RAS VE

Avant d’en finir avec l’exposé de nos recherches, disons en-. core que nous avons essayé, en ajoutant des traces de, sulfate de manganèse dans nos filtrats, d'activer une réaction qui pouvait être cachée. Ce rôle du manganèse vis-à-vis.des dias- {ases esb bien connu depuis les travaux de M. Bertrand, mais il est spécial aux oxydases ; aussi, selon notre prévision, nous n'avons trouvé aucun changement.

Quelle conclusion tirerons-nous de ce dernier chapitre de nos expériences, qui certes ne nous ont pas donné les résullats que nous attendions? Considérant les faits, nous sommes obligé de convenir que nous avons été déçu de ne pas trouver une seule diastase dans un filtrat de culture de coli; ce procédé a cependant permis à d’autres auteurs d'isoler des diastases chez des microorganismes, dont les réactions biologiques sont loin d’être aussi énergiques que celles du coli-bacille. Ce fait est d'autant plus intéressant, que nous savons que certaines toxines qui sont analogues aux diastases sur beaucoup de points, passent dans les filtraits sur bougie, et pour le coli cette remarque s'appli- ‘que parfaitement. Le rôle pathogène de cette exotoxine du coli est connu depuis longtemps, et nous-même avons eu l’occasion d'observer, dans un travail d’un ordre différent, des phénomènes morbides chez des lapins qui avaient reçu quelques centicubes de nos filtrats d'étude.

Pourquoi ne trouvons-nous pas de diastases au même titre que des toxines? Nous constatons simplement le fait, sans en donner d'explication. Mais, irons-nous jusqu'à dire que le coli ne produit pas ses réactions par le mécanisme diastasique habiluel * Nous n'avons pas la prétention de dire que nous avons épuisé tous les procédés à employer dans ces recherches. Nous avons suivi une méthode rigoureuse qui doit toujours être observée, quel que soit la procédé dont on se serve. Nous avons vu à quelle erreur nous avons été amené, en négligeant ce principe dans une de nos expériences. Le b. sublilis, qui existe partout, et dont les Spores résistent si bien à la chaleur, est toujours prêt à souil-

ler les milieux où lasepsie n’est pas absolue ; ses propriétés sont peu connues ; il y a dix ans même, on ne lui connaissait aucun réaction biologique, on n’en aurait pas tenu compte. Aujourd'hui, on commence à voir qu'il attaque la matière albuminoide et doit secréler une diastase peptolylique ; Vandevelde signale que dans certains cas il peut faire fermenter le lactose ; il peut donc, par suite, coaguler le lait ; il n'y a rien là qui doive nous surprendre, on s'imaginerait difficilement qu'un microbe vivant sur un milieu nutritif n'arrive pas à le transformer.

La recherche des diastases n’est évidemment pas un travail facile ; à chaque pas, les causes d'erreur apparaissent ; on. peut au moins éviter celles qui résultent d’un manque de méthode.

Nous aurions beaucoup à faire encore si nous voulions poursuivre ce travail commencé sur le coli-bacille. Certes, la préparation d’une masse microbienne énorme, pouvant être broyée et pressée à 50 atmosphères, suivant Ia méthode de Büchner et Rapp, pour la levure de bière, n’est pas chose facile. Pourtant nous sommes convaincu que c'est dans ce seul moyen que l’on peut avoir des résultats probants et définitifs sur la nature et l’existence des diastases secrétées par le coli. Qu'il nous ait suffi de signaler que le problème n’est pas simple comme on pourrait le supposer tout d’abord. « Quand une diastase apparaît et que » l’on est à l’abri de toute cause d'erreur, c’est qu’elle exis- » te réellement ; mais lorsqu'elle n'apparaît pas, on ne peut » pas conclure tout de suite qu’elle est absente, il faut y » regarder de plus près. » (Duclaux).

TEE CAT l fon CUT b

Lo DO

té

Conclusions générales.

I — Dans un chapitre de ce travail, nous avons attiré l'attention sur la fréquence du retour à la coloration primitive des milieux au neutral-roth, ayant viré et étant devenus fluorescents sous l'influence du coli-bacille. Nous avons montré dans ce phénomène le rôle de l'acidité créée par le glucose dans la composiion des milieux et nous avons conclu à la suppression pure et simple de cette substance, si l’on voulait avoir une réaction durable.

Il. — Au sujet de la production d’indol par le coli-bacille sur milieu à la peplone, nous avons signalé l'importance de l'essai préliminaire de la peptone avant son emploi et la nécessité de mettre toujours à l’étuve, à côté des tubes ensemencés, des tubes témoins où l’on fera la même réaction. Appliquant la réaction de Denigès à la vanilline, nous avons vu que la coloration rose caractéristique de l’indol était quelquefois remplacée dans les peptones témoins par une coloration violette. Nous avons retrouvé cette coloration vio- Jette dans des tubes à la gélo-peptone ensemencés de colibacilles, et nous avons montré le rapport qu’il y avait entre la présence des produits de désintégration de l’albumine, sous l'influence de ce microbe, et la coloration obtenue ; cette réaction est donc de même nature que celle de lindol et si nous la trouvons avec des peptones commercia-

Et Ge (Xe les, c’est que ces peptones ont, pendant leur préparation, subi une certaine décomposition par l'attaque des microbes vulgaires de la putréfaction ; ceux-ci, comme le coli, dégradent la matière protéique jusqu'à des termes voisins du tryptophane ou d'acides animés renfermant un noyau qui donnerait une coloration violette avec la vanilline.

III. — Dans notre dernier chapitre, nous avons recherché la nature des diastases secrétées par le coli-bacille. Les filtrats sur bougie de porcelaine de cultures en milieu azoté ou hydrocarboné, ne nous ont pas permis d'isoler de diastases. Le broyage avec du sable et de l’eau, de cultures sur pomme de terre, ne nous l’a pas permis davantage. Il apparaît donc que, pour avoir des résultats positifs, il faudrait faire le broyage des cellules, suivi de compression, comme Büchner l’a fait pour extraire la zymase de la levure de bière. Nous avons attiré l’attention sur la rigueur de la méthode à suivre dans ces travaux. Nous avons vu combien nombreuses étaient les causes d'erreur et nous avons démontré que l’asepsie était la première règle à observer, faute de quoi des résultats qui paraissent positifs peuvent toujours être critiqués.

Vu, bon à imprimer:

Le Président de la Thèse, Vu: Le Doyen, D' FERRÉ. Pour le Doyen :

L'Assesseur, Dr A, MOUSSOUS.

Vuet permis d'imprimer :

Bordeaux, le 13 Novembre 1913.

Le Recteur de l'Académie, R, THAMIN: