’est qu'une cinquantaine de jours après qu'on observe une diminution de la toxicité sanguine se manifestant par l’absence des symptômes nerveux, et la survie des cobayes inoculés.

De même, C. Pnisarrx ayant eu l’occasion d'essayer la toxicité du sang de deux Cobras d'Egypte (Naja haje), privés de leurs crochets venimeux et dont les glandes étaient vides, constata que cette toxicité était réduite d'environ un tiers, fait qui concorde avec le résultat des expériences précédentes.

À. Carmerre confirme bientôt (13 janvier 1894), à propos du sang de Cobra, la toxicité du sang des Serpents :

« Il suffit de 2 cc. de sang frais en injection intrapéritonéale pour tuer un lapin du poids de 1.500 grammes en l’espace de six heures. La même dose, en injection intraveineuse de sang défibriné le tue en trois minutes. L'injection sous-cutanée est également mortelle, et les symptômes d'envenimation sont les mêmes que ceux du venin pur. »

L'auteur recherche aussi l’origine de cette toxicité, et, dans un mémoire paru en 1895 sur le sujet, il doit avoir constaté que le sang d’'Ophidien a sensiblement la même toxicité, quelle que soit l'espèce du serpent qui l’a fourni, alors que les venins diffèrent entre eux par leur toxicité : c'est ainsi que le sang de Naja tripudians, de Naja haje, de Cerastes, de Crotale, tue le cobaye à la même dose (o cc. 5 par injection intrapéritonéale) que celui de la Vipère de France.

CazmeTTE objecte aussi l’action de la chaleur, plus rapidement atté nuante sur le sérum que sur le venin : tandis que la toxicité du venin (Naja tripudians, Naja haje, Crotale, Céraste) résiste au chauffage à 68° continué pendant 10 minutes, le sérum de ces espèces et celui de l’Anguille semblablement chauffé ne manifeste plus aucune toxicité vis-à-vis du cobaye.

« Le pouvoir toxique du sérum des Ophidiens n'est donc pas dü, dit CALMETTE, à la présence du venin en nature dans ce liquide, mais à d'autres principes diastasiques cellulaires indéterminés. Peut-être ces principes sont-ils eux-mêmes des éléments constituants du venin, car en l'absence de tout chauffage on constate que le sang de Serpent et celui d’'Anguille, mélangés par parties égales avec du sérum antivenimeux, ne tue pas. »

La similitude des symptômes d’envenimation paraît à l’auteur moins complète qu'il ne l'avait vu tout d’abord avec le sang de Cobra sur le lapin :

« Le sang ne tue jamais, dit-il, dans un délai très court ; même les souris, avec de fortes doses de sang, succombent rarement en moins de deux ou trois heures et les cobayes en moins de six heures. »

De plus, l’inoculation dans le péritoine entraîne une inflammation énorme des intestins et de la paroi au niveau du point inoculé. L'’injection sous-cutanée produit des effets moins intenses, mais s'accompagne d'un œdème considérable. Ainsi, venin et sérum présentent quelque différence dans la durée de l’envenimation et leur action phlogogène locale.

CALMETTE répète ensuite en sens inverse l’expérience de C. Prisarix et BERTRAND sur les rapports de la toxicité du sang et du venin. À cet effet, il neutralise la toxicité du sang du Cobra en lui inoculant du sérum anticobra et constate que, dans ces conditions, le venin conserve la même toxicité ; l’auteur en conclut que le principe toxique du venin s’élabore dans les cellules des glandes.

CazuerrTe recherche ensuite dans l’immunité créée par le venin ct le sérum de nouveaux caractères distinctifs entre leurs substances actives, et constate que « si les animaux qui ont reçu du sang peuvent ensuite supporter une dose assez grande de venin, ceux qui ont reçu d’abord le venin ne supportent pas avec la même facilité l’inoculation du sang. Il paraît donc probable que dans le sang des Ophidiens comme dans celui des anguilles, nous avons affaire à un principe diastasique parti-

culier différant du venin par ses effets physiologiques et par sa manière de se comporter vis-à-vis de la chaleur, mais dont les éléments entrent sans doute en jeu pour constituer cette sécrétion spéciale ».

Pour répondre aux objections précédentes, Prisazix et BERTRAND reprennent, en 1896, sur le sang de Cobra, les expériences qu'ils avaient faites avec celui de la Vipère et des Couleuvres. Ils avaient déjà fait remarquer dans leur mémoire sur le sujet que dans le sérum et le venin il y a des différences entre les caractères physiques et chimiques des principes actifs : la résistance à la chaleur, plus faible pour le sérum que pour le venin, l’action précipitante de l'alcool donnant dans le cas du venin un produit toxique, alors que le précipité formé avec le sérum ne l’est pas. « Il est donc certain, disent les auteurs, que les principes actifs du sang, quoique possédant une action physiologique très voisine de celle du venin, n'y sont pas combinés sous la même forme chimique. Cela n'a rien d'étonnant si l’on réfléchit que le venin est acide et le sang alcalin. On sait combien la constitution des albuminoïdes est influencée par la nature du dissolvant. Il est possible que les substances sécrétées dans la cellule glandulaire et qui rentrent dans le sang soient soumises à des remaniements et modifiées en cours de route dans leur constitution. »

En ce qui concerne la toxicité comparée du sang de Vipère et de Cobra, les auteurs ont vu que le sérum de Cobra chauffé pendant 15 minutes à 28° perd son action phlogogène, capable à elle seule d'entraîner la mort, lorsque l'injection est faite dans le péritoine, mais contrairement au sérum de Vipère, il conserve son action toxique générale. D'autre part, dans l’envenimation, le sérum de Vipère détermine une chute de la température et des troubles médullaires, une hypotension artérielle (KAUFMANN), comme le venin de Vipère, tandis que le sérum de Cobra produit de l'hyperthermie et des troubles bulbaires (hoquets, vomissements, hypersécrétion), comme le venin correspondant. Il en est de même du sérum de Cœlopeltis monspessulana, dont le venin a un mode d'action semblable à celui du venin de Cobra.

Le fait de la toxicité du sang se rencontre aussi chez des animaux où l’on n'a pas jusqu'alors recherché la toxicité des autres tissus : c'est ainsi que le Hérisson, qui résiste à l’inoculation de fortes doses de venin de Vipère, possède un sang presque aussi toxique que cette dernière. Son immunité naturelle est comparable à celle de l’Anguille. Aussi, Pæisarix voit-il d'abord, dans la présence du venin dans le sang des animaux, la cause principale de l’immunité naturelle, qui serait ainsi une accoutumance.

Mais par le chauffage à 58° pendant 15 minutes, le sang du Hérisson et celui de l'Anguille se comportent comme celui de la Vipère et de la Couleuvre ; ils perdent leur action toxique : tous les quatre manifestent alors une propriété non moins importante que la première, un pouvoir antivenimeux, qui fournit une nouvelle interprétation de l’immunité naturelle et permet de les utiliser comme substance antivenimeuse.

La précipitation par l'alcool fait aussi apparaître ces propriétés ; les substances antivenimeuses sont entraînées dans le précipité alcoolique, d'où il est possible de les séparer. Ce fait, qui montre l'indépendance des substances venimeuses et des antivenimeuses dans le sang des animaux sus-mentionnés, est confirmé par cet autre, à savoir : l’existence de substances antivenimeuses, à l’exclusion des premières, dans le sang de certains Mammifères, tels que le cheval et le cobaye, sensibles au venin.

Chez les Oiseaux, un seul essai pratique avec le sang de poule a montré l’absence de substance antivenimeuse (C. PnisaLix).

Le sang des serpents venimeux est donc toxique ; les lésions qu'il détermine montre qu'il est hémorragipare ; il est de plus antivenimeux.

Une autre propriété du sang des serpents a été mise en évidence par W. STEPHENS, en 1900 : c'est l’action hémolytique, action que possède également celui d’autres Reptiles, de Batraciens et de Poissons.

L'auteur a fait des observations intéressantes sur les effets toxiques et hémolytiques des sérums de Couleuvre à collier, de Python d'Australie, de Grenouille et d’Anguille : ces effets sont empêchés par le sérum antivenimeux.

Les constituants toxiques et hémolytiques des divers sérums ne sont pas identiques, comme le montrent les résultats négatifs des essais d'’immunité croisée. Les constituants hémolytiques ne semblent pas non plus être les mêmes que ceux du venin en ce qui concerne le Cobra et la Daboiïa, car l’hémolyse par le sérum est inhibée par le sérum normal de cheval, alors que ce sérum active, au contraire, l'hémolyse par le venin des deux espèces.

En 1902-1903, FLExNER et Nocucnr, dans leur importante étude sur la constitution du venin et du sérum des serpents, considèrent la toxicité des tissus des serpents et les effets hémolytiques et hémorragiques des venins.

Ils déterminent en particulier la toxicité des tissus de Crotalus adumanteus et trouvent qu'elle est la même que celle du sérum et qu'’elie dépend surtout de la quantité de sang retenue par eux. L'’essai était pratiqué avec les tissus frais de serpents saignés à blanc, et la pulpe, préparée aseptiquement, était injectée dans le péritoine de jeunes cobayes du poid: de 300 grammes.

L'action de la pulpe de la plupart des organes est un peu moins toxique que celle du sérum, mais de même nature, c’est-à-dire surtout hémorragipare. Avec les œufs, les symptômes observés sont plutôt ceux de la neurotorine.

Les auteurs constatent l'effet hémorragipare des sérums de Crotale et de Pituophis.

Quant à l’action hémolytique, ils ont vu que le sérum de Crotale dissout à lui seul, en l’espace de > minutes, les hématies de la mangouste dans les proportions de o cc. 5 de sérum pour 5 pour 100 de sang

défibriné, en même temps que se produit une forte agglutination, alors que le même sang défibriné résiste à l’action lytique de 0,05 à 20 pour 100 de venin.

Les auteurs ont aussi essayé l’action des sérums de quelques serpents (Crotalus adamanteus, Ancistrodon piscivorus, Pituophis catenifer, qui est un Colubridé Aglyphe) sur les composants hémolytiques des venins de Crotalus adamanteus, d’Ancistron piscivorus et contortrix et de Naja tripudians. Les résultats de ces essais ont déjà été donnés à propos de l'hémolyse ; nous les rappellerons dans les pages suivantes.

En 1912, ArTaus reprend la question de la toxicité comparée du sang et du venin des serpents et conclut à leur indépendance complète.

Les symptômes déterminés par certains venins (Vipère, Crotale) et ceux déterminés par les sérums sont les mêmes et relèvent de l’intoxication protéique banale ; mais l’auteur fait remarquer que les sérums de serpents ne sont jamais coagulants, bien que quelques-uns correspondent à des venins coagulants in vivo (Daboia, Pseudechis, Hoplocephalus), ni curarisants, alors que les venins de C. Protéroglyphes (Naja, Bunaarus, Pseudechis) possèdent cette propriété.

L'auteur en conclut que « les sérums toxiques de serpents ne doivent pas leur activité à du venin résorbé en nature, mais à leurs propres protéines, et que les glandes élaborent leurs venins aux dépens de substances dépourvues de toxicité. »

MAzzert (1914), considérant que la plupart des recherches actuelles portent sur l’hémolyse par le sérum des animaux à sang chaud, revient au sérum des Vertébrés à sang froid et recherche s’il contient, comme le sérum d'anguille, des hémolysines directes en ce qui concerne particulièrement leur spécificité et leur action sur les globules nucléés.

Les essais de l’auteur ont porté sur les sérums de Testudo grœca, Lacerta muralis, Rana esculenta, Triton cristatus, Bufo vulgaris, Coluber œsculaptii. Elles ont montré que ces sérums renferment de véritables sensibilisatrices normales susceptibles d’être activées par des alexines de nature déterminée. La teneur en sensibilisatrice varie beaucoup d’une espèce à l’autre ; leur action n'est pas spécifique et s'exerce indistinctement sur un grand nombre d'espèces d’hématies. Le sérum de serpents, en agissant sur les globules rouges nucléés, ne fait pas seulement diffuser l’hémoglobine, mais encore provoque une destruction complète du globule, stroma et noyau.

Nous avons nous-même, soit seule, soit en collaboration avec le R. P. Carus, étudié comparativement la toxicité du sang et du sérum d'un certain nombre d'espèces appartenant aux familles des Boïdés, des Uropeltidés et des Colubridés Aglyphes et Opisthoglyphes. Les résultats en sont consignés dans les tableaux et les pages qui suivent.

Le sang et les œufs sont les seules parties de l'organisme où, en dehors des glandes, on observe une action toxique propre ; la chair mus-

Ne