OPÉRATIONS NON EFFECTUÉES PAR LES ÉLÈVES

Les coupes qui sont distribuées au cours des manipulations ont été pratiquées dans des tissus inclus dans la parafHne et débités en rubans au moyen du microtome de Minot.

Pour pouvoir être réduits en coupes minces, ces tissus ont dû subir une série d'opérations préliminaires que nous allons très brièvement résumer.

Ces tissus ont été fixés, afin de conserver aux éléments histologiques leur forme et leurs rapports: ils ont été déshydratés, afin de leur permettre d'être imprégnés par un dissolvant de la paraffine (xylol); enfin ils ont été inclus dans la paraffine, c'est à-dire intimement pénétrés par ce corps à l'état de fusion et refroidis ensuite de manière à former un bloc solide, facile à débiter en tranches minces.

Fixation. — La fixation est effectuée en plongeant les tissus frais et encore vivants dans un liquide qui tue instantanément les cellules, en coagulant leurs albuminoïdes et en conservant aussi parfaitement que possible leur forme, leur structure et leurs rapports.

Les matériaux distribués aux manipulations ont été fixés soit par l'alcool-formol (10 parties de formol à 40 pour 100 pour 90 parlies d'alcool à 90o et 5 parties d'acide acétique), soit par le picroformol de Bouin (75 parties de solution aqueuse saturée d'acide picrique, 20 parties de formol à 40 pour 100 et 5 parties d'acide acétique cristallisable), soit enfin par le sublimé acétique (90 parties de solution aqueuse saturée de sublimé et 10 parties d'acide acétique cristallisable).

Les tissus fixés par un liquide renfermant de Facide picrique ou du sublimé doivent être lavés, de façon à éliminer toute trace du fixateur; après le picro-formol on lave à l'alcool à 90^ pendant quelques heures ; après le sublimé on emploie l'alcool iodé jusqu'à ce que l'iode ne soit plus décoloré par le sublimé.

Déshydratation. — Après le lavage, les pièces sont portées dans l'alcool à 90% puis dans l'alcool absolu que l'on renouvelle une fois, de façon à les débarrasser de toute trace d'eau.

Imprégnation. — Les fragments, parfaitement déshydratés, sont portés dans deux bains successifs de xylol. Si le xylol se trouble, c'est que la déshydratation n'est pas suffisante. L'imprégnation doit rendre les tissus complètement transparents.

Inclusion. — On transporte directement les pièces dans de la paraffine maintenue en fusion dans une étuve; on se sert en général de paraffine fondant à 50% la température de l'étuve ne devra

donc jamais dépasser 55"*, sous peine d'altérer les tissus. Après un séjour de 2 à 3 heures, les fragments sont retirés du bain de paraffine et portés dans un moule où on a coulé de la paraffine bien propre. Le tout est refroidi rapidement par immersion dans Teau et les blocs se trouvent prêts à être coupés.

Lorsque toutes les opérations ont été efiectuées correctement, les tissus sont imprégnés de paraffine jusque dans Tintimité des cellules; |)f forment avec le bloc de paraffine une masse homogène qu'on peut réduire en coupes excessivement minces.