I. — Production d'azote

46. Nous examinerons d'aboi'd le cas où l'azote se dégage en liberté, sans être combiné avec de l'oxygène; c'est d'ailleui's le plus fréquent.

RECUERGUES SUR LA RÉDUCTION DES MTRATKS. 257

Dans un milieu riche en matières organiques, ce gaz est mélangé avec une certaine quantité d'acide carbonique ; mais si les conditions sont telles cjuc le liquide ne puisse être saturé par ce dei'nier à la température de rexpérieuce, le gaz dégagé est de Tazotci pur. Il suffît pour cela que le milieu soit peu nutritif, car alors la proportion de niti-ate décomposé est faible. En voici un exemple :

Le 8 août, on dissout 21 grammes de salpêtre dans 10"S800 d'eau d^égout stérilisée, et Ton porte le flacon ensemencé dans une étuve à température constante.

Le 9, le liquide s'est troublé dans toute la masse. Le 12, le dégagement gazeux commence et se continue les jours suivants; très faible pendant le mois de septembre, il a cessé complètement le H octobre.

Les volumes de gaz successivement recueillis ont été :

Le 14 août IT'^^j

Le 23 août 92 ,ô

Le 25 aoûL 101 ,ô

Le 3 septembre 80 ,0

Le 11 octobre 29 ,0

Total 320«%i

Cp gaz a toujours été formé d'azote i)ur, sans acide carbonicpie.

Comme Teau d'égout renferme peu de matières oi'ganitpies, la femienlation s'est arrêtée, bien qu'il restât encore dans le liquide une très grande (juantité de sel non décomposé. 11 n'y a eu (;n eil'et 'jue 3 grammes environ de nitrate réduit, conespondant à 800 cenlimelres cubes environ d'acide carbonique engendré. On voit (pie ce Volume est tout à fait insuffisant pour saturer près de H litres de liquide, en supposant même, ce qui n'arrive pas, que le gaz soit entièrement libre et qu'aucune partie ne se combine avec la potasse du nitrate.

^'' Voici, au contraire, des exc^niples de fermentation plus active, ou de Faride carbonique s'est dégagé avec l'azote.

'• Le 30 septembre, on met à l'étuve un flacon de un litre renfermant de la semence active et du bouillon de poulet additionné de '"trate de potasse.

^•^. bClENCË AURUN. 17

La fermentation s'est établie rapidement et s'est prolonjfée jusqu'au i\ octobre, en donnant les gaz suivants :

Volume total dégagé. .

Composition centésimale :

Azote

Acide carbonique. . .

'lOO.O 100.0 100.0 100.0

II. Le 27 février, on met en marche un ballon contenant du bouillon de bœuf, additionné de 10 grammes d'azotate de potasse par litre.

La fermentation a dégagé successivement :

1«» octobre.

2 octobre.

4 octobre.

11 octobre.

28 février.

Smart.

9 mars.

Volume total du gaz. . . .

Composition centésimale :

Azote

Acide carbonique

48. La proportion d'acide carbonique diminue toujours à la fin de la fermentation. Cela s'explique sans doute par ce fait qu'avec le microbe employé, il se fait d'abord du nitrite et que les deux tiers de roxyjj^ène de Tacide azotique servent à faire de l'acide carbonique avant que l'azote puisse se dégaj^^er. En réalité, les deux phases de la réduction ne sont pas absolument distinctes et successives ; elles coïncident en grande partie, car le nitrite est lui-même décomposable par le Baderium dmitrificans.

Les exemples précédents montrent bien quelle est la nature des yaz formés pendant la désoxydation complète de l'acide des nitrates; mais ils ne permettent pas de savoir ce que deviennent tout l'azote et tout l'oxygène provenant de cette réduction. Il reste, il est vrai, dans les liquides fermentes beaucoup d'acide carboniciue combiné avec la base ; mais quel est le volume exact de l'acide carbonique produit ?

41). Pour établir l'équation exacte du phénomène, il faut mesurer et doser avec précision les gaz dégagés, recueiUir et analyser tout le

liquide fermenté. On ne peut, sans causes d'erreur, faire servir à cet usaj^^e, les appareils, tels que flacons ou ballons munis de tubes abducteurs, d'où l'air mt serait pas chassé complètement.

n faut, en outre, que liquides et récipients soient stérilisés, et que la semence puisse être introduite avec sa pureté primitive, afin d'éviter toute fennentation secondaire par des microbes étrangers.

50. Le dispositif le plus simple qui paraisse propre h éviter tout inconvénient est celui qui a servM à M. Pasteur pour Tétude de la fermentation alcoolique; il consiste en une <;prouvelte ou un ballon à long col remplis de mercure et renversés sur ce liquide. On y introduit un poids convenable du sel à décomposer, un volume connu de bouillon, et une trace de semence ; si la fermentation s'établit, le jraz produit déprime le mercure sans sortir de l'appareil, et les lectures se font avec facilité.

Malgré sa simplicité apparente, cet appareil est lourd, peu maniable et difficile à stériliser dans toute sa masse. Nous l'avons essayé néanmoins plusieurs fois, en stérilisant à la fois le mercure et le liquide nitrate, mais malheureusement sans succès. Nos microbes s'y sont à peine dévelo[)pés.