DÉTERMINATION DES MATIÈRES COLORANTES

étant évaporée laissera comme résidu la bilirubine impure. — (Pour les acides biliaires, Toir plus loin.)

DétonnfaMitloB de la matière colcNrante du «aa^. — L'hémoglo-

bine se reconnaît dans l'urine à ses raies d'absorption spectrales qui peuvent même servir à la doser. (Y. 1. 1, p. 469.)

n. — Reehirehe et détermination de VaUmmine, du glucoie et de Vmotite,

Quand Tune de ces trois substances , albumine , glucose , inosite, existe dans les urines, il est bon d'y rechercher les deux autres.

Keeherdie et dosage de l'albamlne. — L'urine est filtrée, si

elle n'est pas claire, et additionnée d'un peu d'acide nitrique, (un dixième de son volume environ). S'il se produit un coagulum blanc abondant, insoluble à chaud et si le liquide primitif, légèrement acidifié par Tacide acétique, louchit ou se coagule à TébuUition, on peut affirmer la présence de l'albumine. Un trouble léger mais persistant à chaud, insoluble dans Tacide acétique indiquera le plus souvent des traces d'albumine. Toutefois, quand le malade a pris des résines ou des essences, de la térébenthine, du copahu..., on devra s'assurer que ce trouble ne se dissout pas par l'agitation avec de Talcool. Si le trouble se redissolvait à chaud, ou par une plus grands quantité d*eau, il pourrait être formé d'acide urique, d'urates acides, ou même de nitrate d'urée. Le dosage de l'albumine se fait de la manière suivante : On ajoute à l'urine étendue de deux fois son volume d'eau une petite quantité d'acide acétique : 15 gouttes pour 100 centimètres cubes d'urine ; on laisse ce mélange au repos pendant 12 à 24 heures. Les flocons de mucus sont ainsi séparés. On filtre et l'on porte à l'ébullition. Le précipité qui se forme est lavé avec de l'eau bouillante rendue très-légèrement ammoniacale pour dissoudre Tacide urique et les uratcs, puis repris par de l'alcool et de l'éther pour le priver des graisses et de quelques matières extractives, et permettre aux flocons de se détacher entièrement du filtre. On place ensuite le coagulum dans une capsule tarée, on le dessèche à 110^ et on le pèse. La précipitation de l'albumine par le tannin donne des résultats erronés; ce corps précipite en effet un certain nombre d'autres substances dans les urines normales (A. Gautier). M. Tanret a indiqué un procédé de dosage de Talbumine par li-

queurs titrées, fondé sur la précipitation de cette substance par riodure double de mercure et de potassium qui, en solution acétique, ne s'unit pas aux autres principes de Turine. On fait une liqueur avec : lodure de potassium pur 3^,32. Bichlorure de mercure, 1^,35. Eau distillée, 64 grammes. Acide acétique, 20 cent, cubes. On la verse au moyen d'une pipette graduée dans 10 cent, cubes d'urine albumineuse tant qu'une goutte de celle-ci, portée sur une soucoupe de porcelaine, ne donne pas un précipité jaune d'iodure de mercure par le sublimé étendu d'eau. La liqueur réactif précédente est titrée de manière qu'un cent, cube précipite 0^,1 d'albumine sous forme d'une combinaison d'albumine et d'iodure de mercure contenant 0,375 Hgl pour 1,626 d'albumine.

Les urines albumineuses donnent, en général, des sédiments composés de mucus et d'épithéliums divers.

Séparation d« la «Ineiuie et d« riaoalte. — L'urine ayant été

privée d'albumine, s'il y en existe, on l'évaporé à sec et on reprend le résidu par de l'alcool froid, à 86^ centésimaux. On dissout ainsi la glucose et on laisse l'inosite insoluble dans l'alcool.

Dosage d« i*inosite. — Une urine qui contient de l'inosite, après avoir été privée d'albumine par une petite quantité d'acide azotique, se teinte en rose quand on la chaufle avec quelques gouttes d'une solution de mercure dans le double de son poids d'acide azotique. Cette coloration pâlit ou disparaît à froid. S'il j a de la glucose il se fait un précipité noir.

Pour doser Tinosite, le résidu de Turine insoluble dans l'alcool froid, est soumis, à la température de 36°, à Faction de la levure de bière qui détruit par fermentatation les traces de glucose que l'alcool a pu ne pas dissoudre. Au bout de 40 heures, la liqueur est traitée par le sous-acétate de plomb, et le précipité, après avoir été lavé à l'eau, est décomposé par l'hydrogène sulfuré. On filtre, pour séparer le sulfate de plomb, et on abandonne 24 heures la liqueur, pour laisser se déposer un peu d'acide urique ; on la concentre ensuite, et on ajoute cnfm au liquide 4 ou 5 fois son volume d'alcool bouillant, à OO"" centésimaux, on filtre encore, et l'on mélange le filtra tum de la moitié de son volume d'éther. L'inosite se sépare alors soit en cristaux, soit en flocons, qu'on lave à l'alcool froid et à l'éther, et que l'on pèse.

DoMi^e d« la f incose. — La glucosc dc l'urine diabétique est la drxlro-glucose identique avec celui de.fruit ou de raisin. On peut

• DÉTERUmATION DE L'ALBUMINE, DU GLUCOSE, DE LIMOSITE. 73

doser ce corps : (a). Par réduction d*unc liqueur titrée de cuivre. — (b). Par la fermentation — (c), par le sacharrimètre.

(a) Dosage du sucre par les liqueurs titrées de cuivre. — On dissout 260 grammes de tartrate double de potasse et de soude dans 200 grammes d*eau distillée, on ajoute à cette solution 500 grammes de lessive de soude à 24^ Baume, puis on dissout 3C,46 de sulfate de cuivre cristallisé pur dans 140 grammes d*cau environ, et l'on verse peu à peu cette dernière solution dans le mélange des liqueurs précédentes ; enfin, Ton ajoute de l'eau de façon i obtenir 1000 centimètres cubes de réactif à 15^. On divise ensuite cette liqueur dans de petits flacons de 30 grammes bouchés a Témeri. Le réactif cupropotassique ainsi préparé d'après les indications de M. Violette a l'avantage de se conserver, même à la lumière, sans que son titre change sensiblement. 0',005 de glucose sec décolorent à TébuUilion 1 centimètre cube de cette dissolution en transformant l'oxyde de cuivre en oxydule qui se précipite. Il est toutefois nécessaire de doser la liqueur cupropotassique avec un poids connu de sucre candi qu'on intervertira.

Pour procéder à un dosage de glucose, on étend l'urine, ainsi que la solution cupropotassique, de 2 à 3 fois son volume d'eau, on porte à l'ébuUition, dans une petite fiole, un volume connu du réactif titré, et Ton y verse, au moyen d'une burette graduée, l'urine étendue tant qu'il n'y a pas, àrébullitiony décoloration complète ^ Le volume d'urine ainsi dépensé contient la quantité de sucre capable de réduire la quantité de liqueur cuprique employée.

Quelques corps peuvent, comme la glucose, réduire le réactif cupropotassique, mais leur action n'est pas instantanée et ne précède pas l'ébuUition comme cela a lieu pour le sucre. Parmi ces substances réductrices citons : la leucine, l'allantoïne, la créa- Une, la créatinine, le tannin, le chloroforme, l'acide urique. D'un autre côté, une urine riche en créatinine (et peut-être en hypoxanthine), ou en albumine, ne donne pas de précipité d'oxydule de cuivre, si elle ne contient que peu de sucre.

D'autres substances encore masquent la réduction de l'oxyde de cuivre, celles en particulier qui sont enlevées à l'urine par le

* On doit obscnrer qu'on doit de temps en temps retirer la liqueur du feu et la laister déposer pour observer sa coloration. Toutefois si l'on attendait trop longtemps, l'air réoxyderait Toxydule et ce liquide se colorerait de nouveau en bleu.

H LES REIKS ET L'CRIHE IfOBULE.

charbon, telles que les matières colorantes et t'acide oxaluriqae, Maly conseille donc d'agiter l'urine avec du eharbon animal et de U filtrer avant d'essayer la présence du sucre ou d'en faire le dosage '; toutefois le noir animal retient une partie de la glucose*.

(6) Dosage par la fermentation. — On se sert de l'appareil à dosage d'acide carbonique par perte. On place dans le ballon Ade 15 à 30 centimètres cubes d'urine, avec une trace d'acide tartrique et de levure de bière bien lavée et dans le ballon de B l'acide sulforiquc pur. Le ballon A. est laiué deux jours à 35°. Au bout de et temps on le balaye par un courant d'air et on le pèse ; la perte de poids qu'il a subi correspond i l'acide carbonique dégagé, qui luimême provient de la glucose.

Quoique 100 de glucose anhy-

Fig. sa. -Dosage du (utredelurine ^l™ (C'H'H)') duSSent théorique-

P«r farmiorBiioD. ment donner par fermentatjoD

48,8S d'acide carbonique, en réalité il ne se produit, d'après les expériences de Pasteur, que 46,88 de ce gaz. La perte de poids, après fermentation, devra donc être multipliée par 1 ,042 pour obtenir le poids de l'acide carbonîqDe théorique qui correspondrait à l'équation :

Le poids d'acide carbonique ainsi calculé multiplié par 3,04, ou bien celui de l'acide carbonique réellement dégagé multiplié par 2,126 donnera le poids du glucose correspondant.

(c) Dosage du sucre au sacharimèlre, — 11 sera bon de s'assurer d'avance, que toute autre substance active, telle que l'albumine ou l'inosite, ne se trouvent pas dans l'urine. S'il n'en était pas ainsi, il faudrait séparer ces substances des urines.

Je ne ferai pas la description du saccliarimètrc do Soleil, le plus

' Ztittch. far a-tal. Chera., t. X. p

- Bull. Soc. ckir»., 1. XVII, p. IKel

DÉTERMUÏATION DE L'ALBUMINE, DU GLUCOSE, DE L'INOSITE. 75

employé. Biais je rappellerai que cet instrument est fondé sur la neutralisation par le sucre dextrogyrc de la rotation que la lumière polarisée éprouve en traversant une certaine épaisseur de quartz léTogyre qu'on interpose entre le liquide sucré et l'œil.

On peut graduer l'appareil avec une solution titrée de glucose et savoir à combien de sucre correspond chaque division du curseur. Dans le polarimètre de Soleil^ portant un tube de 20 centimètres de long rempli du liquide actif, une division correspond à 0*^,1647 de sucre ordinaire et à 0^,2256 de glucose dissous dans 100 centimètres cubes d'urine ou d'un liquide inactif.