EXPERIENCES

AU MOYEN DE STREPTOCOCCUS HAEMOLYTICUS.

Milieu :

Les Streptocoques présentent des exigences beaucoup plus grandes vis-à-vis des milieux nutritifs que les Staphylocoques. Pour obtenir un développement favorable, nous avons choisi un bouillon d’ascite (bouillon ordinaire avec 10% de liquide d’ascite) qui est particulièrement favorable au développement des Streptocoques.

Milieu ordinaire:

Extrait /denViande TA TIR RL LOGE.

Chlorure de Sodium" 022 3,0 gr.

Peptonenitmer L'an fAlsERs re 10,0 gr.

Fan =. nr Cure 100,0 gr.

L’extrait de Viande, la peptone et le Chlorure de Sodium sont dissous dans l’eau, à l’autoclave. On filtre et on ajuste le pH à 7,2 — 7,4. On ajoute ensuite, dans des conditions aseptiques 0,4 ce. de liquide d’acite dans les tubes contenant 4,1 cc. de bouillon et préalablement stérilisés à 110°. Les tubes sont conservés 24 heures à la température normale, quelques-uns prélevés au hasard sont placées à 37° pendant le même temps, puis on s’assure de leur stérilité par le contrôle de leur transparence. On les conserve ensuite dans le frigidaire.

Préparation de la suspension de Streptocoques:

On prépare une nouvelle culture par repiquage d’une souche pure de Streptococcus haemolyticus sur le milieu décrit plus haut. Après 60 heures à l’étuve, cette culture est repiquée de nouveau et après 60 heures d’étuve encore, elle est employée pour l’ensemencement de nos séries de tubes nécessaires pour chaque expérience.

Préparation de la dilution du jus:

Les dilutions du jus des feuilles ont été préparées d’une manière identique à celle utilisée lors des essais effectués au moyen des Staphylocoques.

Dosages définitifs:

Nous avons introduit dans chacun des tubes contenant 4,5 cc. de bouillon ascite 0,5 cc. des dilutions du jus effectuées à l’aide de Soluté physiologique stérile. Nous avons ainsi obtenu les dilutions contenant les proportions suivantes de jus de feuilles de Bergenia:

1:100, 1:200, 1:400, 1:800, 1:1600, 1:3200, 1:6400. Cette série est ensuite ensemencée avec 0,2 cc. de la suspension de Streplocoques hémolytiques préparée comme

nous l’avons indiquée antérieurement. Le tout a été soigneusement mélangé et placé pendant 60 heures à 37°.

Résultats :

Observations macroscopiques:

Après ce séjour à l’étuve, on a d’abord examiné macroscopiquement les tubes. Nous n’avons pu tirer aucune con-

clusion définitve de cet examen à la suite de la présence d’un précipité de tannin-albumine. Dans le tube-témoin, nous avons obtenu un dépôt tout à fait typique, formant un précipité granuleux, caractéristique du développement des Streptocoques.

Ces derniers forment en bouillon, à la différence de ce qui se passe pour les Staphylocoques, non pas un trouble homogène, mais au contraire un dépôt granuleux dù à leur densité relativement importante occasionnant leur sédimentation. |

Observations microscopiques:

Nous avons préparé un frottis de chaque tube et nous l’avons coloré par la méthode de GRAM. Pour toutes les dilutions l’image microscopique présente des formes rappelant morphologiquement des Coques. Mais les chaînettes que l’on peut observer sont très courtes et l’aspect des Coques n’est pas normal. Ils sont fortement gonflés et leur forme initialement sphérique est devenue allongée ou ovalaire et aplatie. La forme des bactéries ainsi observées rappelle plutôt celle de Strepto-bacilles.

Nous avons repiqué les cultures âgées de 60 heures après les avoir soigneusement agitées. On a introduit 0,5 cc. de chaque tube des différentes dilutions dans un nouveau bouillon d’ascite. Après 60 heures d’étuve, seuls le tube témoin et les dilutions supérieures à 1:3200 présentent un développement microbien.

Des frottis colorés au moyen de la méthode de GRAM ont permis de constater les mêmes faits.

Le tableau suivant résume les essais faits à l’aide des Streptocoques hémolytiques.

Concen- Croissance tration Image microscopique après 60 heures dans le du jus tube repiqué témoin | Coques en longues chaïinettes + : ee | Coques hypertrophiés LH

à } Coques en courtes chaînettes .

! \ Strepto - bacilles 1%:22600 TE P à OO tie « F2 # #5

s faiblement hypertrophiés

1223200 | à ADÉTITOR En 1 : 6400 Coques normaux SE

Interprétation:

De ces essais nous pouvons conclure que le jus des feuilles de Bergenia exerce une influence plus où moins nui-

= OÙI —

sible sur le développement des Streptocoques, spécialement sur celui du Streptocoque hémolytique. Le jus de la plante étudiée agit même à une dose fortement diluée (1:3000). La limite de l'effet antibiotique vis-à-vis des Streptocoques semble être plus poussée que celle observée pour les Staphyltocoques.

L'action bactériostatique ainsi que leffet bactéricide parait, là encore, se produire de manière progressive, de sorte qu’on peut toujours observer un développement éphémère dans les cultures.