CARACTÈRES DE LA TOXINE TÉTANIQUE

Tous les auteurs sont d’accord pour dire qu'il n’existe actuellement aucun caractère spécial, organoleptique, chi-

PSE LE

mique ou physique de la toxine tétanique qui permet de la décéler et d’en reconnaître la nature ; seules les réactions biologiques, l’inoculation peuvent renssigner à ce sujet. Il est pourtant un certain nombre de caractères, de propriétés physico-chimiques qui, quoique non spéci-

fiques, doivent être connus.

Ainsi, parexemple, on sait qu’un chauffage de + 60° à + 65° pendant cinq minutes détruit la substanee active de la toxine filtrée ; cette destruction serait incomplète, suivant Vaillard et Rouget, car, pour eux, un chauffage à + 80°, prolongé pendant une heure, est nécessaire | pour supprimer d’une façon absolue l’action contracturante du poison tétanique. Outre le chauffage à ces tempé- -ratures, une chaleur moins élevée mais persistante, l’air, la lumière atténuent la substance active et peuvent à la longue la détruire ; d’où cette indication, pour conserver une toxine tétanique liquide, pure et-active, de placer le récipient qui la contient dans une glacière où il est à l’abri de la chaleur et de la lumière. La protection contre Vair est assurée en introduisant dans le récipient, avant sa stérilisation, une mince couche d’huile. L’huile, plus légère que le produit de filtration, surnage et l’isole com- plètement de l'oxygène atmosphérique, car c’est par son oxygèné que l'air joue un rôle destructeur. Les travaux, sur ce point, ont en effet montré que la culture filtrée conserve toute son activité si, au lieu de la maintenir dans le vide, on la maintient dans une athmosphère d’hy- | drogène. Divers autres artifices, tenant au récipient et à son mode de bouchage, achèvent encore l'isolement et permettent de prélever un volume mesuré de toxine sens

avoir à craindre de rentrée d’air ; mais tous ces détails techniques n’ont pas leur place dans notre travail,

Nous avons dit tout à l’heure toxine tétanique liquide ; c’est qu’il faut savoir qu’elle peut être aussi conservée à l’état sec. On l’obtient aussi en faisant évaporer la culture filtrée dans une étuve à vide chauffée à + 80° dans le vide et en pulvérisant le résidu, qui est compté en millgrammes. On prend pour sa conservation les mêmes | précautions que pour la toxine liquide, c’est-à-dire qu’on = l’abrite de l’air, de la chaleur et de la lumière. On pré- | tend que la toxine sèche, qui a l’inconvénient d’exiger

une redissolution au moment de son emploi, mais risque moins de se contaminer, quand on en prélève une parcelle, conserve plus longtemps son activité, Ceci n’est pas prouvé et en tous cas n’a pas une importance bien grande si l’on songe que, déjà, à l’état liquide, la toxine tétanique conserveentière pendant des années ses propriétés et réactions.

Certains savants ont tenté, chimiquement, d’isoler et de : classer la substance active de la toxine tétanique. Voici

ce que leurs essais nous ont appris ; si l’on traite une

culture pure, filtrée, par l’alcool fort, on obtient un précipité ; que l’on vienne à injecter l'extrait alcoolique il n a aura pas de contractures ; mais Si, desséchant le précipité et le broyant dans l’eau où ilest soluble, on est conduit à injecter cette solution aqueuse, on donne le tétanos. Le précipité alcoolique contient donc toute la substoire contracturante. pans : tu ù Que l’on mette maintenant. dans un la toxine ne,

tétanique ou une solution jure de précipité aleoolique,

Le liquide extérieur ne sera pas tétanigène. Déterminons

dans la culture filtrée un précipité de phosphate de chaux

ou d’alumine, le liquide injecté ne donnera plus le téta-

nos ; mais redissolvons le précipité dans de l'eau légère-

ment acidulée, par exemple, dans le cas du phosphate de

: chaux, on communique à cette eau la propriété contrac-

turante. Le précipité contient donc toute la substance

active qui a été mécaniquement entraînée et fixée par lui.

La toxine tétanique, nous l’avons déjà dit, perd tout

pouvoir tétanigène à 80°. Des expériences faites sur la

grenouille ont permis de constater que son action était

= nulle aux températures voisines de 0°, qu’elle était lente

F à s’accomplir auxtempératures basses + 10° à + 15° par

c- exemple, et qu’elle devenait de plus en plus active à

2e mesure que s’élevait la température, jusqu’à une limite É optima variant entre + 37° et + 40°.

De tout ce qui précède on a conclu que la substance

active des toxines pures, filtrées du bacille de Nicolaïer-

Kitasato était de nature bnsinoide, voisine des diasta-

- ses. Elle peut en effet être comparée aux ferments solu-

bles ; comme eux elle est soluble dans l’eau et précipi- ‘ tée par l'alcool; comme eux encore, elle dialyse mal,est altérée ou détruite par des températures peu élevées, adhère aux précipités, etc., etc.

- Il est une propriété de la toxine tétanique, propriété qui Ju commune avec la toxine diphtérique et les venins, dont : nous n'avons pas encore parlé. C’est celle a être atténuée, voiremême détruite par les courantscon- AS tinus ou alternatifs de basse fréquence; par les courants 2 à haute Re on n’a el obtenir la moindre atté-

me 18 —

De la préparation de la toxine tétanique, nous n’allons dire que peu de mots. On emploie généralement comme milieu de culture du bacille tétanique le bouillon de bœuf additionné d’un peu de gélatine. Ce bouillon est placé dans un récipient qu'on stérilise alors à l’autoclave ; on ensemence avec plusieurs gouttes de culture pure et on fait le vide dans le récipient. Puis on le place à l’étuve à 38° et on l’y laisse vingt jours. Après quoi on laisse macérer la culture pendant plusieurs jours en l’agitant fréquemment, pour que la toxine qui adhère encore aux spores diffuse dans tout le liquide ; puis on filtre sur un filtre Chamberland, préalablement stérilisé, sous une pres- =. sion de trois ou quatre atmosphères. Le bouillon passe privé d'éléments figurés et contenant en dissolution la toxine ou poison tétanique. On a appelé, par extension, cette culture filtrée toxine tétanique. |

Nous pouvons maintenant aborder l’étude de ses réac- ÈS tions biologiques. |

Réactions biologiques de la toxine tètanique. — Qu’entend-on par les réactions biologiques de la toxine tétanique ? Ce sont les effets produits sur un organisme vivant par la pénétration dans ses tissus de cefte toxine , IT tétanique. Ces effets, généralement pathologiques, sont à de deux sortes ; les uns physiologiques, les autres sont histologiques. Nous avons dit que ces effets étaient généralement pathologiques ; ils ne le sont pas toujours en effet, car on ne peut faire rentrer dans le domaine de la

pathologie ceux qui sont produits, dans un but immunisant, par l'injection de toxine atténuée. Tous sont sans

doute unis les uns aux autres par dès liens . jusqu'à =

Due.

présent nous échappent, et cela d’autant plus facilement que certains de ces effets, certaines de ces réactions, en particulier les histologiques, sont encore très discutés, et niés; on ne peut par conséquent établir de relations de cause à effets sur un terrain si mouvant. Nous allons du reste les passer en revue en nous appuyant sur les

travaux les plus récents que nous analyserons rapide-

- ment; après quoi nous terminerons ce chapitre sur la

toxine tétanique par un exposé des diverses théories qui ont été émises sur le mécanisme de son action.

Quelles sont donc les réactions biologiques de cette toxine ? Pour nous répondre sur ce point la science dispose d’un procédé expérimental de choix, l’inoculation à des animaux de ce poison microbien. Cette inoculation ou injection de toxine reproduit exactement les symptômes du tétanos spontané ou consécutif à un traumatisme, à une plaie. Et voici ce qu’elle nous apprend :

a. — Effets physiologiques. — Tous les animaux ne

sont pas sensibles à la toxine tétanique ; ainsi, par exem-

ple, la tortue est complètement réfractaire au tétanos.

En revanche ilen est d’autres qui sont au coutraire d’une sensibilité extrême, et il est véritablement effrayant de penser à quelles doses, vraiment infinitésimales, de toxine succombent certains animaux, surtout sil’on songe

que l’homme doit probablement se placer parmi les plus

sensibles. Quelques chiffres parleront mieux à l'esprit;

si l’on prend uné même toxine et qu’on l’injecte sous la

peau de diverses espèces animales, on remarquera qu'il = suffit de 2 centimètres cubes de toxine tétanique pour tuer

un cheval, de 1/4 de centimètre cube pour tuer un lapin, d

mm 9) + <

1/10.000 cent. cube pour tuerun cobaye, de 1/1.009.000 de cent. cube pour tuer une souris. À côté de cela la poule pour certains serait réfractaire, pour d’autres serait tuée à10 cent. cubes. Faisons remarquer que tous ces chiffres ne sont qu'un indice de sensibilité apparente, et que, si l’on veut avoir l'indice de sensibilité réelle d’un animal, il faut calculer la dose nécessaire pour tuer un gramme de cet animal. Le cheval apparaît alors comme étant le plus sensible de tous les animaux, suivi d’assez près par le cobaye.

Mais nous avons parlé d’injections sous la peau; or on peut choisir d’autres voies pour injecter le liquide microbien, et, fait remarquable, toujours, quelle que soit la voie adoptée, notre tétanos expérimental reproduira, avec quelques variantes obligées, inhérentes à la voie suivie, les symptômes fondamentaux du tétanos spontané traumatique, c’est-à-dire les contractures avec redoublements compulsifs, une hyperthermie pouvant aller jusqu'à 41° et 42°, l'accélération du cœur, la dyspnée, le trismus, le spasme de la glotte,la dysphagie etc.,etc., tous symptômes qui rentrent dans la physiologie pathologique de la toxine tétanique, mais sur lesquels on nous permettra de ne pas insister. Il faut remarquer pourtant qu’à chaque voie suivie, et pour chaque espèce animale, les doses tétanigènes ne seront plus les mêmes, et, chose plus curieuse, on s’apercevra, en changeant d’espèce, que les proportions ‘ne vont pas toujours dans le même sens. Ainsi par exem-

ple « injectons sous la peau d’un lapin la dose minima

« de toxine lui donnant à coup sûr un tétanos mortel ; Si

« nous voulons obtenir le même résultat “Res ‘un secoud

els

lapin de même poids, mais en l’inoculant directement

« « dans la veine, il nous faudra employer une dose sept à « huit fois plus forte de la même toxine. C’est que, dans « le premier cas, la totalité de la toxine n’a pas été ab- « sorbée par les capillaires sanguins, une partie a suivi

« le trajet des filets nerveux et a atteint directement la

« moelle épinière, dans le deuxième cas, la toxine charriée

« par le torrent circulatoire, a partiellement subi des « transformations au contact des plasmas cellulaires ». (A.

Marie). Autre exemple : tandis qu’il faudra au lapin pour

le tétaniser beaucoup moins de toxine, par la voie céré-

brale que par la voie cutanée, il faut, au contraire, au rat, pour obtenir le même résultat, plus de toxine par la

voie sous-cutanée (Roux et Borrel). On pourrait faire

encore des remarques analogues sur les inject:ons

intra-péritonéales, intra-musculaires, ou encore les

injections sous-arachnoïdiennes, mais les exemples pré-

cédents ont suffi pour faire comprendre ce que nous vou-

Bons dire. 2 Avant d'aller plus avant il est un fait vraiment intéressant qu'il faut mettre en vedette. Chez l’homme le téta-

nos débute toujours par dutrismus quelle que soit la région

injectée (on en a presque fait un symptôme prodromique) ; j ‘chez les animaux, c’est par un des groupes musculaires

de la région inoculée que débute la contracture ; et mé-

me , pendant un temps plus ou moins long, cette région

est ‘seulé contracturée. Ce fait a une certaine importance car il montre suffisamment la différence qu'il y a entre

des résultats obtenus dans les laboratoires par des expé.

riences faites sur des animaux, et ceux observés en cli-

og ie

nique humaine. On voit donc avec quelle prudence on doit conclure des animaux à l’homme, et par conséquent ne päs toujours s'étonner quand certains résultats ne répondent pas à l’attente d’expérimentateurs qui ont généralisé trop vite.

Nous allons aborder maintenant un sujet très délicat et encore très-discuté : c’est celui qui a {rait au sort de la toxine tétanique dans l’organisme, et à certaines particularités dans son mode d’action qui luisont prêtées par quelques auteurs. Nous nous contenterons sur ce point d'exprimer les opinions, laissant à d’autres le soin de conclure.

Prenons la toxine tétanique à son entrée dans l’organisme et voyons ce qu’elle va devenir. Tout d’abord que va-t-il se passer au point d’inoculation ? Comment la toxine va-t-elle être absorbée us de là diffuser dans tout Jorganisme ? |

La question n’a pas à être posée quand il s’agit d’inoculation intra-veineuse ; la réponse serait trop simple: la toxine, dirait-on, est charriée par le torrent circulatoire -et transportée par le sang dans tous les organes et tissus. Prenons un cäs moins simple mais plus commun, et partant se rapprochant davantage des conditions pathogé- niques ordinaires de l'infection tétanique, celui de l’inoculation sous-cutanée ou bien encore intra-musculaire, Les expériences faites sur ce point tendent à prouver

que toute la toxine injectée n’est pas absorbée par les

capillaires sanguins, mais qu’une partie, suivant les filets.

nerveux, atteint directement là mœælle épinière. Voilà ce

qui se passe au point d’inoculation, 2

Nous la savons donc maintenant en partie lancée dans la circulation, en partie dirigée vers la mœælle épinière. C’est à présent qu'il sera curieux de la suivre. Malheureusement sur ce point il n’est quère possible de poser des conclusions fermes ; outre que tous les expérimentateurs ne sont pas d'accord, il se produit également ce fait que la toxine tétaniqu: paraît avoir un sort différent chez les diférentes espèces animales.

Pourtant il est un certain nombre de points que l’on peut admettre comme acquis : la toxine tétaniqne ne s’élimime pas ; l’urine, les excréments, la sueur, etc., n’en - contiennent à aucun moment.

Il n’en est pas moins prouvé que chez certains animaux les lapins par exemple, la toxine disparaît vers le milieu de la période d’incubation et qu’au moment où surviennent les contracturesaucune méthode expérimentale n’est capable de déceler la présence du poison dans le sang ou dans un organe quelconque. Il semble qu’il en soit de même chez l’homme.

De ceci que conclure. Faüt-il comme Marie et Blumen- . thal dire que la toxine s’est transformée en se combinant avec la substance cellulaire, ou bien faut-il penser que chez cet animal le magasin à toxine n’a pas été décou- ‘vert ? ï

= Nous ne serions pas éloigné de nous rallier à cette dernière opinion, car d’autres expériences ont prouvé qu'en revanche l'organisme de certains autres animaux conservait La toxine qui lui était donnée. Le cobaye, en effet, même après généralisation des contractures, con-

tient encore de la toxine, et les organës, en parüculier

RÉ O Te

son foie qui jouerait chez luile rôle de magasin, sont tétanigènes.

Ilest vrai qu'il faut ajouter qu’on a prétendu que la quantité de toxine aurait diminué. Chez les animaux à sang froid il est un autre fait curieux qu'ont bien mis en évidence les expérimentateurs qui se sont occupés de cette question. À basses températures, ces animaux conservent dans le sang, sans modifications, pendant des mois, la toxine tétanique qu’on leur inocule ;lelle finit pourtant par s’éliminer, mais extrêmement lentement.

D’aucuns prétendent même qu’elle ne s’élimine pas, mais se transforme à la longue en antitoxine. Qu’on vienne maintenant à faire des inoculations à ces animaux chauffés au-dessus de 30°, ou qu’on élève leur température à ces degrés au cours de la période inactive dont nous venons de parler, ils prendront alors le tétanos et la toxine, qui existe encore dans le sang au moment où apparaissent les contractures, disparaît au bout de quelques … Eee jours de tétanos. & à

Certains auteurs s'appuyant sur l'expérience de Was- ee. sermann et Takaki, dont nous parlerons plus loin ont." alors prétendu, en face de tous ces résultats contradic- 5

toires, que le magasin à toxine ignoré, dont nous parlions

tout à l'heure, serait les centres nerveux, mais que leur inoculation ne pourrait produire le tétanos. À cela on leur a répondu que le système nerveux de la grenouille ne neutralisait pas la toxine, et que pourtant, lorsqu'elle prenait le tétanos dans les conditions indiquées plus haut, la toxine disparaissait de son organisme. Cette objection de.

n'en est peut-être pas une, car on peut penser que chez

St DS

cet animal, il faudrait simplement chercher ailleurs, et qu'il a peut-être un autre organe dont la fonction serait l’analogue de celle du système nerveux chez les mammifères.

Mais ceci nous conduit à une autre ques'ion : la recherche de la toxine tétanique dans les différents organes, tissus liquides et secrétions. IL est déjà un fait acquis, admis par presque tous les auteurs qui se sont occupés de cette question. Jamais les urines ne contiennent de toxine et cette proposition est vraie, quelle que soit l’espèce animale en expérience, quelle que soit ce moment de l’in-

-cubation ou de l’état tétanique.

Nous avons déjà constaté dans le sang, la disparition de la toxine au milieu de lincubation chez certains animaux, (le lapin) ; au début des contractures chez d’autres (Grenouille chauffée) ; la présence constante, au contraire, de cette même toxine, même après généralisation des symptômes,chez certains autres (cobaye) quoiqu’en moindre quantité que pendant Pincubation. Le système

z nerveux central (cerveau et moelle) est de tous les appareils celui qui contient le moins de poison, que l’on ait affaire à un animal qui conserve longtemps sa toxine intacte ou bien à ceux qui laconsomment immédiatement. Le foie à l'inverse, semble jouer un rôle tout à fait spécial : c’est, en effet, le dernier organe restanttétanigène, et celui -de tous qui possède le plus de toxine tant que les : autres contiennent encore la leur. II semblerait qué le foie retint la toxinc intacte. - I serait intéressant d'étudier cette particularité du foie ;

5 mais tenter cette étude serait, malgré l’aide que pour-