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trouvons une coloration rose, tirant simplement sur le violet. Les tubes témoins sont reslés intacts.

Quelle explication pouvons-nous donner de ces résultats ?

Interprétation et Conclusion.

Il est évident d'abord qu'il s’est formé de lindol; la présence de la macération de viande dans le milieu lexplique. la coloration rose obtenue par la réaction de Denigès en est la preuve. L’indol, en bouillon, avons-nous dit, n'apparaît qu'au bout de quelques jours, de même sur nos lubes de gélo-peplone, ce n’est qu'au bout de 4 jours que nous voyons naître la coloration rose, qui s'accentue jusqu'au quinzième jour.

D'où provient la coloration violette? Nous ne l'avons jamais obtenue avec la peptone Chapoteaux, ou l'agar pur, dont nous nous sommes servi, et pourtant elle a été constante dans nos tubes en expérience. Nous avons alors songé à un élément surajoulé au milieu, l’albumine, dont on se sert pour le coller. Il est vrai qu'elle est en grande partie coagulée el retenue par la filtration en même temps que les impuretés qu'elle entraîne; mais il est impossible d’affirmer que tout soit resté sur le filtre et qu’il n'en passe pas une certaine quantité.

Nous faisons alors une nouvelle série d'expériences ayant pour but de faire la réaction à la vanilline dans des tubes de gélo-peptone identiques aux précédents, où nous ajoutons des quantités déterminées de solution d'albumine d'œuf ; nous diluons un blanc d'œuf dans 250 cce3 d’eau et dans six tubes nous meltons à l’aide d'une pipelte stérilisée 1, 2, 3cc3, elc..., de cette solution. Nous stérilisons à l’autoclave, l’albumine se coagule et s’incorpore à la masse liquide.

Après refroidissement, nous ensemençons avec nos coli.

Nous mettons à l’étuve avec 3 tubes témoins qui renferment eux aussi, 2, 4, 6ec3 de la solution d'albumine.

Faisant, 48 heures après, la réaction de Findol, nous trouvons qu'il se développe une coloration violette intense, proportionnelle à Ia quantité d’albumine ajoutée dans les tubes ensemencés, Les témoins ne donnent rien.

I} était intéressant de voir s’il y avait un rapport entre la production «d’indol par le microbe et l’existence de cette coloration. À cet’effet, nous faisons la réaction de Denigès dans de nombreuses cultures du laboraloire, faites en milieu gélo-peptone ordinaire : citons au hasard les b. dysenlérique, subtilis, typhique, des levures, le vibrion cholérique ; seul, ce dernier a donné la coloration rose-violet et c’est précisément le seul d’entre les bacilles que nous énumérons, qui soit producteur d’indol comme le coli-bacille.

Une solution fraîche d’albumine d'œuf ne donne non plus aucune coloration. Laissons maintenant cette même solution à l’air libre ; elle est bientôt envahie par les microbes de la putréfaction. Au bout de 48 heures, la réaction à la vanilline y donne la coloration violette. Nous savons que les germes vulgaires de la putréfaction produisent de l’indol parmi les nombreux déchets de la matière albuminoïde attaquée ; il apparaît donc que l’on doive attribuer la coloration violette dans l’action du coli-bacille sur le milieu à la gélo-peptone que nous avons employé, à la présence d’albumine d'œuf attaquée et réduite par ce microbe, comme l’est la méthode pancréatique elle-même ; mais tandis que celle-ci aboutit à l’indol caractérisé par la coloration rose avec la vanilline, l’albumine plus complexe fournirait d’autres produits divers de la putréfaction, des acides animés (leucine, tyrosine), des plomaïines (cadavérine, putrescine), comme l’a montré Rettger, du tryptophane méme, mais qui ne serait pas sous une forme telle qu'il puisse se dédoubler facilement en indol, CO? et A?Ni.

Peut-être enfin, cette coloration viendrait-elle de la présence, dans les produits de désintégration, du noyau imi-

LOG. de

dazol qui existe à la fois dans l'hystidine et le tryptophane, l'hystidine formant l'une des trois bases hexoniques fournies par l’hydrolyse des matières albuminoïdes, et devant se trouver dans les déchets laissés par le microbe. C’est une simple hypothèse de M. Denigès, sur cette question délicate à résoudre et qui demanderait de nouvelles recherches.

Si maintenant nous rapprochons ces faits de ce que nous avons dit de l'essai des peplones du commerce qui donnent parfois la coloration violette avec la vanilline, nous pouvons en donner une explication.

Les matières albuminoïdes qui servent de base à la préparalion de ces peptones sont éminemment putrescibles. Il se peut très bien que, pendant le traitement qu'on leur fait subir, les microbes vulgaires de la putréfaction, agissant comme notre coli en présence d’albumine, produisent des composés analogues à ceux que nous avons déjà signalés. Ces produits, incorporés à la peptone, auront pour effet de donner avec la vanilline, la coloration violette, sans que nous puissions dire quel est le noyau chimique exact qui en est l’origine.

Aussi aujourd'hui, tend-on de plus en plus, pour la recherche d’indol, à substituer aux peptones commerciales, des digestions pepsiques ou pancréatiques, ou des solutions d'acides amidés connus (Porcher et Panissel). On peut se servir des peplones du commerce à la condition formelle d'opérer comme le fait toujours M. Ferré: mettre à l’étuve des tubes témoins, où l’on fait la recherche de l’indol en même temps que dans les tubes de culture.

CHAPTIRES TV

Recherches sur la nature diastasique

des réactions.

Diastases en général — Diastases microbiennes.

La notion de diastase, depuis 1826, date des premiers travaux de Mistcherlich sur les propriétés fermentatives du liquide de macération de la levure de bière, a pris une place considérable en biologie. L'on admet aujourd'hui que ce que nous pouvons appeler manifestation vitale d’une cellule se fait par l'intermédiaire d'une diastase qui peut en être extraite et fonctionner en dehors d'elle (Duclaux). Les études ont surtout porté sur les cellules des animaux supérieurs et des végélaux inférieurs (champignons, algues, levures), et on a pu reproduire, sans l'intervention de la cellule, tous les phénomènes de nutrition.

Comme l’on a comparé la cellule microbienne à celle des animaux supérieurs, On a donné aux résultats de ces travaux, une portée générale, et « les diastases apparaissent comme les agents essentiels de fonctionnement de tous les lissus ; cette notion a détrôné la cellule; ce que la cellule conserve, et qu’on n’a pu lui enlever jusqu'ici, c’est la direc-