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tion de cet ensemble de forces qu’elle aménage de façon à être un organe à la fois très plastique et très résistant. » (1).

Les diastases des microbes onf été moins étudiées cependant, on en connaît déjà beaucoup ; citons l’amylase trouvée en grande quantité par Fermi dans les bouillons de culture des b. ramosus, subtilis, mégaterium ; l’uréase découverte par Miquel, chez divers microbes faisant fermenter l’urée et spécialement étudiée par Dubourg, chez le. micrococcus uréæ ; la présure et la caséase observées par Duclaux, en faisant arriver dans du lait les filtrats sur bougie, de cultures en bouillon de tyrothrix tenuis : la gelatinase, diastase liquéfiant la gélatine trouvée par le même procécédé chez le staphylocoque, le v. cholérique, le b. du charbon, le b. pyocyanique. Chez le coli-bacille, on ne signale guère que l’amylase que Fermi aurait isolée.

Cependant, si nous attribuons les réactions biologiques des cellules microbiennes aux diastases, il nous semble que le coli doive en secréter un grand nombre. Nous savons, en effel, ce que l’on entend par « spécificité » des diastases : à chaque composé chimique susceptible d’être transformé, s’applique une diastase différente: nous savons, par exemple, que les 4 disaccharides du glycose droit, maltose, tréhalose, gentianose et touranose, ont chacun leur diastase propre qui les dédouble et n’atteint pas les trois autres. Cette spécificité n’est peut être pas absolue, car il paraît exister des diastases à champ d'action plus étendu, comme l’émulsine et la lyrosinase, et les diastases protéolytiques ; mais celles-ci ne sont peut-être qu'un mélange de plusieurs diasfases.

Quoiqu'il soit le coli-bacille qui attaque les matières albuminoides, qui fait fermenter lurée, qui attaque l’amidon, fait fermenter divers sucres, réduit les nitrates, doit secréter autant de diastases que l’exige le nombre de ces diver-

(1) Duclaux, Microbiologie, t. 2, p. 738.

ses réactions ; et encore nous ne parlons pas des diastases de recomposition, de synthèse, qui commencent à être connues. Rien ne s'oppose à cette conception si l'on sait que dans la cellule de l’aspergillus niger, sur liquide de Raulin, Bourquelot a trouvé à la fois de la maltase, de la tréhalase, de l’amylase, de l’inulase, de la trypsine, etc.

Sans vouloir rechercher toutes les diastases que pourrait secréter le coli-bacille, nous nous sommes adressé aux réactions les plus simples: fermentation du glucose et du lactose, désintégration de la matière protéique, principalement des peptones ; ce sont les seules réactions pour lesquelles nous avons recherché des diastases.

Méthode à employer.

Quelle méthode devions-nous employer dans cette étude ? Gunidnousissutfiservavants dela décrire, der citer ce passage de Duclaux

« Quand il s’agit de savoir si une macération organique » contient une diastase, par exemple de la sucrase, on y » ajoute un peu de solution de saccharose, on porte à 35 » ou 40 degrés et on attend. Il faut attendre longtemps, » quand il y a peu de diastase, et encore plus longtemps » quand il n’y en a pas du tout. Or, pendant ce temps, » interviennent à peu près inévitablement les ferments du » sucre dont les germes sont partout, et qui produisent des » diastases identiques à celles que l’on recherche dans la » macération. Cette confusion a été fréquente à l’époque où » on ignorait les microbes et beaucoup d'expériences sont » à recommencer, de ce fait... [Il faut, pour éviter loutes les » incertitudes provenant de ce chef, opérer soit avec des » liquides stériles, soit avec des liquides antiseptisés. Il n’est » pas facile de stériliser le liquide diastasique, qui ne peut

» être chauffé, même à 100 degrés, sans perdre ses pro- » priétés ; mais on peut prendre le liquide de macération » d’une culture pure ; on peut aussi filtrer la solution au tra- » vers d’une bougie de porcelaine. [1 ne faut pas oublier que » cette filtration peut dépouiller la solution d'une partie de » sa diastase, et même de sa totalité s’il y en a peu. Il faut » aussi se rappeler que toutes les diastases ne sont pas tou- » jours également filtrables. En principe, il n'y a pas de » diastase filtrable ou non filtrable d'une façon absolue, à » travers la porcelaine. Il y a des diastases qui dans cér- » tains cas sont filtrables et qui ne le sont pas, ou le sont » moins dans d’autres. Cela dépend de la puissance variable » d'adhésion de la diastase pour la matière des parois. Hya » des cas particuliers, il nya pas de règle générale. » (1).

Nous voyons pas là quelle méthode rigoureuse il est nécessaire d'employer pour se mettre à l’abri des causes d’erreur. Prendre, comme l’a fait Büchner, un liquide de levure traitée de certaine façon, le filtrer sur papier et opérer avec ce filtrat comme liquide diastasifère, tel était son premier procédé ; il fut naturellement critiqué, et l’auteur dut faire de nouvelles expériences pour enlever les doutes qui s'étaient élevés sur ses résultats: l'identité de la zymase n’en fut d’ailleurs que mieux établie. Pour avoir la sucrase ou l’amylase de l’aspergillus niger développé sur liquide Raulin, on lave le mycélium en le faisant flotter quelques heures dans de l’eau distillée ; c’est dans le liquide recueilli que l’on recherche les diastases.

En opérant sur des microbes, il faut, comme nous l'avait signalé M. le Professeur Ferré dès le début de nos recherches, s’entourer de précautions plus nombreuses et éviter la présence d’un seul germe dans les liquides qui doivent contenir les diastases ; pour le coli-bacille, c'est d'autant plus important que ce microbe est très répandu dans la nature, et pourrail soujller rapidement les milieux étudiés.

(1) Duclaux. Microbiologie, t, 2, p. 117-118.