F. MARCEAU

Professeur suppléant à l'École de médecine de Besançon.

Pour l'étude de ce parasite, nous avons employé les méthodes suivantes :

Parasites contenus dans le sang. — 1® Etalement, sur une lamelle, d'une goutte de sang puisée dans le cœur à l'aide d'une pipette en verre très effilée.

29 Dessèchement rapide en maintenant la lamelle au-dessus de la flamme d'un petit bec de gaz mais en faisant en sorte que la température ne s'élève pas trop.

3<> Fixation définitive par quelques gouttes d'un mélange à parties égales d'alcool absolu et d'éther.

4<> Coloration de 8 à 10 minutes dans une solution hydroalcoolique d'éosine.

Eosine 1 gr.

Alcool à 60o 200 gr.

S9 Lavage rapide à l'eau.

fio Coloration de 8 à 10 minutes dans une solution aqueuse de bleu de méthylène à 3 Vo-

7» Lavage rapide à l'eau et séchage à l'air libre ou à l'étuve.

6^ Éclaircissement par quelques gouttes de xylol et montage au baume de canada.

De cette façon, les n^oyaux des hématies, des leucocytes et des parasites sont colorés en bleu intense ; le corps des parasites en bleu plus pâle, quelquefois un peu violacé, ou en rose violacé pâle ou encore n'est pas coloré du tout; enfin le protoplasma des hématies est coloré en rouge plus ou moins intense, suivant qu'elles sont saines ou infestées.

id6 F. MARCEAU

Od peut remplacer le bleu de méthylène par la solution aqueuse d'hématoxyline à 1 Vo* mais en ayant soin de commencer la coloration par l'hématoxyline et non par Téosine.

Cette méthode rapide ne donne pas constamment de bonnes préparations, mais les méthodes de Czenzinski et de Mannaberg, consistant à colorer les lamelles 24 heures par un mélange des solutions d'éosine et de bleu de méthylène, n'en donnent pas toujours de parfaites non plus.

La coloration par Thématoxyline-aurantia, vantée par Labbé, est aussi très bonne, mais ne m'a pas donné de meilleurs résultats.

Parasites du foie, de la rate et du rein. — Ecraser Torgane dans un verre de montre avec uu scalpel, et après en avoir étalé une couche mince sur une lamelle, opérer comme avec le sang.

Les résultats de nos recherches sont les suivants :

lo Nous avons rencontré constamment le parasite dans le sang de 25 Lacerta muralis mâles et femelles, de différente taille, recueillis à Besançon et examinés pendant les mois de mai, juin et juillet.

2"" Nous l'avons recherché à la môme époque, mais sans succès, chez 8 Lacerta viridis.

3^ Le nombre des parasites est très variable suivant les individus. Parfois on n'en rencontre que quelques-uns dans une goutte de sang étalée sur une lamelle, tandis que d'autres fois ils sont extrêmement abondants, à tel point qu'une hématie sur cinq ou six est infestée par le parasite. Dans ces derniers cas, les Lézards avaient été maintenus en captivité pendant 10 ou 15 jours avec nourriture insuffisante, ce qui montrerait le rôle importantde la débilité dans l'infection parasitaire ; mais n'ayant pas examiné le sang de ces mêmes Lézards au début de leur captivité, nous ne pouvons affirmer s'il s'agit d'un fait général ou s'il y a là une simple coïncidence. Nous nous proposons d'ailleurs de faire des expériences à ce sujet.

40 Nous n'avons jamais rencontré de parasite endoglobulaire répondante la description du Danilevskya Lacazei Labbé (1).

(1) a. LahrA, Recherches zoologiques et biologiques sur les parasites endoglobulaires du sang des Vertébrés. Tbôse de la Faculté des sciences de Paris, 189i.

NOTE SUR LE KARYOLVSUS LACERTARCM 137

Sp Nous avons reocoDlré les parasites dans l'intérieur des hématies ou quelquefois de gro» leucocytes, soit libres, soit enkystés. Nous n'en avons observé que deux à l'état de liberté dans le plasma sanguin et un qui était probablement en train de sortir d'une hématie. L^s formes libres dans le sang sont donc fort rares, du moins pendant les mois de mai, juin et juillet. Elles sont au contraire assez fréquentes dans la pulpe du foie à l'état jeune, et elles proviennent de la rupture des cytocysle^ qui y sont contenus en grand nombre. La circulation du sang dans le foie étant assez lente, c'est probablement alors que les jeunes parasites pénètrent dans les hématies.

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a iaii]t d'un Léxard maintenu en captivité, montrant de nom' breusea hématies infeitÉea par le parasite.

&> Les formes jeunes et libres trouvées dans la pulpe du foie sont cylindriques, avec pointes légèrement effilées ou en croissant : les unes, mesurant 8 u sur 2 u, proviennent de microsporozoïtes ; les autres plus allongées et plus dodues, mesurant f 2 a sur 3 ou 4 fi., proviennent de macrosporozoïtes. Leur protoplasma granuleux est coloré en violet pâle; leur noyau arrondi, bien visible, est formé d'une partie achromatique colorée en bleu très pâle et de grains de chromatine plus ou moins arrondis, rangés assez régulièrement en cercle et colorés en bleu intense; la membrane nucléaire n'est pas visible, ou du moins je n'ai pu l'observer. Les deux seules formes libres dans le sérum sanguin que nous ayons observées étaient cylindroides, mais bien plu£ volumineuses ; elles mesuraient 15 u sur 3 ix; leur proloplasma renfermait des granules incolores et réfriogenls, assez volumineux, de oalure

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graisseuse, et désignés par Labbé sous le nom de granules de réserve.

7"" Les formes jeunes endoglobulaires, non encore enkystées, sont toujours assez grosses; elles sont cylindroîdes ou en croissant, ont de 12 (i. sur 2 p. à 13 {a sur 4 fx et ressemblent aux formes libres dans le plasma sanguin. Nous n'avons pas observé de formes petites, avec noyau punctiforme, telles qu'en figure Labbé; mais, en revanche, nous avons trouvé des formes endoglobulaires, non enkystées, piriformes ou en croissant, très volumineuses et occupant presque tout le protoplasma de Thématie ou du leucocyte. Ces formes volumineuses, mesurant 15 \l sur 8 ^u, n'ont pas été signalées jusqu'à présent.

S** Nous avons observé deux fois la conjugaison latérale endoglobulaire, à deux stades différents. Dans l'un, les noyaux des parasites ne paraissaient pas avoir subi de modifications; dans l'autre, ils s'étaient divisés par mitose en deux parties situées au milieu de chaque parasite et appliquées contre ses parois latérales.

90 Les formes enkystées sont de beaucoup les plus fréquentes et même on ne trouve qu'elles lorsque les parasites sont peu nombreux. Les parasites enkystés se présentent sous la forme de masses cylindroîdes dodues, légèrement incurvées en arc, très rarement avec une extrémité effilée et recourbée, et ayant environ 15 \l sur Sou 6 [1. Les uns se colorent par le bleu de méthylène, mais plus faiblement que le noyau des hématies, les autres restent incolores et renferment seulement de très fines granulations.

Dans le premier cas, leur protoplasma est plus ou moins granuleux et ces granulations sont colorées par le bleu de méthylène en bleu plus ou moins violacé ; elles sont situées près de la cuticule, aux extrémités, parfois irrégulièrement dans toute la masse. 11 renferme parfois, surtout aux extrémités, de grosses granulations incolores et réfringentes dont j'ai déjà parlé plus haut. Dans quelques cas, le protoplasma a une structure vacuolaire et il est coloré en bleu assez intense, sauf les vacuoles qui sont en bleu pâle. Le noyau est très rarement visible à cette phase; il est ovoïde, sphérique, parfois parallélipipédique et souvent moins fortement coloré que le noyau de l'hématie. Enfin, chaque parasite est entouré d'une zone incolore et anhiste. à double contour : c'est la membrane d'en-

NOTE SUR LE KARYOLYSUS LAGERTARUM 139

kystement sécrétée par le parasite en train de se transformer en cytocyste.

Action du parasite sur les hématies. — Les hématies infestées sont en général hypertrophiées notablement ; ainsi, tandis que les hématies normales ont de 15 ,a sur 10 {x à 18 fi sur 13 p., les hématies avec parasite endogène ont de 17 [jl sur 11 (jl à 20 fx sur 12 \l ; parfois cependant elles ont les dimensions ordinaires.

Leur protoplasma se colore moins énergiquement par Téosine, l'aurantia ; c'est cette propriété qui a été désignée sous le nom d'anémie globulaire par Labbé. Le noyau^ des globules infestés est allongé et aminci, par suite de la compression exercée sur lui par le parasite; d'autres fois, il est divisé en deux ou même en trois parties, allongées ou non; enfin, quoique rarement, il devient bosselé comme celui d'un leucocyte.

Il est à remarquer que ces modifications sont produites aussi bien par les formes jeunes que par les formes adultes du parasite. Son réseau chromatique parait bien serré et se colore par le bleu de méthylène comme celui d'une hématie normale le plus souvent; mais lorsque le parasite est à une phase avancée de son enkystement, il se désagrège peu à peu et ne se colore presque plus par le môme réactif.

Danilevsky croyait que la fragmentation du noyau provenait uniquement de son allongement excessif provoqué par la compression du parasite. Labbé, au contraire, soutient que l'allongement du noyau est consécutif à sa scission et ne la précède point, une des parties du noyau se désagrégeant ensuite plus ou moins complètement.

D'après nos observations, il y a autant de faits en faveur d'une théorie que de l'autre, en sorte que, sous l'influence du parasite, le noyau de l'hématie peut s'allonger d'abord et se diviser ensuite, ou bien se diviser d'abord et chaque partie s'allonger ou non, ou bien se déformer plus ou moins sans se diviser, ou même enfin rester globuleux et normal, comme nous l'avons observé dans quelques cas. Tout cela, bien entendu, en admettant avec Labbé qu'il n'y ait qu'une seule espèce de parasite.

La membrane kystique est entourée d'une couche grenue, gris clair à l'état frais et colorée en rose violacé par le bleu de méthy-