SUR LES VAISSEAUX LYMPHATIQUES CAPILLAIRES

Par le Docteur ROBIHSKI

(rURCHB XII )

Depuis quelques années, on a introduit des améliorations très-importantes dans les procédés de recherche microscopique. Parmi les nouvelles méthodes d'investigation* employées en histologie, une des plus utiles consiste dans remploi de liquides colorants agissant par imbibition. Nous ne voulons pas examiner la valeur relative de tous ces moyens, nous ne voulons nous occuper que de Pusage de plus en plus répandu de la solution de nitrate d'argent.

tf Tous les histologistes, dit M. Ranvier*, savent que, grâce à

* Archives de physiologie normale et pathologiqucy vol. I, 1868, p. 066. 11. -Joilllt1869. - N* 4. 30

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cette méthode, nous avons aujourd'hui des notions trèsprécieuses sur la structure des épithéliums, du tissu conjonctif, des lymphatiques et des vaisseaux sanguins. » Et tout le monde comprendra mieux encore l'importance des recherches faites à l'aide du nitrate d'argent, lorsque nous dirons qu'elles ont complètement modifié les idées qui régnaient jusqu'à présent sur les vaisseaux lymphatiques et sanguins, et qu'elles ont montré le peu de fondement d'une classification des vaisseaux considérée comme irréprochable pendant de longues années ; en un mot, elles ont renversé la distinction que l'on avait établie entre les vaisseayx lymphatiques capillaires et les lymphatiques qui, plus considérables, sont pourvus d'un épithélium.

Nous laisserons de côté pour le moment ce qui concerne les vaisseaux sanguins, nous proposant de traiter de ce sujet dans un autre travail. Nous voulons nous borner, dans cette note, à l'examen de la question relative aux vaisseaux lymphatiques. Des recherches nombreuses faites dans cette voie nous permettent de soumettre à une critique sérieuse les faits nouveaux que les études faites à l'aide du nitrate d'argent ont introduits dans la science.

Tout d'abord je me vois forcé de dire quelques mots de la composition de la solution qui doit être employée dans ces recherches. Je dois surtout insister sur un point, à savoir la nécessité d'employer des solutions très-faibles. J'ai trouvé que les solutions les meilleures sont les suivantes : N"* 1 , 1 nitrate d'argent pour 500 d'eau ; ou n* 2, 1 pour 800 ; ou même n* 3, 1 pour 1,000. D'une part, de pareilles solutions suffisent pour atteindre le but que l'on se propose ; d'autre part, elles empêchent de nombreuses erreurs semblables à celles qui ont été commises dans ces études, erreurs dont nous serons obligé de faire mention plus tard. Il me semble que tout le monde doit reconnaître que plus la solution est forte, par exemple 1 pour 200, 1 pour 100 et même 1 pour 50, comme quelques auteurs l'indiquent, plus facilement il se produira un dépôt provenant de cette solution de nitrate d'argent : les tissus sous l'influence du réactif deviennent plus foncés, plus noirâtres ; les détails de la préparation se présentent nécessairement d'une façon moins distincte, et par conséquent, Terreur sera plus facile et même quelquefois presque inévitable.

STRUCTURE DE l'ÉI'ITHÉLIUM £1 DES LYMPHATIQUES CAMLLAIhES. Abo

Un autre point non moins important, pouvant conduire à Terreur, quand on ne prend pas la précaution de l'éviter, c'est de ne laisser la pièce que l'on prépare plonger dans ladite solution qu'un temps très-court (50 secondes suffisent); après quoi la pièce sera lavée à Teau pure. Ou bien, dans des circonstances favorables, on ajoute de la solution à la pièce préparée au moment où on la soumet à l'examen microscopique. L'action prolongée du nitrate, comme tout le monde le comprendra, rend la coloration plus foncée, ce qui fait (|ue la préparation se noircit et que les erreurs dues au procédé deviennent plus faciles.

Étudions d'abord l'action du réactif sur l'épithélium et cher* chons à apprécier les diverses opinions émises sur la valeur de ce procédé. Sous Tinfluence du nitrate, les lignes de démarcation des cellules d'épithélium deviennent plus foncées ; elles deviennent beaucoup plus visibles, plus marquées et les préparations ainsi faites sont très-favorables pour rendre évidents les épilhéliums, comme mes nombreuses expériences peuvent le démontrer (voy. fig. 2). M. Hartmann, dans son travail (ûber den Gebrauch der durch Hôllemteinlômng, etc.) conclut que le nitrate d'argent ne doit pas être employé dans les recherches microscopiques, pas même pour mettre en évidence Tépithélium, car il a observé qu'aussitôt qu'on verse ladite solution sur une plaque de verre, il se forme des figures tout à fait analogues à celles que produit l'épithélium. Il a trouvé, en couvrant le verre d'une légère couche de coUodion ou de gomme arabique, qu'on voit aussi sous l'influence du nitrate se former des réseaux offrant des apparences qui rappellent l'épithélium normal. Ce sont, comme le démontre M. Hartmann, des produits accidentels qui se forment là même où il n'existe point d'épithélium, par exemple sur une plaque de verre parfaitement propre; et parce qu^ils in^* duisent ou peuvent induire en erreur, il propose de rejeter complètement l'emploi de nitrate d'argent dans les études microscopiques. J'ai d'abord partagé cette opinion, surtout lorsque j'ai vu souvent sur une plaque de verre propre se former des réseaux analogues à Tépithclium ; mais des éludes approi'on-

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dies m'ont permis de reconnaître qu'il s'agissait là de productions accidentelles. Le microscope est généralement posé sur une table aussi solide que possible pour éviter des mouvements : malgré ces précautions, l'instrument éprouve de légères trépidations, quoiqu'elles soient peu appréciables. Si donc sous le microscope les sels des solutions forment un sédiment, — et il en est ainsi surtout de la solution de nitrate d'argent, qui se décompose si facilement sous l'influence de la lumière, — on remarque que ce dépôt ne se fait point dune façon uniformément étalée, mais bien de telle sorte, qu'il forme des petites lignes entrelacées, ayant l'apparence des lignes de séparation des cellules d'épithélium. Quand l'aspect et la forme de ces lignes sont moins réguliers et moins déterminés, il est assez facile de reconnaître qu'on n'a affaire qu*à une production artificielle, accidentelle. Il est très-probable que M. Hartmann, lorsqu'il concluait à l'abandon de l'emploi du nitrate d'argent dans les recherches microscopiques, s'appuyait sur des faits du genre de ceux que nous venons d'indiquer. On ne peut guère se refuser à admettre que M. Hartmann avait raison jusqu'à un certain point, dans sa défiance à Tégard du procédé en question; mais il allait évidemment trop loin. En employant la solution de nitrate d'argent avec les précautions que j'ai indiquées, je me suis convaincu que, lorsqu'il y a un èpithélium en contact avec cette solution, il y a réellement autre chose que ces réseaux accidentels ; les lignes de séparation des cellules épithéliales sont plus colorées et plus nettes ; elles offrent un autre aspect, tout à fait caractéristique. Je suis ainsi arrivé à admettre — quoique je sache que mon illustre maître, le professeur Reichert, ne soit pas de la même opinion que moi, — que le nitrate d'argent est très-utile, quand il s'agit de démontrer l'existence et les caractères morphologiques des épithéliums ; et certes il ne doit manquer dans le laboratoire d'aucun histologiste. Je suis arrivé à cette conviction déjà en 1865, époque à laquelle je me suis spécialement occupé de ces recherches ; depuis lors, je ne les perds pas de vue, je les ai reprises plusieurs fois et je me suis de plus en plus affermi dans ma manière de voir. 11 est évident que ces recherches faites par une main peu expérimentée et avec peu de précaution, peuvent conduire à des résultats inexacts; mais ce n'est pas parce que

STBUCTDItE DE l'kPITHÉLICM ET DES LYMPHATIQUES CAPILLAIRES. 455

la méthode est fautive, et il ne suit pas de là qu'il faille rejeter complètement ce moyen, comme le proposait M. Hartmann. Puisque les moyens que nous connaissons et que nous employons avec profit dans le recherches microscopiques sont encore bien peu nombreux, pourquoi rejeter un moyen comme le nitrate d'argent, si utile à la science? L'année dernière, à Berlin, où M. le professeur Hartmann avait été appelé, j'eus l'occasion de lui présenter des préparations et d'étudier de nouveau avec lui cette question, et il m'a définitivement autorisé ù publier qu'il était prêt à abandonner sa première idée et qu'il est d'accord avec moi sur les résultats heureux de l'emploi du nitrate dans les recherches relatives à l'épithélium.

Après ce que nous venons de dire, en nous appuyant sur l'autorité de quelques savants, comme M. le professeur lloyer^ et sur l'adhésion même de M. Hartmann, le plus opiniâtre adversaire de l'emploi du nitrate d'argent, nous pouvons espérer que cette question ne donnera plus lieu à aucune contestation à l'avenir. Pour se convaincre de la possibilité de démontrer l'existence de l'épithélium, je conseille de prendre de petites parcelles de cornée ou d'une autre membrane pourvue d'épithélium et assez transparente sous le microscope. Que l'on examine plusieurs fois avec attention, d'une part l'épithélium, et d'autre part les réseaux artificiels produits par le nitrate d'argent sur ces mêmes préparations, réseaux qui se présentent la plupart du temps sous la forme de mailles irrégulières; alors on pourra se convaincre de la grande différence qui existe entre l'épithélium et ces réseaux, et Ton se demandera comment quelques micrographes ont pu être induits en erreur par les formes accidentelles de ces préparations. Or, il faut avouer qu'il en a été ainsi, et l'on peut en citer des exemples. Tels sont principalement les dessins de M. Œdmannsson (Virchow^s Archiv.yolUyiU).

Sous l'action du nitrate d'argent, nous voyons d'abord se colorer les lignes de démarcation des cellules épithcliales. Peu ù peu la coloration se propage lentement de la circonférence vers le centre des cellules, jusqu'à ce que celles-ci deviennent plus ou moins foncées dans leur totalité (voy. fig. 2). Ces lignes

* Ein Beitrag zur Histologie bindngcwebiger Gebilde. in ArchivdeMl. Reichert et Dubois-Feymond, 1805, p. 205.

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de démarcation des cellules restent plus saillantes et plus visibles sur le fond noirâtre, excepté lorsque Ton fait usage d'une solution trop forte ou bien quand l'action du réactif est trop prolongée. Les lignes de démarcation des cellules épithéliales se colorent toujours, dans toutes les circonstances, en brun foncé, tandis que le milieu même des cellules ne Test pas con* stamment. Malgré mes longues recherches et mes études approfondies, je n'ai jamais pu déterminer la raison de cette diflërence. Quand même tout l'ensemble de la préparation devient plus ou moins brunâtre, il reste toujours quelques cellules claires (voy.fig. 2) et, suivant leur nombre et leur arrangement, elles forment des espaces clairs, de différentes formes et dimensions ; nous parlerons plus loin de ces résultats qui ont une grande importance dans l'examen critique d'une autre question.

M. Cornil cite, dans l'extrait que nous avons indiqué plus haut, une différence établie par M. Recklinghausen {die Lymphgefasse, etc., p. 5) en ces termes : <x On imbibe la préparation de la solution de nitrate d'argent, qui donne deux résultats difTérents, suivant qu'elle est faible ou forte. Dans le premier cas la substance intermédiaire aux cellules est seule colorée en brun, tandis que les cellules sont incolores et qu'on peut rendre leurs noyaux visibles, en les traitant par le carmin. Dans le second cas, les cellules elles-mêmes sont colorées en brun foncé, tirant même sur le noir, si l'action du réactif a été prolongée. » En étudiant très-attentivement, je n'ai pas vu cette différence d'action ; au contraire, on peut affirmer que dans tous les cas où l'on n'emploie môme qu'une très-faible solution (1 pour 800), on voit se colorer non-seulement les lignes de démarcation, la substance intermédiaire aux cellules, mais aussi peu à peu les cellules elles-mêmes. La seule différence, et très-naturelle, est celle-ci : plus la solution est forte ou plus l'action du réactif est prolongée, plus la coloration est foncée. L'épithélium reste parfois incolore, comme nous l'avons indiqué; mais quoique la cause de cette particularité soit inconnue, il est certain que c'est un résultat indépendant de la faiblesse ou de la force de la solution, comme mes nombreuses recherches m'ont permis de le constater.

M. Recklinghausen prélend {(lie Lymphge fasse, etc- p. 5)

STRUCTURE DR l/KPITHiÊLIUM RT DEî; LYMPHATIQUES CAPH.IAIRES. 457

que la coloration de rëpithélium ne se produit pas dans les enveloppes cellulaires, mais bien dans la substance intermédiaire aui cellules, qui sert comme moyen d'union entre les cellules (KUtsubstanz). Cette hypothèse est admise par presque tous les micrographes qui ont adopté les opinions de M. Recklinghausen, relativement aux vaisseaux lymphatiques et à la coloration des épithéliums ; mais il faut que je proteste contre cette hypothèse.

Supposons qu'une telle substance (qui d'ailleurs n'est généralement pas admise) existe entre les cellules des épithéliums à une seule couche, alors on ne la trouvera qu'au point de réunion des cellules épithéliales, c'est-à-dire sur les bords, sur toute la circonférence; mais en haut et en bas elle n'existera point. Traitant Pépithélium à une seule couche, par exemple la membrane de Descemet par le nitrate d'argent, nous avons des résultats qui ne correspondent pas à cette théorie. Nous remarquons d'abord que les bords sont colorés très-distinctement ; mais un peu plus tard cette coloration se propage lentement des bords vers le centre, par conséquent des bords où se trouve, où du moins doit se trouver cette substance intermédiaire, graduellement vers le centre où cette substance intermédiaire n existe point dans l'épithélium à une seule couche. On voit finalement les cellules se colorer entièrement, ce qui ne devrait pas arriver, comme tout le monde voit, si la supposition de M. Recklinghausen était fondée. Ainsi, non-seulement la prétendue substance unissante épithéliale (Kittsubstanz) se colorerait, mais il en serait encore de même pour toute la membrane cellulaire, n est vrai qu'au commencement cette coloration débute sur les bords, dans les lignes de démarcation, dans cette prétendue substance intermédiaire aux cellules, mais nous devons nous rappeler, que les bulbes d'air, les gouttelettes graisseuses, etc., nous présentent sous le microscope des lignes de démarcation très-distinctes, et il est probable qu'il s'agit là d'un phénomène analogue. £n supposant toute la surface de chaque cellule légèrement colorée au début, c est évidemment sur les bords, là où les faces pariétales sont vues de champ, que la coloration doit apparaître tout d'abord, et ce n'est que lorsqu'elle est devenue plus foncée qu'elle devient visible sur les faces horizontales, sur le milieu des cellules.

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Pour comprendre la cohésion des cellules épithéliales entre elles, on n'a pas besoin d'ailleurs d'admettre une substance intermédiaire, il suffit d'admettre leur contact réciproque et de penser qu'il s'agit là d'un phénomène analogue à celui, bien connu, par suite duquel deux corps plats juxtaposés exactement adhèrent l'un à l'autre.

Mes recherches m'ont démontré que le nitrate d'argent diminue la cohésion des cellules épithéliales, et, par cette raison, sous son influence, l'épithélium de la partie antérieure de la cornée, par exemple, se détache et se désunit, ce qui donne beaucoup de facilité pour mettre en évidence l'épithélium à plusieurs couches de la conjonctive cornéale^ M. Hûter ({. c, p. 30) dit que l'obstacle le plus efficace pour empêcher la pénétration du nitrate d'argent dans la profondeur des tissus, c'est une couche épithéliale ; et il se représente ces cellules épithéliales comme unies par « une substance pâteuse, résistante et impénétrable » devant laquelle toute la puissance du réactif cesse. Si M. Hùter avait voulu rechercher si la réalité concorde avec sa théorie, il aurait pu immédiatement reconnaître l'inexactitude de son opinion. Il n'avait qu'à prendre l'épithéHum stratifié de la cornée par exemple, et il aurait vu avec quelle facilité le nitrate d'argent y pénètre et diminue même la cohésion de « cette masse pâteuse, si forte et si impénétrable. » Si enfin M. Hûter avait lu avec plus d'attention le travail de M. Recklinghausen, avec lequel il s'accorde sur tous les autres points, il aurait remarqué que celui-ci n'est point de cet avis et même que son opinion est tout à fait contraire. M. Recklinghausen voulant démontrer que le nitrate d'argent agit seulement sur la prétendue substance connective (Kittsnbstanz) interépithéliale, et non sur l'enveloppe de cellules épithéliales, dit (LymphgefâssCj etc., p. 6) cr : Dans l'épithélium stratifié le nitrate d'argent traverse les différentes couches^ souvent sans colorer les cellules. » Ainsi, quoique M. Recklinghausen admette cette substance pâteuse dans l'épithélium, elle n'est pas, d'après lui, assez résistante pour qu'elle soit impénétrable.

Cette question de la diminution de la cohésion des cellules épithéliales, surtout de celles de la cornée, n'est peut-être pas

* La membrane de Descemct se détache favilement aussi de la cornée sous l'influence de nitrate d'argent.

STRDCTURR nE I.'rPITHÉMUM ET DES LYMPHATIQUES CAPILLAIRES. 459

sans importance, au point de vue du traitement de la conjonc tivite, où, comme tout le monde le sait, le nitrate d'argent est employé avec succès. Ce moyen facilite sans doute dans cette maladie la chute des épithéliums altérés et des corpuscules purulents, et par conséquent il peut accélérer la production des nouvelles couches épithéliales saines, c'est-à-dire la guérison.

Nous connaissons l'action du nitrate d'argent sur Tépitliélium et nous avons vu les diverses opinions qui régnent à ce sujet ; examinons une question non moins importante, à savoir l'étude des vaisseaux lymphatiques (capillaires), au moyen de ce même réactif.

Jadis on ne connaissait pas d'autres moyens pour étudier et démontrer les plus petits vaisseaux lymphatiques que les injections artificielles ; ou bien encore, on profitait pour ainsi dire des injections naturelles et Pon suivait les vaisseaux lymphatiques remplis de chyle au moment de la digestion. L'étude des vaisseaux lymphatiques non injectés était inconnue à l'exception de ce qui concerne les lymphatiques des villosités intestinales. Il en était de même de ceux que MM. Kôlliker(Ann. des sciences nat. 1846, — Mikroskop. Anat.^ tom. II) et Remak {Mûller's Archiv^ 1850) avaient observés dans la queue des têtards. En général, tous les auteurs, même les plus habiles micrographes, comme MM. Brûcke, Frey, His et autres, ont déclaré que l'étude des vaisseaux lymphatiques les plus fins est complètement impossible. Ce serait donc une excellente chose si Ton possédait une méthode sûre, pour les recherches relatives aux vaisseaux lymphatiques très-fins et en particulier aux lymphatiques capillaires.

Pour l'élude de ces fins canalicules, on a récemment proposé un moyen jadis complètement inconnu, c'est-à-dire la coloration à l'aide de la solution de nitrate d'argent. Les premières données sur ce sujet se trouvent dans le traité : a de Argeiiti iiitrid usu et effectUj etc., » où M. Flinzer résume les observations de M. Coccius. Il dit que, par l'action du nitrate d'argent sur la cornée, la coloration se fait au moyen du dépôt de corpuscules d'argent, tantôt dans les cellules mêmes, tantôt entre les cel-

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luIes de la cornée, suivant que la solution est faible ou forte. Mais MM. Flinzer et Coccius ont cru que l'action de la pierre infernale détruit les corpuscules de la cornée, a Quia vero cor- « puscula corneœ ex parte evanescunt lapide infernali in natura a fortius adhibito, concludere possumus, illa eo destrui atque a eadem de causa est verisimile hoc valere ad telum dejicien- « dum. 2> (Loc cit. p. 21-22.) M. His dans son ouvrage (Beitràge %ur normalen und pathologischen Histologie der Cornea^ Basel 1856, pag. 67), assure que Taction du nitrate d'argent sur la cornée produit un dépôt granuleux dans les cellules, tandis que la substance intercellulaire acquiert une légère coloration brunâtre. Ce dépôt dans les cellules existerait non-seulement dans les points sur lesquels l'action du nitrate d'ai^ent porte directement ; mais de plus il se répandrait au delà de ces points, dans les cellules et leurs prolongements ramifiés, jusqu'à une assez grande distance.

M. Recklinghausen s'occupa ensuite de ce sujet. Il àii(Methode ^mikroskopische hohle und solide Gebilde, etc.) : que les parties animales fraîches, ou mieux encore desséchées, mises dans une solution de nitrate d'argent, soumises ensuite à Taction du sel de cuisine, puis exposées à la lumière, présentent par places un dépôt granuleux qui siège dans les cavités, par exemple dans les petits canalicules renfermant un contenu liquide, parce que le nitrate d'argent est précipité par les sels dissous dans ce contenu, tandis que la substance solide offre une coloration uniformément brune. Aussi conseille-t-il l'emploi de la solution de nitrate d'argent pour certaines recherches minutieuses d'histologie et en particulier pour mettre en évidence les petits canalicules. Plus tard, M. His (Ueberdas Verhalteii des salpetersauren SilberoxydSy etc.) démontra que l'action de nitrate d'argent peut varier : si la solution est faible, la substance intercellulaire de la cornée est dépourvue de dépôt pigmentaire (d'argent), ou bien sa coloration est peu intense, tandis que les corpuscules cornéens renferment un dépôt granuleux (granules d'argent), que l'auteur appelle dépôt d^argent intra-cellulaire (intracellulxre Silberablagerung) ; si la solution est plus forte, la substance intercellulaire se remplit en général d'une quantité plus ou moins grande de corpuscules d'argent, tandis que les cellules restent vides, incolores ; c'est alors le dépôt extra-col-

STRVCTORB DE L*ÉPITH#.MnV ET DES LTMPHA'TIQDES CAril.LAIRES. 461

lulairc {extracellulœre Silberablagerung). Quelque temps après, M. Recklinghausen a fait de nouvelles recherches, publiées dans son travail intitulé : die Lymphgefàsse und ihre Beziehung zum BmdegewebCy Berlin, 1862. Ce travail remarquable renferme les données les plus importantes sur les résultats de l'action du nitrate d'argent, et l'on sait qu'il a eu une grande influence sur rhistologie du tissu connectif et des vaisseaux lymphatiques. H. Recklinghausen dit (p. 9, loc. cit.) : «Dans les petites veines et les petits vaisseaux lymphatiques, on voit les formes des cellules épithéliales si nettement, qu'elles permettent, comme les meilleures irgections^ de constater le parcours de ces vaisseaux. D

D'après lui, à l'aide de ce procédé, on peut non-seulement reconnaître les vaisseaux lymphatiques capillaires, mais encore déterminer leur structure. Il dit (loc. ciL,p. 16) que, d'après les recherches faites au nitrate d'argent, on est forcéd'abandonner la distinction qu'on avait admise jusqu'alors entre les branches des vaisseaux lymphatiques et les vaisseaux lymphatiques capillaires, distinction qui se trouve encore reproduite dans le remarquable ouvrage de M. 'Seichmann (das Saugadersystemvom anatoinischen Standpunktej Leipzig, 1860). D'après l'opinion de M. Recklinghausen, la plus grande partie des auteurs ont admis cette division, uniquement par analogie avec ce qui a lieu pour les vaisseaux sanguins, et ont été conduits ainsi à attribuer aux vaisseaux lymphatiques les mêmes propriétés et les mêmes caractères qu'aux veines. Il affirme que, même dans les plus fins vaisseaux lymphatiques (capillaires), il se trouve un épithélium,que l'on peut montrer, et que, d'après cela, M. Teichmann et les autres auteurs se trompaient, lorsqu'ils admettaient une différence entre les branches des lymphatiques et les vaisseaux lymphatiques capillaires. La seule difficulté qui existerait, suivant M. Recklinghausen, dans ces recherches,consistedans une confusion possible des lymphatiques avec les veines, car elles se présentent sous le même aspect que les vaisseaux lymphatiques. Mais il ne serait pas impossible cependant de distinguer ces vaisseaux les uns des autres, et M. Recklinghausen insiste surtout sur les caractères suivants : les vaisseaux lymphatiques se distingueraient par leurs bosselures ; de plus, leur trajet n'est presque jamais rectiligne, même dans les plus petits vaisseaux.

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comme le démontre Irès-bien M. le professeur Teiclimann, dans son ouvrage (das Saugadersystem, etc.).

Ces détails sur l'historique de la question ont leur importance. Nous voyons que M. Recklinghausen et d'autres auteurs (His) étaient préoccupés du désir de mettre en évidence les petits canaliculesà l'aide du nilrale d'argent, et nous savons — nous en avons beaucoup d'exemples, surtoutdans l'histologie — comment une telle préoccupation peut facilement induire en erreur. Nous montrerons quelle est la valeur réelle des assertions de ces auteurs, en exposant nos propres recherches, mais nous devons auparavant terminer ce qui est relatif aux travaux qui ont précédé le nôtre. M. Recklinghausen, dans son travail (zur Fettre* sorption, etc.), s'efforce de démontrer qu'il y a des communications directes entre ces vaisseaux lymphatiques et certaines cavités, par exemple la cavité de l'abdomen. Il affirme qu'il existe entre les cellules épithéliales, des ouvertures très-étroites qui conduisent aux vaisseaux lymphatiques ; il aurait vu, en certains points, s'étant servi de lait pour ses expériences, des petits corpuscules laiteux entrer par ces ouvertures dans la profondeur des tissus. M. Œdmannsson (Beitrag zur Lehre^ etc.) admet ces ouvertures entre les cellules épithéliales comme des entrées des vaisseaux lymphatiques. M. Tommasi dans son travail (ueber den Urspning der Lymphge fasse ^ etc.) et M. His (ûber das Epithel der LymphgefàsswurfielTij etc.) ont aussi fait des recherches sur ce sujet à Faide de nitrate d'argent et ils sont d'accord avec le promoteur de cette méthode, M. Recklinghausen.

Au contraire, M. Hartmann dans son travail (ut^er den Gebrauch der durch Hôllensteinlœsung kiinstlich dargestellten Lymphgefàssanhànge^ etc.), réfute toutes ces affirmations et arrive dans ses recherches à des résultats tout à fait opposés. Il professe que le nitrate d'argent ne doit pas être employé dans les recherches microscopiques, car il conduit vers des erreurs innombrables. M. Henle (Bericht ûber die Fortschritte der Anatomiej etc.), exprimait aussi peu de sympathie pour cette méthode, et il en est de même de MM. Harpeck (ûber die Bedeutungj etc.) et Adler (Zeitschrift fur rationelle Medicin^ tom. XXI).

Le travail de ce dernier auteur a été combattu par MM. Broneff et Eberlh (Wûrzburger naturwiss. Zeitschrift ^ 1864). M. Auerbach d^^ns son rapport {zur Anatomie der Lymphgefàsse)

STRUCTURE DE L*éPlTUéLIUM £T DBS LYMPHATIQUES CAPILLAIRES. 465

S accorde plus ou moins complètement avec M. Recklinghausen, dont les opinions sont adoptées aussi par MM. Clirzonszczewski (ûber die feinere Stt^ctur der Blutcapillaren. in Virchow^s Archivj janvier 1866, p. 169) et Hueter (sur Histologie der Geletikflàchen^ etc.) et tous deux le défendent contre les objections de M. Hartmann.

Pour compléter ce que nous venons de dire, nous devons mentionner les travaux de M. Cornil (sur Quelques procédés de préparatiom, etc.), qui relate les résultats publiés par M. Recklinghausen, sans faire mention de ses propres recherches, et de Schweigger Seidel (die Behandlung der thierischen Gewebe mit Argentum nitricum^ etc.). Ce dernier auteur, comme plusieurs autres, notamment Henle, Hartmann, Adler, etc., conservait également quelques doutes, relativement aux affirmations de M. Recklinghausen. H attaque surtout M.Recklinghausen au sujet des Saftkanalche% et il les considère comme un produit artificiel. D'après lui, le contenu des cellules épithëliales s*écarte sous Taclion de nitrate d'argent, et il se forme alors des fentes tout à fait analogues aux espaces que M. Recklinghausen avait observés et qu'il avait considérés comme des « Saftkanàlchen. » Dans mes nombreuses recherches je n'ai jamais observé un résultat de ce genre et aucun des autres auteurs ne fait mention de ces causes d'erreur ; du reste, comme on le verra, on peut donner au sujet de ces vaisseaux lymphatiques et de ces canalicules (Saftkanàlchen) une interprétation beaucoup plus naturelle. Quant à mon travail (Nablonkiinaczyniachlonicowejeic.)^queydi publié dans Testimable journal : Przeglad Lekarskiy l'opinion que j'y développe est la même que je vais exposer ici. Nous voyons par ce qui précède à quel grand nombre d'études l'emploi de nitrate d'argent a déjà donné lieu, et encore passons-nous sous silence plusieurs travaux qui sont évidemment hors de cause, ceux par exemple qui ont trait à l'étude des épithéliums des alvéoles pulmonaires ; nous en parlerons ailleurs.

M. Recklinghausen s'est appuyé, pour cineltrc ses vues nouvelles, comme nous l'avons déjà vu et comme il Tavoue luimôme (Lymphgefàssejelc.ypag. 15) sur ses recherches à l'aide du nitrate d'argent. 11 se fonde sur ce fait, que dans la sub-

404 HOBhNSEI.

slance conjonctive, les plus petits canalicules traités par le nitrate d'argent restent parfois incolores, tandis que le reste de la substance conjonctive est très-distinctement coloré. D'après M. Recklinghausen, les petits vaisseaux lymphatiques restent incolores, comme ces canicules, et par ce moyen on pourrait mettre en évidence leur parcours et même leur structure, car lorsque les vaisseaux lymphatiques capillaires restent incolores, leur épithélium se colore et devient très-visible. On avait admis jusqu'alors que les vaisseaux capillaires, sanguins et lymphatiques ne se composent que d'une seule membrane dépourvue d'épithélium. M. Recklinghausen, au contraire, affirme que, d*après ses recherches, les plus petits vaisseaux lymphatiques capillaires possèdent encore un épithélium très-marqué et trèsfacile à démontrer par Taclion de nitrate d'argent. Les planches qu'il a jointes à son travail contiennent des dessins qui, ainsi que certaines figures publiées par quelques-uns de ses partisans, éveillent déjà une grande défiance.

Nous avons démontré que, par l'action du nitrate d'argent, Tépithélium est coloré en brun foncé, d'abord à sa périphérie, et que cette coloration se propage lentement des bords vers le centre, jusqu'à ce que la coloration soit complètement uniforme. Les lignes de démarcation des cellules épithéliales restent encore visibles ; mais plus l'épithélium, sous l'influence de la solution, se noircit, plus ses lignes de démarcation perdent de leur netteté, jusqu'à ce qu*elles disparaissent entièrement, ce qui arrivera surtout si Ton a fait usage d'une solution trop forte, ou si l'action du réactif a été prolongée. Quelques-unes de ces cellules pourtant ne deviennent pas foncées. Quand fout l'ensemble de la préparation devient plus ou moins brunâtre, il reste donc quelques cellules claires et suivant leur nombre et la manière dont elles sont disposées, elles forment des espaces clairs de différentes formes et de diverses grandeurs (voy. fig.2). Nous appelons tout spécialement l'attention sur cette particularité, car ce sont les dessins ainsi formés qui ont été considérés par M. Recklinghausen comme des vaisseaux lymphatiques. Quant à nous, ayant vu la manière dont se forment ces espaces clairs, nous ne pouvons les regarder comme des vaisseaux lym- ' phatiques et nous refusons catégoriquement d'admettre cette interprétation éS'appuyant sur ce fait, que la substance intercellu-

STRUCTUhE DE LÉPITIIÉLIOM ET l>EiS lAUPUATlQUES CAi'ILLAIKbS. 40*^)

laire de la cornée devient colorée par l'action du nitrate, tandis que les cellules restent incolores, M. Recklinghausen voulait adopter (Méthode mikroskopische hohle und solide Gebilde zu untermchen^ Virchow's ArchiVj tom. XIX), le même point de départ, l'étude des petits canalicules. Le fait en question est vrai, lorsqu'il s'agit des cellules de la cornée {Horhhaut korperchen)^ et il est facile de rendre ainsi évidentes les cellules et leurs ramifications (Sa/lt^ana/cft^n de Recklinghausen); mais il n'en est plus de même, quand il s'agit de démêler des canalicules, des vaisseaux plus volumineux, au milieu d'autres tissus.

Les considérations mêmes de M. Recklinghausen sur ce sujet se contredisent en grande partie. Dans son travail [Méthode mikroskopische hohle und solide Gebilde^ etc.) il affirme que les canalicules renfermant du liquide sont faciles à distinguer, parce qu'un dépôt se forme dans leur intérieur et que par conséquent ils s'obscurcissent. Il faudrait donc que les canalicules lymphatiques et les fins vaisseaux sanguins devinssent obscurs par le dépôt de nitrate d'argent, au lieu de s^éclaircir comme ils le font d'après ce qu'en dit M. Recklinghausen dans son autre travail (die Lymphge fasse ^ etc.). Il est vrai que son premier travail lui-même : (Méthode mikroskopische hohle und soUde Gebilde, etc.) conXieni des contradictions. L'auteur dit, en effet, que dans les petits canalicules contenant du liquide il se forme un précipité de petits corpuscules noirs, tandis qu'il affirme quelques lignes plus haut que des parties animales desséchées sont les plus convenables pour cette étude.

Connaissant comment se développent les prétendus vaisseaux lymphatiques de Recklinghausen, visibles sous la forme d'espaces clairs sur un fond noir, il nous reste à voir ce qui concerne l'épithélium de ces vaisseaux. Dès que Tépithélium se colore en brun foncé, les lignes de démarcation des cellules s'obscur-^ cissent et deviennent de plus en plus invisibles jusqu'à ce qu'elles se perdent dans le fond noirgénéraP. Mais là au contraire où l'épithélium est peu coloré, où les espaces restent plus clairs, dans ces prétendus vaisseaux lymphatiques de

* C'est pour n'avoir pas remarqué cette disparition accidentelle des lignes de déhiarcation des cellules épithéliales, que M. Recklinghausen a cru qu'il n'y a pas d'é^' pithélium dans les espaces brunâtres limitant les intervalles restés clairs dans lea préparations (voy. fig. 1).

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Recklinghausen, les lignes de démarcation des cellules épithéliales restent très-manirestes. Dans ces espaces clairs de forme plas ou moins allongée (voy. iig. 1 et % L.), on aperçoit trèsdistinctement cetèpithélium, comme l'a dit M. Recklinghausen \ seulement ce n'est point Tëpithélium des vaisseaux lymphatiques comme il le prétend.

L'organe que j'ai Irouvé le plus favorable et que je recommande pour ces études, c'est le diaphragme des animaux de petite taille, notamment des lapins, des chats, des cochons dinde, de chiens jeunes ou petits, des souris et des rats : la solution la plus convenable est celle qui contient 1 partie de nitrate d'argent dans 800 parties d'eau. Si on procède comme nous allons l'indiquei^, on peut facilement se convaincre du mode d'origine et de formation de ces produits artificiels. Mettant sous le microscope un diaphragme frais, préalablement soumis à l'action de nitrate d'argent, pendant un temps trèscourt (30 secondes), on distingue partout un épithélium trèsnet. Ses lignes de démarcation se présentent avec évidence et les cellules ne sont pas encore colorées. Peu à peu la coloration devient plus intense sur toute la préparation, laissant çà et là une plus ou moins grande quantité d'épithéiium et des espaces plus ou moins considérables, d'un aspect très-différent (voy.fig. 1 et 2, L). Pendant que ladite préparation s'obscurcit lentement, les lignes de démarcation s'effacent de plus en plus, jusqu'à ce qu'elles deviennent tout à fait confondues dans une masse noire, tandis qu'elles restent toujours très-distinctes dans les espaces moins colorés (fig. 1 et 2, E). Ne considérant que l'aspect de ces derniers moments^ on comprend qu'on ait pu tomber facilement dans l'erreur, et interpréter comme M. Recklinghausen et d'autres auteurs les dessins que Ion a sous les yeux, et que ces histologues ont reproduits sur leurs dessins On voit combien il est nécessaire d'éviter que l'action du nitrate soit trop prolongée, et c'est ce que n'avaient pas fait M. Recklinghausen et les autres anatomistes qui ont adopté ses vues, car plus l'action est prolongée, plus la préparation devient d'une couleur foncée et quelquefois de telle sorte qu'on ne voit vraiment sur toute la préparation que ces espaces blanchâtres chargés d'épithéiium, que l'on voulait considérer comme des vaisseaux lymphatiques (Og. 2, L). On voit ici très-nettement l'erreur qui

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entache les recherches de M. Recklinghausen et dans laquelle on peut être entraîné si on ne procède avec tout le soin possible, ou si Ton fait des recherches microscopiques avec la préoccupation d'un but à atteindre.

M. Hartmann avait donc raison, lorsqu'il recommandait d'apporter un soin tout particulier à ces sortes d'études, mais il s'est trop avancé en proposant de rejeter complètement le nitrate d'argent du nombre des moyens à employer dans les recherches microscopiques. MM. Chrzonszczewski ({. c.) et Hûter (1. c.) défendant les affirmations de M. Recklinghausen, combattaient M. Hartmann, et pour montrer le peu de valeur de ses dénégations, s'appuyaient presque uniquement sur ce seul fait, à savoir qu'il n'avait môme pas su reconnaître l'action si re^ marquable du nitrate d'argent sur Tépithclium.

Nous avons constaté bien de fois sous le microscope des dessins d'apparence tout à fait semblable à ceux que M. Recklinghausen joint à son travail die Lymphge fasse ^ etc. (pi. I, fig. 2., et pi. H, fig. 1 et 2), mais nos recherches ne nous permctlent pas de les regarder comme des vaisseaux lymphatiques.

En examinant plus attentivement les dessins de M. Recklinghausen, on acquiert la certitude que ses affirmations ne sont même pas vraisemblables. D'abord Pépithélium (par exemple/. c.,pl. Ii)est limité par des lignes tellement dentelées, qu'on n'en trouve nulle part de semblables dans les organismes supérieurs. Puis, calculant la grandeur de ces épithéliums d'après les dessins de M. Recklinghausen lui-même, on voit qu'ils seraient d'un volume deux fois plus considérable dans les vaisseaux lymphatiques capillaires que dans leurs ramifications. D'autre part, si les dessins (fig. 1 et 2) avaient vraiment représenté les vaisseaux lymphatiques et leur épithélium , ils devraient différer de ce qu'ils sont : en effet, ces vaisseaux lymphatiques étant aplatis et leur face inférieure étant recouverte par la face supérieure, on devrait apercevoir deux couches d'épithélium, l'épithélium de la face supérieure et celui de la face inférieure. Tout cela n'est point appréciable, ni sur les dessins de M. Recklinghausen, ni sur ceux d'autres auteurs. M. Hùter (/. c), voulant prouver qu'il est impossible de voir deux couches d'épithélium , a supposé que le nitrate d'argent ne pénètre jamais très-profondément et il présume que la meilleure barrière pour empè-