IDENTIFICATION DES HUIT VITAMINES PROPOSEES

Pour la simplification de l’exposé, nous indiquerons brièvement comment nous avons identifié ces huit facteurs de croissance dans le Protéolysat. Nous n’envisagerons done, dans la suite, que le dosage et ne reviendrons ‘pas sur la caractérisation des Vitamines dont nous nous étions proposé la recherche et le dosage dans le Protéolysat à 2%, but de notre travail.

La technique employée fut sensiblement la même pour toutes. La souche et le milieu de base sont ceux que nous avons utilisés pour les dosages et que nous indiquerons à cette occasion, chacun variant en rapport avec la Vitamine à étudier. É

Toutefois, il est préférable de distinguer deux cas.

Premier cas. — Le cas où la Vitamine à identifier peut être décelé par un microorganisme-test qui lui est spécifique et où le milieu de base utilisé est strictement minéral: c’est le cas de la Vitamine PP.

Pour tous nos essais quelqu’ils soient, nous avons utilisé du matériel (pipettes, ballons, tubes à essais), préalablement

stérilisé au four Pasteur à 180° pendant une heure. TP

Tube 1 | Tube 2 Tube 3 5 cc. milieu de base 5 ce. milieu de base 5 cc. milieu de base minéral à minéral | minéral 1 cc. eau distillée 1 cc. dilution 1 cc. solution (témoin) Protéolysat étalon Vitamine | | | 0,1 cc. émulsion 0,1 ce. émulsion 0,1 ec. émulsion

bactérienne bactérienne bactérienne

MÉENC UN Car

Observations.

Si le Protéolysat contient le facteur de croissance recherché, identique à celui de la solution étalon mise en parallèle, nous constatons un trouble important dans les tubes 2 et 5, variable, cela va sans dire, selon le taux de dilution du Protéolysat ou la concentration de la solution étalon vitaminique.

Le tube TI ne montre aucune poussée microbienne: il sert de témoin: il est aussi limpide que le milieu de base initial.

2° cas. — C’est celui où le milieu de base renferme plusieurs Vitamines, autres que celle recherchée.

Ce procédé de caractérisation, nous l’avons employé pour la majorité des Vitamines envisagées; en voici la technique: ——————————— ——————

Tube 1 | Tube 2 Tube 3 | Tube 4

5 cc. mil. base 5 cc. mil. base | 5 cc. mil. base | 5 cc. mil. base

1 cc. eau dist. | 1 cc. dilution | 1 cc. de solution | I cc. de solution

Protéolysat | des 7 Vitamines | des 7 Vitamines à l'exception de! “+ la huitième la huitième

| Il 0,1 cc. émulsion 0,1 cc. émulsion 0,1 cc. émulsion 0,1 cc. émulsion

bactérienne | bactérienne | bactérienne bactérienne

Observations.

Si Le Protéolysat renferme la Vitamine recherchée, nous constatons un trouble important dans les tubes 2 et 4.

La croissance dans le tube 3 est évidemment plus faible: la solution ajoutée étant moins riche, puisque dépourvue de la Vitamine que nous voulons identifier.

Le tube I est le tube témoin: la croissance y est extrêmement légère en comparaison de celle des autres tubes, car la Bactérie ne dispose ici que des Vitamines qui se trouvent en très petites proportions dans le milieu de base. On peut dire qu’il y a survie, mais non croissance véritable, c’est pourquoi, le’ tube I peut être considéré comme témoin. |