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urique, est sensible à 1/3.000.000 pour l’adrénaline.
La réaction de MuLoN [109] à l'acide osmique est une succession de teintes, d’abord roses, puis noires; l'adrénaline est d’abord oxydée, puis l’acide osmique est réduit.
Toutes les autres réactions colorées classiques de l’adrénaline se terminent par une coloration rose due à l'oxydation de ce corps, qu’il s'agisse de lPoxydation directe par l’air, ou bien en présence de cataiyseurs physiques (lumière), biochimiques (oxydases) ou chimiques.
Les solutions aqueuses d’adrénaline rosissent à l'air, et cette oxydation est favorisée par l’alcalinité du milieu. Ainsi oxydée, l’adrénaline perd ses propriétés physiologiques (BATTELLI [37 ]).
L’oxydation est accélérée par la catalyse Ilumineuse. Les rayons ultra-violets n’agissent que lentement en milieu acide, mais très rapidement en milieu alcalin (VACEK [136 |); d’ailleurs, ce n’est pas, semblet-il, une question de pH qui entre en jeu, mais plutôt une question de nature de l’acide (VACEK |137)).
Les oxydants activent également la réaction. GEs- SARD (1904) montrait déjà l'action de la tyrosinase. L’enzyme de la poche à encre des seiches (NEUBERG, 1908), la tyrosinase du Russula delica (ABDERHALDEN et GRUGGENHEIM, 1908) diminuent également la durée d'apparition de la teinte rose.
Ce sont surtout les oxydants chimiques qui ont été étudiés. Extrêmement nombreux sont ceux qui donnent des réactions pratiques. L’iode, l’acide iodique, le sublimé en présence d’un acide faible, les persul-
En Vre
fates, les -ferricyanures, les sels de manganèse, le nitrate d'argent en solution ammoniacale, oxydent tous l’adrénaline, et quelles que soient les modalités suivies, on aboutit toujours à une coloration rose. BorserG (1912) croit qu'il s’agit du même composé d’oxydation. La coloration, suivant le cas, est plus ou moins stable et l'intensité est variable selon le réactif, Le plus sensible est le réactif au persulfate (Pan- CRAZIO-Ewins) qui atteint le 1/5:000.000. Mais cette réaction n’est pas toujours spécifique de l’adrénaline, certaines bases étant capables, comme elle, de s’oxy-
der en présence d25 mêmes réactifs (Ewins [58]).
Applications des réactions colorées de l'adrénaline à sa recherche qualitative et quantitative.
Quoique toutes ces réactions n2 soient pas rigoureusement spécifiques, elles sont cependant largement mises à profit pour la recherche qualitative (1) et quantitative de l’adrénaline.
Pour lPappréciation quantitative de l’adrénaline
deux moyens peuvent être envisagés suivant que l’on
(D L’histo-chimie utilise un certain nombre de ces réactions pour mettre en évidence l’adrénaline. À côté des réactions chromafine MuLOoN [108] ct sidéraffine Craccro [49], d’autres ont été signalées, qui sont fondées soit sur une modification de la réaction de HENLE (méthode de Bacixskr au chromate d’argent [30]), soit sur la réduction de l'acide osmique. Les granulations que GRYNFELTY [72] avait étudiées se colorent bien par la méthode de l’acide osmique en vapeur (MuLox [1091) et celle-ci est devenue la méthode de CHEVREL (d’après PRENANT |118]) et de Crimer 1531. LAIGNEL-LAVASTINE [80] a basé son procédé sur la réduction du uitrate d'argent amincniacal qui teint littéralement la médullaïire en noir.
Mais cette technique, pas plus que les autres (en particulier celle qu'utilise la réaction chromaffine, VERNS= [139]) ne peut, de toute évidence, être considérée comme susceptible de caractériser électivement l’adrénaline, le nitrate d'argent ammoniacal se réduisant le plus souvent sans cause apparente.
SAONE
mettra en œuvre les réactions chimiques ou les actions physiologiques. Chacun d’eux offre des avantages et des difficultés variables.
La première méthode chimique quantitative date de 1902. C’est celle de Barrerrr [34] qui utilise la réaction de VuLPIAX au perchlorure de fer, et apprécie Ja limite extrême de visibilité de la réaction. BATTELLI compare les résultats de sa méthode avec ceux que donne la méthode physiologique et trouve cette dernière moins avantageuse. Cependant, on peut reprocher à cette réaction colorimétrique d’être soumise à un certain nombre d’influences perturbatrices, telle que l’acidité (BouLzup et Fayoz [42]) et la concentration en FeCB. D’autre part, il est difficile d'apprécier avec certitude la limite extrême de visibilité. Aussi, malgré les modifications apportées à la technique primitive et l'augmentation de sa sensibilité, soit par addition d’acide sulfanilique ou de sel de Seignette (von FürrH, 1901), elle paraît aujourd'hui complètement délaissée.
L’oxydation par l’iode déjà notée par VULPIAN 1143! a donné lieu à un grand nombre de recherches. Les unes utilisent directement Fliode et font disparaître l’excès de réactif par l’éther (SCHUR) ou par lhyposulfite (ABELOUS, SOULIÉ et Touyax [23]). D’autres emploient l’acide iodique (KRAUSS).
Un autre groupe de méthodes repose sur Pemploi du sublimé comme catalyseur d’oxydation (COMESsATTI [51], 1909) en présence de sels d'acides faibles (ŒEwixs, 1910). C’est cette réaction que Baïzzy [51] a
appliquée au dosage colorimétrique de ladrénaline
ML EE) Pers
pour lequel il a donné une technique généralement adoptée en France.
Enfin, la réaction à l’acide phosphotungstique de Foix, CANNON et DENIS [62] semble très appréciée en Amérique, à cause de sa sensibilité. Elle avait aussi l'avantage, au moment de sa parution où l’adrénaline était rare et coûteuse, de ne pas nécessiter une solution étalon d’adrénaline facile à reinplacer par une solution d’acide urique.
Mais le réactif phosphotungstique est influence par de multiples facteurs et sa sensibilité est trop grande. Les résultats qu’il donne sont fréquemment en ceitradiction avec ceux de la méthode physiologique si l’on en croit divers auteurs (SUGAWARA [130], MAIWEG [93], WATANABE et Suro (1441).
