DOSAGES DES NATÉKIAUX DES GLOBULES

Dosage de Teau. Poids des f^lobules meea, — On séparera le

sang de la saignée ou le caillot en deux parties. Dans la première on dosera le poids des globules humides comme il a été dit au § 1 ; la seconde sera évaporée au bain marie, puis chauffée à 100" dans un courant d'air desséché. Le résidu sec diminué du poids que laisserait par son évaporation la quantité de sérum interposée, (quantité déterminée d'après le § 1), donnera le poids des globules secs ; on a vu plus haut comment on dosait le poids des globules humides, on aura par dilTérence Teau des globules.

DoKnge den ina(ic>refei cxtractivcs et des sels solubles dAnsi'eaa.

— Le résidu sec laissé par Tévaporation du caillot étant repris par l'eau donnera les diverses matières extractives solubles telles que la créatine, créatinine, sels divers, urée, sucre, savons, qui pourraient se trouver dans le caillot. On évaporera cette dissolution et l'on pèsera son résidu sec; on le calcinera ensuite au rouge pour avoir le poids des sels solubles du caillot, et par dilïé-

* La niélhodo do Schinidt, do Dorpnl, et celle qu'a suivie Lcliniann, qui est iui>analoguc, consiste à apprécier une lois pour toutes les quaulités dont les corpuscules sanguins se rcMluisent de vohniie en se desséchant sous le champ du niicrosco|K\ « calculer d'après cotlc observation la ouanlité d'eau qu'ils contiennent; à évaluer de uuuk espace lihre laissé dans le caillot entre les corpuscules, et à juger par là de la (pian- *dé de sérum (pie ce caillot contient. Schniidl l'a évalué au h^ du caillot. Ayant rloiic le poids du cailhjt on en soustrait le poids du sérum qu'il englobe; il reste le pt>id> de globules humides. — On év.qwjre ce caillot à sec, on sou>lrait du poids celui de h>ci ï'l'skIu sec (pie lai>serait le sérum interposé et on a le poids des corpuscules secs, ^oyez aussi la méihodc de Denis, Mémoire sur le sang. Paris (i850; p. 50.

DOSAGES DES liATÉRIAUX DU GLOBULE. 549

rence celui des matières extraciives solubles. On en conclura les poids de matières correspondantes à attribuer au globule en tenant compte de la quantité de sérum interposé au caillot et de sa composition que Ton déterminera d'après le paragraphe suivant.

Matières extraetlves solnbles dans Taleool et Téther (COrps

graSj cholestériney lécithine), — En traitant successivement le caillot desséché, par Talcool froid, par l'alcool bouillant et par l'éther on obtiendra en solution les matières extractives solubles dans ces dissolvants. Elles sont formées surtout de corps gras, de cholestérine, de lécithine, et de matières colorantes. En acidulant légèrement la portion extraite par l'alcool et l'évaporant en présence d'une petite quantité de sel marin ou de chlorure de cadmium en solution alcoolique, puis en traitant par l'élher on obtiendra la cholestérine (Hoppe-Seyler) , En reprenant par l'alcool absolu on dissoudra les corps gras. La lécithine restera comme résidu et pourra être appréciée par un dosage de phosphore ou par toute autre méthode ^

On peut doser aussi ces mêmes substances, dans la portion du sang destinée au dosage de l'hémoglobine (voy. plus bas).

Sela tnsoiabies du globale. — Après l'action successive de l'ai ceci, de l'éther et de l'eau, la glohuline de Denis, la paraglobuline de Schmidt, et l'hémoglobine altérée resteront comme résidu mélangés aux sels insolubles. Ceux-ci pourront être appréciés par la calcination de ce résidu. Quant aux autres substances, elles demandent à être dosées séparément dans une autre portion du sang ou du caillot.

nammtie de la i^lobaliae de Deals. — NouS ne pOUVOnS pOUr CC

dosage que renvoyer à ce que nous avons dit (p. 457), en parlant de la préparation de ce corps. Pour obtenir la globuline du sang des mammifères on prend le caillot bien égoutté de sérum, on le mêle à la moitié de son poids de solution de sel marin au dixième et Ton chaufle deux heures ce mélange à 40"* ou 50** en agitant un peu. Les globules en partie décolorés s'étant alors agglomérés en une masse visqueuse on la divise en petites portions qu'on lave sucsivement à l'eau glacée. On leur fait pour cela parcourir doucement le fond du vase en imprimant à l'eau, au moyen d'une spa-

• Voyez ce qui a été dit df l'nnnlysc imuuMlinl'? dos |;raiâscs, Voy. au^si p, 440.

tule, une légère ondulation. On renouvelle cette eau de temps à autre et l'on finit par n'avoir plus pour résidu que de la globuline blanche avec son aspect feutre. Après l'avoir lavée à ralcool et à l'éther chauds on la dessèche et on la pèse.

DoMise de la paraglobnline de Schmldt. — La Hqueur qui a

servi à laver le caillot pour obtenir la globuline de Denis, ayant encore été étendue de beaucoup d*eau froide (douze à quinze fois le volume du caillot primitif) on fait passer dans cette solution un courant d'acide carbonique à refus. La paraglobuline se précipite et peut être recueillie sur le filtre, lavée à Talcool et à Fétber, et enfin séchée en tenant toujours compte de la proportion qui, dans le caillot, provient de la quantité de sérum interposé aux globules et que Ton a appris à doser déjà p. 546.

Doca^e siniDltané de lliéBMisloblne, des caisses, de la léd-

thine, de la cfaoïestérine. — L'hémoglobine pourrait au besoin être appréciée dans le résidu sec du caillot par le dosage du fer, car cet clément ne se trouve que dans la matière colorante du sang et Ton sait que 100 grammes de cette substance sèche contiennent chez le mammifère ou Toiseau 0*^,42 à O*', 45 de fer.

Mais on a donné (p. 465) le procédé par lequel Hoppc-Seyier extrait l'hémoglobine du sang des divers animaux. Pour doser celli^ substance on traite le sang défibriné par son volume d'une solution au dixième de chlorure de sodium, on chauffe deux heures à 40°, et Ton agite au bout de vingt-quatre heures avec de l'oau et deTéther le magma qui s'est formé. On arrive ainsi à le séparer en trois parties : la globuline reste à l'état insoluble; la majeure part des graisses, de la lécitliine et de la cholesiérine se dissout dans l'éther, tandis que Thémoglobiiie reste en solution dans Teau. Cette solution aqueuse étant évaporée d'abord dans le vide froid et sec, puis à 100°, donne l'hémoglobine comme résidu ; elle n'est plus mêlée qu'à quelques sels alcalins, dont le poids peut-être déterminé par la calcination, et à une trace de matières exlractives azotées dont on peut enlever la plus grande partie par de l'alcool à 80° centésimaux.

Les corps gras, la cholestérine et la lécitliine dissoutes dans rétlier, peuvent être ensuite séparées et dosées comme il a été dit ci-dessus.

On peut aussi, comme Ta fait Preyor*, doser l'hémoglobine par

* Mrd. CentraWL, 18GG: et Aun. Chrm. Phnrm., t. CXI . p. 1S7.